Мегасофт антибиотик: инструкция по применению, аналоги, состав, показания

Содержание

Inuvet МанукаЛинд мазь

Мазь ManukaLind можно применять при всех видах травм.
Благодаря своей особой галеновой форме его можно вводить в раны с помощью канюль.

Тип продукта: Мазь
Срок годности: 3 года
Виды животных: все

Когда использовать цветы ManukaLind?
● для всех типов ран
● бактериальная инфекция раны
● некротическая ткань
● хирургические разрезы
● для лечения анальной железы
● хрупкие абсцессы
● экзема
● экзема вымени (коровы)
● острый мокрый дерматит
● Грязевая лихорадка
● грануляционная ткань

Зачем использовать цветы ManukaLind?
● Специальная галеновая форма: цветы можно вводить в раны с помощью канюли для лечения анальных желез и абсцессов.
● Комбинация ингредиентов идеально подходит для заживления ран: мед Манука обладает антибактериальным действием, растение жирового корня способствует грануляции раны и выведению токсинов, а эфирные масла предотвращают раны насекомых и не позволяют животному лизать зараженную область.

● Манука мед: самый мощный природный антибиотик (метилглиоксаль)
● Высокая концентрация метилглиоксаля и натурального безвредного манука (MGO 514+ / UMF 15+)

Состав и использование:

Манука медовая (MGO 514+)
Мед Манука родом из Новой Зеландии, где он используется поколениями для лечения. Экстракт медоносной пчелы получают из пыльцы и нектара цветов Манука (leptosperum scoparium) для создания этого чрезвычайно целебного меда. ManukaLind содержит высококачественный сертифицированный мед Манука из Новой Зеландии.

Экстракт листвы (Symphytum officinalis radix)
Жирные масла значительно улучшают омоложение кожи. Аллантоин, который содержится в корнеплодах и травах, оказывает положительное влияние на формирование клеток кожи. Стимулирует кровообращение раздраженной кожи и помогает успокоить зараженный участок.

Эфирные масла (лаванда, тимьян)
Эфирные масла обычно имеют неприятный вкус, который препятствует облизыванию животных и тем самым защищает зараженный участок. Эфирные масла также действуют как репеллент от летающих насекомых и других вредителей. Масло также безопасно для кошек.

состав:
Манука медовая (MGO 514+)
Экстракт жира (Symphytum officinalis radix)
Эфирные масла (лаванда, тимьян)
содержание:
15/75 г мази
Применение:
Очистите кожу животных (при необходимости аккуратно подстригите волосы ножницами).
Применить цветы ManukaLind. Используйте один-два раза в день.

информация:
Подходит для животных. Не хранить при температуре выше 25 ° C. Использовать в течение 6 месяцев после открытия.

Мегасеф 500 мг №10 табл.

Инструкция по медицинскому применению

лекарственного средства

Мегасеф® 250

Мегасеф® 500

Торговое название

Мегасеф® 250

Мегасеф® 500

Международное непатентованное название

Цефуроксим

Лекарственная форма

Таблетки, покрытые пленочной оболочкой 250 мг или 500 мг

Состав

Одна таблетка содержит

активное вещества: цефуроксима аксетила 300,72 (эквивалентно цефуроксиму 250.0) и 601,44 (эквивалентно цефуроксиму 500.0),

вспомогательные вещества:         крахмал          прежелатинизированный,  кросповидон (Коллидон Cl), натрия кроскармеллоза, натрия     лаурилсульфат, магния стеарат, кремния диоксид коллоидный безводный (Аэросил 200),

пленочная оболочка: материал для оболочки №1 Sepifilm LP 770, вода очищенная,

состав пленочной оболочки: гипромеллоза (метилгидроксипропилцеллюлоза) (Е464), целлюлоза микрокристаллическая (Е460), кислота стеариновая (Е570)

титана диоксид (Е171)

Описание

Таблетки, покрытые пленочной оболочкой белого цвета, продолговатой формы, с маркировкой    «NOBEL» на одной стороне и риской на другой

Фармакотерапевтическая группа

Противомикробные препараты для системного использования. Антибактериальные препараты для системного использования. Цефалоспорины второго поколения

Код АТС J01DC02

Фармакологические свойства

Фармакокинетика

Цефуроксим аксетил быстро всасывается из желудочно-кишечного тракта и гидролизуется неспецифическими эстеразами слизистой оболочки кишечника и крови до цефуроксима. Связывание с белками плазмы составляет 50 %. Цефуроксим распределяется в тканях и жидкостях организма. При приеме препарата после еды максимальная концентрация в плазме для дозировок 125 мг, 250 мг и 500 мг составляет соответственно 2,1 мкг/мл, 4,1 мкг/мл, 7 мкг/мл. Максимальная концентрация достигается спустя 3 часа после приема препарата. Терапевтические концентрации в спинномозговой жидкости достигаются только при менингите. Проникает через плаценту, выделяется с грудным молоком. Выводится с мочой в неизмененном виде. Период полувыведения примерно 1,2 часа.

Фармакодинамика

Цефуроксим – цефалоспориновый антибиотик второго поколения широкого спектра действия. Оказывает бактерицидное действие за счет ингибирования синтеза клеточной стенки бактерий. Цефуроксим ацетилирует мембраносвязанные транспептидазы, нарушая, таким образом, перекрестную сшивку пептидо-гликанов, необходимую для обеспечения прочности и ригидности клеточной стенки. Цефуроксим устойчив к действию многих бактериальных бета-лактамаз, в результате чего он активен в отношении большинства видов микроорганизмов устойчивых к пенициллину и амоксициллину.

Цефуроксим активен в отношении следующих микроорганизмов:

Грамотрицательные бактерии: Escherichia coli, Haemophilus influenzae (включая виды, продуцирующие бета-лактамазы), Haemophilus parainfluenzae, Klebsiella pneumoniae, Moraxella catarrhalis (включая виды, продуцирующие бета-лактамазы), Neisseria gonorrhoeae (включая виды, продуцирующие бета-лактамазы), Salmonella spp., Shigella spp., Proteus mirabilis, Enterobacter spp.

Грамположительные бактерии: Staphylococcus aureus (включая виды, продуцирующие бета-лактамазы), Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes.

Определенные виды энтерококков, например Enterococcus faecalis, устойчивы к цефуроксиму.

Анаэробы: Peptococcus spp., Peptostreptococcus spp., Clostridium spp., Bacteroides spp., Fusobacterium spp.

Показания к применению

— острый бронхит, обострение хронического бронхита, пневмония

— отит, синусит, тонзиллит, фарингит

— пиелонефрит, цистит, уретрит

— абдоминальные  инфекции

— гинекологические инфекции

— инфекции костей и суставов

— инфекции кожи и мягких тканей.

Способ применения и дозы

Рекомендованная доза для взрослых и детей старше 12 лет составляет 250 мг 2 раза в день. При более тяжелых инфекциях или инфекциях, вызванных менее чувствительными микроорганизмами, рекомендуется 500 мг 2 раза в день. При неосложненных инфекциях мочевыводящих путей рекомендованная доза составляет 250 мг 1 раз в день. При необходимости у некоторых пациентов с инфекциями мочевыводящих путей дозировка может быть увеличена до 250 мг 2 раза в день. Максимальная суточная доза для взрослых – 6 г.

Обычно продолжительность лечения составляет 7 дней (от 5 до 10 дней). Курс лечения должен быть увеличен до 10 дней у пациентов с инфекциями, вызванными бета-гемолитическим стрептококком для избежания возникновения острой ревматической лихорадки или острого гломерулонефрита.

Пациентам с нарушением функции почек режим дозирования устанавливают с учетом значений клиренса креатинина.

Для лучшего всасывания препарат следует принимать после еды. Таблетки следует проглотить целиком, не разжевывая, поэтому детям  младше 12 лет можно применять препарат в инъекционной форме.

Побочные действия

Часто (≥1/100, <1/10)

—       эозинофилия

—       головная боль

—       тошнота, диарея

—       кратковременное повышение уровня печеночных ферментов (АЛТ, АСТ, ЛДГ)

Нечасто (≥1/1000, <1/100)

—       рвота

—       экзема

—       положительный результат теста Кумбса, тромбоцитопения, лейкопения (иногда выраженная)

Редко (≥1/10000, <1/1000)

—       псевдомембранозный колит

—       крапивница, зуд

Очень редко (< 1/10000)

—       гемолитическая анемия

—       лекарственная лихорадка, сывороточная болезнь, анафилаксия, мультиформная эритема, синдром Стивенса-Джонсона, токсический эпидермальный некролиз

—       желтуха (в основном, холестатическая), гепатит

Противопоказания

— повышенная чувствительность к антибиотикам цефалоспоринового ряда, пенициллинам, карбапинемам

— детский возраст до 12 лет

— первый триместр беременности

Лекарственные взаимодействия

Мегасеф® не активен в ЖКТ, имеет минимальное воздействие на кишечную флору и синтез витамина К. При одновременном  приеме усиливает антикоагулянтное действие варфарина.

При одновременном применении с петлевыми диуретиками возрастает риск развития нефротоксического действия.

Пробенецид конкурирует с препаратом Мегасеф® при почечной канальцевой секреции, что приводит к повышению концентрации цефуроксима в плазме.

Для определения уровня глюкозы в плазме крови у пациентов, принимающих Мегасеф®, рекомендуется применять глюкозоксидазный или гексокиназный методы.

Мегасеф® не влияет на уровень креатинина в сыворотке и в моче.

Особые указания

С осторожностью применяют при выраженных нарушениях функции почек, при указаниях в анамнезе на колит.

У пациентов с повышенной чувствительностью к пенициллинам возможны аллергические реакции на антибиотики цефалоспоринового ряда. При возникновении выраженной аллергической реакции на Мегасеф® необходимо отменить препарат, назначить соответствующее лечение, в особо тяжелых случаях может возникнуть необходимость в проведении реанимационных мероприятий.

Продолжительное применение препарата, как и других антибиотиков широкого спектра действия, может привести к усиленному размножению нечувствительных к препарату микроорганизмов (например, Candida, Enterococci, Clostridium difficile), в связи с чем может возникнуть необходимость отмены препарата. При применении антибиотиков широкого спектра действия возможно развитие псевдомембранозного колита, это необходимо иметь в виду при возникновении у пациентов диареи во время или после проведения антибактериальной терапии.

Во время лечения возможна положительная прямая реакция Кумбса и ложноположительная реакция мочи на глюкозу.

Беременность и период лактации

Применение во II и III триместрах беременности, а так же в период лактации возможно в случаях, когда предполагаемая польза от терапии для матери превышает потенциальный риск для плода.

Особенности влияния лекарственного средства на способность управлять транспортным средством или потенциально опасными механизмами.

Не установлены.

Передозировка

Симптомы: возбуждение ЦНС, судороги.

Лечение: симптоматическое лечение, перитонеальный и гемодиализ.

Форма выпуска и упаковка

По 10 таблеток помещают в контурную ячейковую упаковку из пленки поливинилхлоридной и фольги алюминиевой печатной.

По 1 контурной упаковке вместе с инструкцией по медицинскому применению на государственном и русском языках помещают в пачку картонную с голограммой фирмы – производителя.

Условия хранения

Хранить при температуре не выше 25°С в сухом, защищенном от света месте.

Хранить в недоступном для детей месте!

Срок хранения

3 года

Не применять по истечении срока годности.

Условия отпуска из аптек

По рецепту

Производитель

АО «Нобел Алматинская Фармацевтическая Фабрика»

Республика Казахстан          

г. Алматы, ул. Шевченко 162 Е.

Владелец регистрационного удостоверения

АО «Нобел Алматинская Фармацевтическая Фабрика»

Республика Казахстан

          

Адрес организации, принимающей на территории Республики Казахстан претензии от потребителей по качеству продукции (товара):

АО «Нобел Алматинская Фармацевтическая Фабрика»

Республика Казахстан, г. Алматы, ул. Шевченко 162 Е.

Номер телефона: (+7 727) 399-50-50

Номер факса: (+7 727) 399-60-60

Адрес электронной почты   [email protected]

ВЕЛСАМЕД Четка за зъби Мегасофт (WELLSAMED Toothbrush Megasoft) (48530) — 1,50 лв.

Кат. №: 48530

При пазаруване от получавате:
  1. Електронни ваучери и промо кодове за отстъпки за регистрирани потребители с профил.
  2. Можете да оставите коментар за продукт, терапия и да получите обратна връзка от маг. фармацевт дискретно и поверително.
  3. Пазарувате безплатно с бонус точки, генерирани с всяка онлайн покупка.
  4. Достъп до екслузивни промоции и сезонни намаления.
  5. Пазарувате лесно и удобно през фейсбук профила си.

Описание на ВЕЛСАМЕД Четка за зъби Мегасофт

ВЕЛСАМЕД Четка за зъби Мегасофт се предлага в Apteka.puls.bg на цена от 1,50 лв. Както всички други продукти от Четки и пасти за зъби, този също може да бъде доставен до вашата врата бързо и евтино.
ВЕЛСАМЕД Четка за зъби Мегасофт се произвежда от Rubella и може да бъде закупен от Apteka.puls.bg на преференциална цена от 0,15 лв., ако използвате вашите бонус точки.

Ако имате регистрация в сайта:
  • Вие получавате точки при всяка покупка на наш продукт от онлайн магазина ни, освен на тези в промоция.
  • До цената на продукта можете да видите колко точки ще получите при покупка му.
  • Със събраните точки можете да купувате продукти, като тяхната цена в бонус точки е посочена в карето над цената на продукта.

ВЕЛСАМЕД Четка за зъби Мегасофт — подобни продукти

PharmIndustry.ru :: ФармИндустрия.ру

округ

Все округаваозаосаосваосзаоцаоюаоюваоюзао

метро

Любое метроавиамоторнаяавтозаводскаяакадемическаяалександровский садалексеевскаяалтуфьевоанниноарбатскаяаэропортбабушкинскаябагратионовскаябаррикаднаябауманскаябеговаябелорусскаябеляевобибиревобиблиотека им. ленинабитцевский паркборовицкаяботанический садбратиславскаябульвар дмитрия донскоговаршавскаявднхвладыкиноводный стадионвойковскаяволгоградский проспектволжскаяволоколамскаяворобьевы горывыхинодинамодмитровскаядобрынинскаядомодедовскаядубровкаизмайловскаяизмайловский парккалужскаякантемировскаякаховскаякаширскаякиевскаякитай-городкожуховскаяколоменскаякомсомольскаяконьковокрасногвардейскаякраснопресненскаякрасносельскаякрасные воротакропоткинскаякузнецкий мосткузьминкикунцевскаякурскаякутузовскаяленинский проспектлубянкалюблиномарксистскаямарьиномаяковскаямедведковоменделеевскаямитиномолодежнаянагатинскаянагорнаянахимовский проспектновогиреевоновокузнецкаяновослободскаяновые черемушкиоктябрьскаяоктябрьское полеореховоотрадноеохотный рядпавелецкаяпарк культурыпарк победыпервомайскаяперовопетровско-разумовскаяпечатникипионерскаяпланернаяплощадь ильичаплощадь революцииполежаевскаяполянкапражскаяпреображенская площадьпролетарскаяпроспект вернадскогопроспект мирапрофсоюзнаяпушкинскаяречной вокзалрижскаярязанский проспектсавеловскаясвибловосевастопольскаясеменовскаясерпуховскаясмоленскаясоколсокольникиспортивнаястуденческаясухаревскаясходненскаятаганскаятверскаятеатральнаятекстильщикитеплый стантимирязевскаятретьяковскаятульскаятургеневскаятушинскаяул. академика янгеляулица 1905 годаулица подбельскогоуниверситетфилевский паркфилифрунзенскаяцарицыноцветной бульварчеркизовскаячертановскаячеховскаячистые прудышаболовскаяшоссе энтузиастовщелковскаящукинскаяэлектрозаводскаяюго-западнаяюжнаяясенево

сеть аптек

Любая сеть аптек03 АптекаА5аптека 120 на 80Аптека 36,6Аптека Nova VitaАптекарьГексалГорздравДоктор СтолетовЖелаем ЗдоровьяМоя любимая аптекаНатур-ПродуктПервая помощьРиглаСамсон-ФармаСнадобицаСтарый ЛекарьСтоличные аптекиФормула здоровьяхмуръ продуктЦарева Аптека

только круглосуточные

Гипотоническая макулопатия после глаукомной хирургии: механизмы развития, методы профилактики и терапии | Еричев В.П., Петров С.Ю., Орехова Н.А., Эльмурзаева Л.Х.

Введение

Глаукома — одна из ведущих причин необратимой слепоты, от которой в мире, по результатам различных исследований, страдают более 60 млн человек в возрасте от 40 до 80 лет. По прогнозам, это количество может вырасти до 112 млн к 2040 г. [1]. По данным Минздрава России, по состоянию на 2017 г. в нашей стране было зарегистрировано 1 330 597 человек с данным заболеванием [2].

Несмотря на успешную медикаментозную терапию, широкий выбор лекарственных препаратов, часто приходится прибегать к оперативному вмешательству у пациентов с глаукомой.

Между передним и задним отделами глаза существует тесная структурная связь и связь на уровне микроциркуляции, в результате чего даже незначительное изменение в одном из отделов может привести к серьезным нарушениям в другом. Вследствие этого при хирургическом вмешательстве часто возникают различные осложнения, одним из редких и наиболее опасных является гипотоническая макулопатия (ГМ).

Согласно данным литературы термин «гипотоническая макулопатия» был введен в 1972 г. Gass [3], однако Dellaporta еще в 1954 г. описал типичную картину изменений глазного дна при низком уровне внутриглазного давления (ВГД) после хирургического вмешательства, включающую складки сетчатки / сосудистой оболочки, отек макулы и извилистость сосудов [4].

Выделяют 2 типа ГМ. Статистическая гипотония была определена J. Pederson как ВГД менее 6,5 мм рт. ст., что на три стандартных отклонения ниже среднего при отсутствии каких-либо нарушений [5]. Клинически значимая гипотония сопровождается необратимыми структурными и функциональными нарушениями, которые могут привести к потере зрения [6].

Этиология и патогенез

Причины развития ГМ Shubert объединил в 5 основных групп [6]:

Наружная фистула, созданная в ходе фистулизирующей антиглаукомной операции и имплантации шунтов и соединяющая переднюю камеру и субконъюнктивальное пространство.

Внутренняя фистула, соединяющая переднюю или заднюю камеру с супрахориоидальным пространством (травматический циклодиализ).

Отслойка цилиарного тела и снижение продукции внутриглазной жидкости (ВГЖ) после циклофото­коагуляции.

Воспаление, возникающее вследствие различных причин, в т. ч. связанных с хирургическим вмешательством, способствующих снижению продукции ВГЖ и увеличению увеосклерального оттока.

Другие причины гипотонии, в т. ч. гормональные факторы, анемия и глазной ишемический синдром.

Развитие ГМ наиболее часто отмечается после фистулизирующей хирургии и в различных исследованиях встречается в 1,2–20% случаев [7–10].

Частота возникновения ГМ значительно увеличивается после введения антифибротических средств [4, 7, 11–16]. Использование антиметаболитов приводит к уменьшению рубцевания и повышает риск гиперфильтрации. Помимо этого, они могут оказывать прямое токсическое действие на цилиарное тело, уменьшая продукцию ВГЖ [7].

Широко используются два средства: митомицин (ММ) и фторурацил (ФУ). В Кокрановском обзоре от 2013 г. сравнили применение ФУ с плацебо или отсутствием вмешательства во время или после операции по поводу глаукомы. Были собраны доказательства из 12 клинических испытаний, включивших 1319 участников. Исследование показало, что применение ФУ оправдано у лиц с высоким риском осложнений [17]. Похожие выводы были сделаны в Кокрановском обзоре 2015 г., в котором сравнивали использование ММ и ФУ для заживления раны после оперативного лечения глаукомы. В исследование было включено 11 рандомизированных контролируемых испытаний, проведенных в США, странах Европы, Азии и Африки. В общей сложности 687 глаз 679 пациентов были подвергнуты плановой трабекулэктомии. В 5 исследованиях участвовали пациенты с низким риском неудачи при трабекулэктомии, в 5 других исследованиях — с высоким риском, в 1 исследовании — как с высоким, так и с низким риском. Не было выявлено какого-либо клинически значимого различия между результатами в группе, в которой участники получали MM, и в группе, в которой участники получали ФУ, однако были обнаружены доказательства, позволяющие предположить, что ММ был более эффективен в снижении ВГД, чем ФУ. Этот эффект был более выражен в популяции с высоким риском. Оценка осложнений в целом во всех исследованиях выявила небольшое преимущество от использования MM, в особенности по частоте развития эпителиопатии (рецидивирующая эрозия роговицы) и гифемы. Отмечалась тенденция к гиперфильтрации, поздней гипотонии и прогрессированию катаракты в группе получающих ММ [18].

В исследовании V. Costa у 6 из 508 пациентов (1,2%), перенесших трабекулэктомию, развилась ГМ. 3 пациента (50%) получали инъекции ФУ в послеоперационном периоде [11]. R. Rasheed выявил эффективность трабекулэктомии с интраоперационным использованием ММ. После наблюдения (в среднем 18 мес.) у 3 пациентов из 25 (12%) выявлена ГМ. В контрольной группе ГМ не развивалась [12].

Непроникающую хирургию глаукомы, включая селективную трабекулопластику и глубокую склерэктомию, начали применять с целью снижения риска осложнений, связанных с избыточной фильтрацией при трабекулэктомии и использовании дренажей. В своем исследовании Е. Rulli продемонстрировал большую эффективность трабекулэктомии по сравнению с непроникающей хирургией в снижении ВГД, но в то же время риск гипотонии при первой был выше. При добавлении антиметаболитов интраоперационно частота осложнений, включая ГМ, увеличилась в обеих группах [19].

Использование дренажных устройств позволило эффективнее контролировать уровень ВГД и избегать хронической гипотонии. В многоцентровом клиническом исследовании Tube Versus Trabeculectomy Study гипотония наблюдалась у 13% пациентов с имплантацией антиглаукомных шунтов и у 29% пациентов после трабекулэктомии. ГМ в этих группах развилась у 1% и 4% пациентов соответственно [20].

В 5-летнем исследовании Ahmed Baerveldt Comparison Study при имплантации дренажа Ahmed частота гипотонии составила 2%, дренажа Baerveldt — 13%. Было сделано заключение о более предпочтительном использовании дренажа Ahmed у пациентов с повышенным риском послеоперационной гипотонии, имеющих в анамнезе увеальную глаукому или предшествующую циклодеструкцию. У этих пациентов снижение выработки ВГЖ может вызвать гипотонию, если имеется избыточный отток через клапан, например, при использовании Baerveldt. Также исследование показало, что применение дренажей с более широким просветом концевых пластин приводит к более выраженному снижению уровня ВГД. Авторы статьи объясняют более стойкую гипотонию при использовании дренажа Braevildt тем, что в течение первых 4–6 нед. наличие небольшого просвета трубки имеет решающее значение для предотвращения ранней гипотонии и связанных с ней осложнений [21].

Развитие ГМ связано с нарушением равновесия между продукцией и оттоком ВГЖ. Избыточное образование водянистой влаги может быть неадекватным оттоку при иридоциклите или цилиохориоидальной отслойке [13, 22, 23]. С другой стороны, отток может превышать выработку ВГЖ после антиглаукомной операции [11, 12]. Ключевым компонентом патофизиологии гипотонии является воспаление, при котором происходит снижение продукции ВГЖ и усиление увеосклерального оттока [24]. Исследования на животных показали, что воспаление было связано с повышенным уровнем простагландина F2-альфа, что уменьшает плотность внеклеточного матрикса вокруг цилиарной мышцы и, как следствие, приводит к усилению увеосклерального оттока [25]. Gass объясняет механизм развития гипотонии следующим образом: коллапс склеры вызывает складчатость сетчатки и сосудистой оболочки. Хориоретинальные складки находятся в заднем полюсе, причем наиболее заметны в зоне макулы. В макулярной области они имеют радиальную от fovea направленность, а на периферии — часто линейную и ориентированы темпорально по направлению от диска зрительного нерва (ДЗН). Со временем складки становятся более выпуклыми, вызывая компрессию клеток пигментного эпителия в вершинах с последующим его истончением. Офтальмоскопически это выглядит как чередование светлых и темных полос [3].

Исследование М. Sacamoto показало, что снижение уровня ВГД после трабекулэктомии влияет на биометрические характеристики глаза: уменьшается переднезад­няя ось глаза (ПЗО), увеличивается толщина хориоидеи, уменьшается радиус кривизны роговицы, тогда как никаких изменений в толщине центрального участка роговицы не происходит, независимо от развития ГМ. Величина уменьшения ПЗО при снижении ВГД составляла 0,7 мм и 0,18 мм для глаз с и без ГМ соответственно. Анализ показал, что при уменьшении ПЗО более 0,5 мм риск развития ГМ возрастал в 11,7 раза. Было выявлено ограниченное влияние утолщения хориоидеи на уменьшение ПЗО после трабекулэктомии (что составило примерно 17% от изменения ПЗО). Учитывая высокую связь между уменьшением ПЗО и возникновением ГМ, автор пришел к выводу, что развитию ГМ способствует коллапс склеры [26].

При биомикроскопии можно выявить отечность перипапиллярной хориоидеи, имитирующей отек зрительного нерва. Вполне вероятно, что он является результатом нарушенного аксоплазматического оттока, вызванного прогибом кпереди решетчатой пластинки и сжатием аксональных волокон [25].

Снижение уровня ВГД может вызвать аномальную проницаемость капилляров сетчатки и увеличить риск развития кистозного макулярного отека и серозной отслойки сетчатки, что встречается достаточно редко [27]. Низкий уровень ВГД вызывает более высокий градиент гидростатического давления в сосудистой сети сетчатки, что обеспечивает перемещение жидкости во внеклеточные пространства. G.T. Kokame описал клинический случай, когда при нормализации ВГД отек макулы разрешился, согласно результатам оптической когерентной томографии (ОКТ) [27].

Клинически у пациентов можно наблюдать снижение центрального зрения, искажение предметов, относительную гиперметропическую рефракцию (за счет уменьшения ПЗО) [24]. S. Yun не выявил клинически значимую разницу в конечной остроте зрения и среднем отклонении при исследовании полей зрения на периметре Humphrey между послеоперационными пациентами с хронической гипотонией (34 глаза) и без таковой (34 глаза) [28].

Помимо ГМ существует много других причин снижения зрения в послеоперационном периоде. Costa et al. обследовали пациентов после глаукомной хирургии (508 глаз) с целью определить причину потери зрения. Спустя 3 мес. после хирургического лечения глаукомы в 8,3% случаев (42 глаза) наблюдалось снижение зрения, основной причиной этого стало развитие ГМ [11]. Кроме того, ее причинами являлись
прогрессирующая глаукома, эндофтальмит, кистозный макулярный отек, отек роговицы, складки десцеметовой оболочки и хроническая отслойка хориоидеи [29, 30].

ГМ вследствие травмы является серьезным осложнением, требующим тщательного контроля. Она может быть временной, когда снижается продукция ВГЖ при повреждении цилиарного тела, и постоянной, когда создан шунт для оттока водянистой влаги в супрахориоидальное пространство при циклодиализе. Было показано, что цилио­хориоидальная отслойка, травматическая отслойка сетчатки и передняя пролиферативная ретинопатия связаны с гипотонией [31].

Диагностика

Основными методами диагностики ГМ и оценки динамики патологических изменений являются ОКТ, УЗИ (дифференциальная диагностика и при трудностях визуализации глазного дна) и флюоресцентная ангиография (ФАГ). ОКТ позволяет диагностировать патологию у пациентов со сниженной остротой зрения и нормальной офтальмоскопической картиной глазного дна. D.L. Budenz описал 3 случая, когда ГМ была диагностирована только на ОКТ по характерным складкам сетчатки / сосудистой оболочки глаза [32]. Было высказано предположение, что у этих пациентов может быть субклиническая ГМ, которая не обнаруживается при осмотре глазного дна, но диагностируется при ОКТ. В этих случаях важен тщательный обзор всех В-сканов радиальной линии, поскольку складки сетчатки часто ориентированы по оси 0–180 градусов. L. Margot установил, что SD-OCT (спектральная ОКТ) с использованием трехмерного топографического картографирования обеспечивает большую чувствительность для диагностики ГМ и мониторинг по сравнению с TD-OCT (ОКТ, основанная на последовательном методе построения изображения) [33].

ФАГ также позволяет зарегистрировать хориоретинальные складки и дифференцировать хориоидальные складки от складок сетчатки. Характерно нерегулярное увеличение фоновой флюоресценции хориоидеи: гиперфлюоресцентные полосы соответствуют гребням хориоидальных складок, гипофлюоресцентные — впадинам складок. Возможна небольшая утечка красителя из капилляров ДЗН, но не из капилляров сетчатки [3].

Среди предрасполагающих факторов Fannin выделил мужской пол, близорукость и молодой возраст (менее 60 лет), используя исследование «случай — контроль» с участием 186 пациентов. Он предположил, что снижение склеральной ригидности может способствовать коллапсу склеры при гипотонии с формированием хориоретинальных складок [13, 15, 34]. Сахарный диабет и хориоидальные выпоты были связаны со снижением риска развития ГМ. Не до конца изучен механизм снижения риска развития макулопатии у пациентов с диабетом. J. Gass отметил, что хориоидальные выпоты редко возникают при ГМ; предполагалось, что они могут препятствовать ее развитию [3]. Возможно, это связано с тем, что более толстая и жесткая склера менее подвержена коллапсу при резком снижении ВГД. У пациента с относительно толстой и жесткой склерой больше вероятность развития хориоидального выпота в условиях гипотонии, что наблюдалось при гистопатологическом исследовании [35]. Авторами исследования было высказано предположение, что данная особенность строения выполняет защитную функцию при глазной гипотонии.

Предоперационное консультирование, оперативное и послеоперационное ведение пациентов с этими факторами риска проводится более тщательно. Для более надежного контроля ВГД используют большее количество швов, на склеральных лоскутах швы снимают постепенно, чтобы избежать внезапной гипотонии [15].

Лечение 

Эффективное лечение ГМ зависит от своевременности определения и устранения ее причины. Задержка может привести к необратимым структурным изменениям в сетчатке и сосудистой оболочке и, как следствие, к потере зрения [7, 11]. Suñer отметил, что ГМ чаще всего возникала после лизиса шва при помощи лазера, гиперфильтрации фильтрационной подушки и проведения нидлинга [15]. Поскольку некоторые из этих манипуляций необходимы для послеоперационного контроля ВГД, предотвратить их применение довольно трудно.

Гиперфильтрация фильтрационной подушки является еще одной причиной развития ГМ после глаукомной операции. Консервативное лечение включает в себя конъюнктивальную компрессию — мягкие контактные линзы большого диаметра [36]. Также используют маломощный аргоновый лазер [37], криотерапию [7, 11], трихлоруксусную кислоту [7], инъекции аутологичной крови [38] и местного фибринового клея [39].

Palmberg предложил стягивать конъюнктивальные швы на лоскуте склеры, чтобы исключить избыточную фильтрацию. Данная методика была успешно им применена у 44 пациентов (46 глаз) [40]. L. Quaranta для уменьшения фильтрации использовал компрессионные швы конъюнктивы, у 45 пациентов (64%) гипотония разрешилась, хотя этот метод был недостаточно эффективен у пациентов с диффузной фильтрационной подушкой (более 360°) [41].

Для контроля избыточной фильтрации альтернативным стал метод ревизии лоскута склеры: повторное открытие конъюнктивального разреза за фильтрационной подушкой и восстановление склерального лоскута двумя рядами швов. Первый ряд накладывали для достижения давления 8–12 мм рт. ст., а второй — для повышения давления до 20–25 мм рт. ст. Уровень ВГД при этом оставался достаточно высоким для расправления хориоретинальных складок. Через 1–6 нед. (после устранения складок) второй ряд швов удаляли для достижения конечного целевого давления. 8 (89%) из 9 пациентов достигли остроты зрения 20/30 или выше, а средний уровень ВГД через 15 мес. составил 14,5±4,0 мм рт. ст. [15].

С. Green пишет, что после трабекулэктомии склера может стать рыхлой и представлять трудности при проведении оперативного вмешательства, особенно при применении MМ [42].

L. Coutinho представил клинический случай развития макулопатии в раннем послеоперационном периоде у женщины с ювенильной глаукомой. Во время операции был применен ММ. В раннем послеоперационном периоде у нее наблюдали гиперфильтрацию с последующим развитием ГМ, не поддающейся консервативному лечению. Была проведена хирургическая ревизия с удалением лоскута склеры и трансплантацией конъюнктивы с удовлетворительным результатом и разрешением ГМ. Через 2 года у пациентки появились жалобы на низкую остроту зрения прооперированного глаза. Во время обследования у нее отметили плоскую и бессосудистую фильтрационную подушку, положительную пробу Зейделя, уровень ВГД при этом составлял 5 мм рт. ст., на глазном дне были выявлены хориоретинальные складки. Была проведена новая ревизия трабекулэктомии. Свищ закрывали пластырем коллагеновой мембраны, полученной из бычьего перикарда. Через 2 мес. уровень ВГД составил 15 мм рт. ст. без признаков гиперфильтрации и изменений на глазном дне, острота зрения составила 20/20. После 8 мес наблюдения ВГД оставалось стабильным без каких-либо жалоб [43].

S. Kurtz и I. Leibovitch был предложен метод введения в переднюю камеру газа C3F8 пациентам (3 глаза), у которых послеоперационный период осложнился развитием гипотонии. Во всех случаях гипотония разрешилась без осложнений [44]. Friedman и Mahootchi применили интравитреальную инъекцию 0,25 мл газообразного перфторпропана пациенту с гипотонией, рефрактерной к консервативному лечению. Через 9 дней после введения газ расширился до 30% полости стекловидного тела. ВГД поднялось до 10 мм рт. ст., острота зрения улучшилась с 20/200 до 20/30, исчезли хориоретинальные складки. Через 3 мес. острота зрения стала прежней. Предполагаемый механизм — газовая окклюзия области фильтрации и реактивное воспаление, которое инициировало образование рубцов или тампонаду в месте небольшой цилиохориоидальной отслойки [45].

Известен способ хирургического лечения гипотонии в результате фистулизирующих операций: ревизия зоны операции, пластика тканей путем наложения дополнительных швов на склеральный лоскут и трепанационное отверстие [38].

Д.И. Иванов и М.Е. Никулин провели ретроспективное рандомизированное исследование результатов комбинированных операций по поводу глаукомы и катаракты в срок не менее 5 лет. Из ранних послеоперационных осложнений достоверно чаще встречались гипотония и ранняя гипертензия. Однако сравнительный анализ показал, что отдаленные результаты (гипотензивный эффект и острота зрения) после комбинированных операций, включающих факоэмульсификацию с трабекулотомией ab interno или с микроинвазивной непроникающей глубокой склерэктомией, не имеют статистически достоверных отличий. Однако пациентам с непроникающей глубокой склерэктомией для достижения длительной компенсации ВГД в подавляющем большинстве случаев (до 70%) требуется лазерная десцеметогониопунктура, при несвоевременном проведении которой глаукомный процесс может прогрессировать [46].

В 2012 г. получен патент на изобретение «Способ хирургического лечения гипотонии глаза, возникающей как осложнение после фистулизирующих операций при глаукоме». Авторы предложили осуществлять пластику фильтрующей зоны, которая заключается в закрытии фистулы со стороны передней камеры прикорневой зоной радужки путем подшивания ее к передней стенке угла передней камеры. Для этого используют транссклеральный подход, причем первый вкол иглы проводится в иридокорнеальный угол около фистулы, затем накладывают шов по дугообразной траектории вдоль верхнего края фистулы и заканчивают в иридокорнеальном углу с другой стороны фистулы, при этом применяют непрерывный шов, у которого каждый последующий стежок частично перекрывает предыдущий. Способ позволяет быстро и надежно нормализовать ВГД, что помогает уберечь глаза пациентов от безвозвратной потери зрения [47].

Duker и Schuman выполнили пациенту витрэктомию pars plana с введением 1 мл перфторфенантрена, который представляет собой тяжелую перфторуглеродную жидкость. ВГД во время операции поднимали до 50 мм рт. ст. в течение приблизительно 10 мин, а затем жидкость удаляли. Через 6 нед. после операции острота зрения пациента улучшилась с 20/200 до 20/20 с сохранением минимальных хориоретинальных складок. Через 9 мес. складки хориоидеи исчезли, острота зрения составляла 20/25 [48].

В 2015 г. Д.И. Ивановым и Е.Д. Ивановой получен патент на изобретение «Способ хирургического лечения гипотонии глаза, возникающей как осложнение после фистулизирующих операций при глаукоме». Авторы предложили проводить тампонаду фистулы собственной тканью глаза. В качестве тампонирующей ткани предложено использовать теноновую оболочку, которую следует забирать в зоне свода путем иссечения фрагмента. Данный способ позволяет надежно закрывать фистулы, обеспечивая при этом стойкую нормализацию уровня ВГД и снижение операционных осложнений. Это достигается за счет использования собственной теноновой оболочки диаметром, превышающим размер фистулы, забора ее в области свода, что позволяет избежать прорезывания швов за счет отсутствия натяжения ткани склеры [49].

В 2017 г. теми же авторами запатентован новый «Способ хирургического лечения гипотонии глаза, возникающей как осложнение после фистулизирующих операций при глаукоме». Операция выполняется в 2 этапа. На первом этапе тампонируют фистулу со стороны передней камеры, на втором — выполняют трабекулотомию ab interno на протяжении 3–4 ч с использованием ирригационного трабекулотома. При наличии отслойки сосудистой оболочки после тампонирования фистулы и трабекулотомии проводят дренирование супрахориоидального пространства с выпусканием жидкости наружу. Способ позволяет обеспечить стойкую нормализацию ВГД, снижение операционных и послеоперационных осложнений, достижение высокой остроты зрения [50].

Заключение

Таким образом, ГМ — довольно редкое осложнение, частота которого увеличилась с ростом числа антиглаукомных операций. К основным факторам риска относят молодой возраст, мужской пол, миопию, первичную глаукомную операцию с применением антиметаболита. Основными методами диагностики и оценки динамики патологических изменений являются УЗИ (дифференциальная диагностика и при трудностях визуализации глазного дна), ФАГ, позволяющая зарегистрировать хориоретинальные складки и дифференцировать их от складок сетчатки, и OКT. Установлено, что SD-OCT с использованием трехмерного топографического картографирования обеспечивает большую чувствительность для диагностики ГМ и мониторинг по сравнению с TD-OCT. Наибольший эффект имеют хирургические способы коррекции: ревизия склерального лоскута, витрэктомия с перфторуглеродным газом, тампонирование фистулы с последующей трабекулотомией ab interno. Своевременное и правильное выявление причины гипотонии является залогом успешного лечения ГМ.

Сведения об авторах:

Еричев Валерий Петрович — д.м.н., профессор, заведующий отделом глаукомы, ORCID iD 0000-0001-6842-7164;

Петров Сергей Юрьевич — д.м.н., ведущий научный сотрудник отдела глаукомы, ORCID iD 0000-0001-6922-0464;

Орехова Наталия Александровна — ординатор, ORCID iD 0000-0003-3651-9667;

Эльмурзаева Лайла Хамзатовна — врач-офтальмолог, аспирант, ORCID iD 0000-0001-8154-9609.

ФГБНУ «НИИГБ». 119021, Россия, г. Москва, ул. Россолимо, д. 11а.

Контактная информация: Орехова Наталия Александровна, e-mail: [email protected]

Прозрачность финансовой деятельности: никто из авторов не имеет финансовой заинтересованности в представленных материалах или методах. Конфликт интересов отсутствует. Статья поступила 10.08.2019.

About the authors:

Valery P. Erichev — MD, PhD, Professor, Head of Glaucoma Department, ORCID iD 0000-0001-6842-7164;

Sergey Yu. Petrov — MD, PhD, Leading Research Associate of Glaucoma Department, ORCID iD 0000-0001-6922-0464;

Nataliya A. Orekhova — resident, ORCID iD 0000-0003-3651-9667;

Laila Kh. Elmurzaeva — ophthalmologist, postgraduate, ORCID iD 0000-0001-8154-9609.

Scientific Research Institute of Eye Diseases. 11a, Rossoli­mo str., Moscow, 119021, Russian Federation.

Contact information: Nataliya A. Orekhova, e-mail: [email protected] Financial Disclosure: no author has a financial or property interest in any material or method mentioned. There is no conflict of interests. Received 10.08.2019. 


.

Цены и новости на рынке продуктов питания

Новости и события

Прирост выпуска сыров на Джанкойском молокозаводе за 2020- 2021 годы составил более 14%.

С 2020 года после установки нового рассольного бассейна Джанкойский молокозавод почти вдвое увеличил мощность сырцеха. Ассортимент сыров постоянно…

В Смоленске молокозавод «Роса» планируют запустить весной, сообщил генеральный директор предприятия Александр Мандрусов. Сообщается, что оборудование готово к работе и в настоящее время идут переговоры с несколькими предприятиями о начале…

поставок, следует из указания Россельхознадзора. В список предприятий, включенных в «дорожную карту», попали ОАО «Барановичский молочный комбинат», СОАО «Ляховичский молокозавод«, Волковысское…

было обнаружено и в сыром молоке белорусского производителя «Детскосельский городок» и костромского предприятия «Рассловское». Из-за выявленных антибиотиков в готовой молочной продукции Россельхознадзор ввел на молокозаводе режим…

Информация

Крупнейший производитель молочной продукции Республики Крым планирует увеличить объемы производства и ассортимент сыров в 2022 году
Молокозавод «Роса» в Смоленске начнет работать весной
В Россию разрешили ввозить белорусское молоко в крупной таре

Крупнейший производитель молочной продукции Республики Крым планирует увеличить объемы производства и ассортимент сыров в 2022 году
Молокозавод «Роса» в Смоленске начнет работать весной
В Россию разрешили ввозить белорусское молоко в крупной таре

Каталог организаций и предприятий

Молокозавод Адыгея – это дистрибьютор качественной молочной продукции, сыра, масла, рассольных сыров, мягких сыров, и других пищевых продуктов. Нашими услугами пользуются пищевые предприятия и оптовые…

Переработка зерна, производство муки…

Отрасль: УК:…

Megasoft Consultants Private Limited Информация

MEGASOFT CONSULTANTS PRIVATE LIMITED

Megasoft Consultants Private Limited — негосударственная компания, зарегистрированная 5 января 1994 года. Это частная компания, не зарегистрированная на бирже, и классифицируется как «компания с ограниченной ответственностью». Уставный капитал компании

составляет 2,5 лакха, а оплаченный капитал составляет 87,12%, что составляет 2,18 лакха.

Megasoft Consultants Private Limited в основном занимается бизнес-услугами последние 28 лет, и в настоящее время деятельность компании прекращена.

Компания зарегистрирована в ЗАГСе Хайдарабада (Телангана). Зарегистрированный адрес Megasoft Consultants Private Limited: 1-8-201 TO 205, 205/1, METROSALANA APARTMENTS, PRADERGHAST ROAD, SAIDABAD TG 000000 IN.

Megasoft Consultants Private Limited Deal

CIN U72200TG1994PTC016839 15
Дата регистрации
, 1994
Статус Удар Компания Company Limited 60017
Company Company Cational Non-Govt Company
Company Class Private Деловая деятельность
Бизнес-услуги
Уставный капитал 2.5 лакхов
Оплаченный капитал 2,18 лакха
Оплаченный капитал% 87.12
Registrar Office City Hyderabad
Зарегистрированное государство Telangana
Регистрационный номер 16839
Дата регистрации 05 Jan , 1994
Статус листинга Нет в списке

Новости Megasoft Consultants Private Limited

Закон 1956 г. и 2013 г., включая другие сопутствующие законы, законопроекты и правила) http://www.mca.gov.in/, обновлено 4 декабря 2018 г.

Обратите внимание: данные на этой странице могут не обновляться по сравнению с текущими учетными данными компании.

КореяМед Синапс

1. Lotte R, Lotte L, Ruimy R. Actinotignum schaalii (ранее Actinobaculum schaalii ): недавно признанный патоген-обзор литературы. Клин Микробиол Инфект. 2016; 22:28–36.
2. Тена Д., Фернандес С., Лаго М.Р., Ариас М., Медина М.Дж., Саес-Ньето Х.А. Инфекции кожи и мягких тканей, вызванные Actinobaculum schaalii : отчет о двух случаях и обзор литературы.Анаэроб. 2014; 28:95–97.
3. Халлер П., Брудерер Т., Шаерен С., Лайфер Г., Фрей Р., Баттегай М. и соавт. Остеомиелит позвоночника, вызванный Actinobaculum schaalii : трудно диагностируемый и потенциально инвазивный уропатоген. Eur J Clin Microbiol Infect Dis. 2007 г.; 26:667–670.

4. Hoenigl M, Leitner E, Valentin T, Zarfel G, Salzer HJ, Krause R, et al. Эндокардит, вызванный Actinobaculum schaalii , Австрия. Эмердж Инфекция Дис. 2010 г.; 16:1171–1173.

5.Институт клинических и лабораторных стандартов. Критерии интерпретации для идентификации бактерий и грибов с помощью секвенирования ДНК-мишени; утвержденное руководство. Документ CLSI MM18-A. Уэйн, Пенсильвания: Институт клинических и лабораторных стандартов; 2008.

6. Yassin AF, Spröer C, Pukall R, Sylvester M, Siering C, Schumann P. Вскрытие рода Actinobaculum : реклассификация Actinobaculum schaalii Lawson et al. 1997 и Actinobaculum urinale Hall et al.2003 г. как Actinotignum schaalii gen. ноя, гребен. ноябрь и Actinotignum urinale гребенчатый. nov., описание Actinotignum sanguinis sp. ноябрь и измененные описания рода Actinobaculum и Actinobaculum suis ; и повторное исследование культуры, депонированной как Actinobaculum massiliense CCUG 47753T (= DSM 19118T), показало, что она не представляет собой штамм этого вида. Int J Syst Evol Microbiol. 2015 г.; 65:615–624.
7. Лоусон П.А., Фальсен Э., Акервалл Э., Вандамм П., Коллинз М.Д. Характеристика некоторых Actinomyces-подобных изолятов из клинических образцов человека: реклассификация Actinomyces suis (Soltys и Spratling) в Actinobaculum suis comb. ноябрь и описание Actinobaculum schaalii sp. ноябрь Int J Syst Bacteriol. 1997 год; 47:899–903.
8. Фендукли Ф., Остерман Б. Выделение Actinobaculum schaalii и Actinobaculum urinale от больного с хронической почечной недостаточностью.Дж. Клин Микробиол. 2005 г.; 43:3567–3569.

9. Hall V, Collins MD, Hutson RA, Falsen E, Inganäs E, Duerden BI. Actinobaculum urinale sp. nov., из мочи человека. Int J Syst Evol Microbiol. 2003 г.; 53:679–682.

10. Cattoir V. Actinobaculum schaalii : обзор нового уропатогена. J заразить. 2012 г.; 64: 260–267.

11. Стивенс Р.П., Тейлор П.С. Actinotignum (ранее Actinobaculum ) schaalii : обзор MALDI-TOF для идентификации клинических изолятов и предлагаемый метод для предполагаемой фенотипической идентификации.Патология. 2016; 48:367–371.
12. Nielsen HL, Søby KM, Christensen JJ, Prag J. Actinobaculum schaalii : частая причина инфекции мочевыводящих путей у пожилых людей. Бактериологическая и клиническая характеристика. Scand J Infect Dis. 2010 г.; 42:43–47.
13. Фоксман Б. Эпидемиология инфекций мочевыводящих путей: заболеваемость, заболеваемость и экономические затраты. Am J Med. 2002 г.; 113:С1А. 5С–13С.
14. МакКью Г., Уотсон Б., Чан Р., ван Хэл С.Дж. «Вероятных контаминантов» больше нет: быстрая идентификация грамположительных палочек ведет к улучшению клинической помощи.Дж. Клин Микробиол. 2013; 51:1641.

15. Тууминен Т., Суомала П., Харью И. Actinobaculum schaalii : идентификация с MALDI-TOF. Новые микробы Новые инфекции. 2014; 2:38–41.

16. Cattoir V, Varca A, Greub G, Prod’hom G, Legrand P, Lienhard R. In vitro чувствительность Actinobaculum schaalii к 12 противомикробным агентам и молекулярный анализ устойчивости к фторхинолонам. J Антимикробная химиотерапия. 2010 г.; 65:2514–2517.
17. Рейнхард М., Праг Дж., Кемп М., Андресен К., Клемменсен Б., Хойлинг Н. и др.Десять случаев инфекции Actinobaculum schaalii : клиническая значимость, идентификация бактерий и чувствительность к антибиотикам. Дж. Клин Микробиол. 2005 г.; 43:5305–5308.
18. Wolfe AJ, Toh E, Shibata N, Rong R, Kenton K, Fitzgerald M, et al. Наличие некультивируемых бактерий в мочевом пузыре взрослой женщины. Дж. Клин Микробиол. 2012 г.; 50:1376–1383.
19. Олсен А.Б., Андерсен П.К., Банк С., Соби К.М., Лунд Л., Праг Дж. Actinobaculum schaalii , комменсал урогенитальной области. БЖУ Интерн.2013; 112: 394–397.

Утечки пузырей и инфекции, связанные с пузырями

Подтекание пузыря — частая проблема, с которой сталкиваются специалисты по глаукоме и офтальмологи общего профиля. Поперечный анализ сообщил о частоте от 1,4% до 3,7% случаев несостоятельности пузырей с поздним началом после фильтрационной хирургии. 1 При использовании антиметаболитов (например, митомицина С [MMC] и 5-фторурацила [5-FU]) наблюдается более высокая частота поздних подтеканий пузырьков. 2-4 Лечение поздних пузырных подтеканий представляет собой сложную проблему для многих описанных методов лечения.

Потенциально опасным осложнением несостоятельности пузыря является развитие блебита и связанного с пузырьком эндофтальмита. О частоте первого сообщалось в 3% хирургических операций на верхней и 9% на нижней фильтрации, выполненных с 5-ФУ. 5 Термин блебит относится к ограниченной форме инфекции вокруг или внутри фильтрующего пузырька, который часто связан с воспалением передней камеры. Напротив, пузырьковый эндофтальмит представляет собой блебит на фоне воспалительных клеток в полости стекловидного тела.Полное понимание подтекания пузырей, блебита и эндофтальмита, связанного с пузырем, важно для правильного ведения этих пациентов и предотвращения необратимой потери зрения.

ПОДТЯЖКИ ПУНКТОВ
Клиническое лечение
Консервативные меры для лечения подтеканий пузырьков имели переменный успех. Некоторые из этих методов включают тампонаду 18-миллиметровой повязкой контактной линзы, компрессионные швы, цианоакрилатный тканевый клей, водные супрессанты и прямой шов микрососудистой иглой. 6-9 Исходя из нашего клинического опыта, другим достаточно успешным консервативным лечением является антибиотик с легким раздражающим действием, такой как гентамицин, который можно сочетать с повязкой контактной линзы.

Были предложены и другие, немного более инвазивные методики. Например, инъекция аутологичной крови 10,11 включает забор небольшого количества крови иглой 27G и введение 0,5 мл крови по периферии пузыря. Считается, что эритроциты и фибрин плазмы образуют временную пробку, которая, возможно, делает возможной последующую фибробластическую трансформацию. 10,11

Некоторые практикующие врачи выступают за технику укалывания пузырьков. Этот подход включает приподнятие конъюнктивы над поверхностью глазного яблока с помощью сбалансированного солевого раствора и иглы 27G. Затем хирург надсекает нижележащие рубцы теноновой капсулы иглой 30-го калибра, чтобы создать более диффузный пузырь, который декомпрессируется. Считается, что создание большего пузырькового пространства снижает фокальное напряжение в области утечки. 12

В качестве альтернативы сообщалось о некоторых успешных процедурах с использованием аргонового и Nd:YAG-лазеров, хотя эти методы не получили широкого распространения. 13,14

Важные соображения, касающиеся лечения, включают выявление причины утечки и определение характеристик ткани в месте утечки. Например, негерметичность линии шва обычно возникает либо из-за ослабления шва, из-за которого рана зияет, либо из-за того, что шов сам по себе «царапает» конъюнктиву, вызывая петлю. Часто утечки, вызванные неадекватным закрытием конъюнктивы, прекращаются со временем (из-за более позднего закрытия) и консервативного лечения.Те, которые вызваны петлей, связанной с швом, обычно не прекращаются до тех пор, пока шов, растягивающий рану, не будет удален. В целом, подтекание пузырей, возникающее в раннем послеоперационном периоде и в сосудистой конъюнктиве, имеет больше шансов закрыться с помощью консервативного лечения, упомянутого ранее. Утечки в аваскулярной ткани пузыря с меньшей вероятностью закрываются при консервативном лечении и часто требуют наложения компрессионного шва или ревизии пузыря (описано ниже).

Хирургическая ревизия
Если консервативное лечение не помогает, часто необходимо вернуться в операционную для ревизии подтекающего пузыря.Одной из хирургических стратегий является метод декомпрессии пузырьков, при котором хирург рассекает фиброзные стенки фокального кистозного пузыря, высвобождая таким образом рубцовую ткань, чтобы сделать пузырь более диффузным. Преимущество этой техники заключается в минимизации астигматизма роговицы, снижении риска послеоперационных всплесков ВГД и создании более диффузного пузыря. Его недостатки включают оставление ишемического пузыря нетронутым и повышенный риск утечки пузыря и инфекции в будущем. 15

Техника продвижения конъюнктивы включает иссечение или деэпителизацию аваскулярной пузырчатой ​​ткани.После рассечения сзади между конъюнктивой и теноновой капсулой хирург продвигается вперед и подшивает конъюнктиву к лимбу. 15-17 Эта процедура иногда требует аутологичной трансплантации конъюнктивы из нижней части конъюнктивы или парного глаза, если для продвижения недостаточно прилегающей конъюнктивы. 18 Можно наложить дополнительные лоскутные швы или накладной трансплантат (склера, роговица, перикард), если есть избыточный поток через склеральный лоскут. 19,20 Продвижение конъюнктивы устраняет бессосудистую пузырчатую ткань, но может вызвать астигматизм, птоз и послеоперационные скачки ВГД. 15

Ревизия пузыря с трансплантацией амниотической мембраны была изучена Budenz et al., 21 , которые сравнили эту технику с операцией по продвижению конъюнктивы для подтекающих пузырьков в рандомизированном клиническом исследовании. Кумулятивная выживаемость пузырьков после трансплантации амниотической мембраны составила 46% в течение 2 лет по сравнению со 100% при операции по продвижению конъюнктивы. Другие исследователи описали двухслойную технику трансплантации амниотической мембраны, при которой мембрана загибается сама на себя стороной базальной мембраны наружу.Модифицированный метод трансплантации амниотической мембраны может быть полезен в определенных ситуациях, когда у пациента нет здоровой аутологичной конъюнктивы, которую можно было бы собрать для трансплантации. 22

БЛЕБИТ
Общие сведения
Блебит характеризуется болью, легким снижением зрения, покраснением и выделениями. Внутри пузыря присутствуют воспалительные клетки, которые часто связаны с воспалением передней камеры или гипопионом. Многие врачи рассматривают конъюнктивит, блебит и эндофтальмит как континуум заболеваний.Пациенты, ранее перенесшие операцию по трабекулэктомии и страдающие конъюнктивитом, подвержены риску развития более очагового воспаления в фильтрующем пузыре, что может привести к блебиту. Пациенты с конъюнктивитом и фильтрующими операциями в анамнезе требуют тщательного наблюдения, чтобы убедиться, что у них не разовьется инфекция, связанная с пузырем.

Некоторые из зарегистрированных факторов риска развития блебита включают использование MMC, полнослойные процедуры, фильтрационные операции, выполняемые без операции по удалению катаракты, позднее начало подтекания пузырей, молодой возраст и нижние пузыри. 5,23,24

Наиболее частыми возбудителями блебитов являются Staphylococcus epidermidis и Staphylococcus aureus 25,26 (рис. 1). Haemophilus influenzae является частым возбудителем с нижними пузырями. В большинстве исследований стафилококки и стрептококки являются частыми причинами пузырькового эндофтальмита. 27-29 Количество пузырчатых эндофтальмитидов, связанных с видами стафилококков, колеблется от 7,0% до 58,2%, тогда как число, вызванное видами стрептококков, колеблется от 19% до 57%. 30-34

Рис. 1. На левом глазу этого пациента развился блебит Serratia marcescens на фоне несостоятельности пузыря через много лет после трабекулэктомии с помощью MMC. Serratia marcescens представляет собой грамотрицательную палочку, которая относительно редко вызывает инфекцию, связанную с пузырями.

Ведение
После того, как у пациента был клинически диагностирован блебит, рекомендуется выполнить посев пузырька для определения возбудителя, ответственного за инфекцию.Первоначальное лечение блебита обычно включает агрессивное дозирование обогащенных антибиотиков для местного применения (рис. 2) или фторхинолонов четвертого поколения для местного применения. Субконъюнктивальное назначение антибиотиков следует рассматривать у пациентов с тяжелым блебитом (наличие гипопиона) или у потенциально несовместимых пациентов. Меньшая часть специалистов по глаукоме будет использовать пероральные или внутривенные антибиотики при блебите. 35

Рис. 2. После интенсивного лечения усиленными местными антибиотиками блебит исчез в глазу, показанном на рис. 1, и через 3 недели наблюдалось активное подтекание пузырей.Из-за продолжающейся утечки пациент был доставлен в операционную для ревизии пузыря и установки инфероназального дренажного устройства для глаукомы Baerveldt (Advanced Medical Optics, Inc., Санта-Ана, Калифорния).

При тяжелом воспалении передней камеры с наличием фибрина или клеток стекловидного тела хирург должен расценить инфекцию как эндофтальмит и немедленно ввести интравитреально антибиотики и, возможно, стероиды. В случаях серьезной потери зрения со зрением, воспринимающим только свет, результаты исследования эндофтальмита витрэктомии (EVS) могут поддержать более агрессивное лечение с витрэктомией pars plana.В EVS были включены пациенты, перенесшие операцию по удалению катаракты или имплантацию вторичной ИОЛ. Исследование показало, что люди со зрением, воспринимающим только свет, достигли лучших конечных зрительных результатов при витрэктомии плоской части тела по сравнению с биопсией стекловидного тела. Кроме того, EVS не показал разницы в конечной остроте зрения при использовании внутривенных антибиотиков. Витрэктомия плоской части тела или немедленная биопсия стекловидного тела имели одинаковые результаты у пациентов с движением рук или улучшением зрения. 36 Важно помнить, что эндофтальмит, связанный с пузырями, может отличаться от такового после операции по удалению катаракты или имплантации вторичной ИОЛ.Вероятно, разумно обратиться к витреоретинальному специалисту за советом по поводу соответствующего курса лечения в таких запущенных случаях.

Изучение практики врачей глаукоматозных врачей может быть полезным при разработке руководств по лечению пациентов с подтеканием пузырьков и блебитом. Reynolds et al. 35 провели опрос специалистов по глаукоме в Американском глаукомном обществе относительно их методов лечения блебитов. В этом опросе 48% респондентов указали, что они обычно или почти всегда видели блебит на фоне подтекающего пузыря.В случае постоянно подтекающего пузыря после разрешения блебита 77% специалистов указали, что попытаются исправить пузырь хирургическим путем, обычно в форме продвижения конъюнктивы или аутотрансплантата.

Рецидив
Пузырьки у пациентов с рецидивирующими эпизодами блебита характеризуются генерализованным или очаговым истончением, а также истощением бокаловидных клеток. Муцин, продуцируемый бокаловидными клетками, выполняет важную функцию физического и биологического барьера для инородных тел и микроорганизмов.Плохой иммунный ответ из-за недостатка муцина и механически тонкие пузырьки являются патологическими характеристиками, которые связаны с инфицированными пузырьками, особенно в условиях применения антиметаболитов. 37

УСОВЕРШЕНСТВОВАННЫЕ МЕТОДЫ ТРАБЕКУЛЭКТОМИИ
Подтекание пузырей, блебит и ассоциированный с пузырями эндофтальмит представляют собой проблемы, с которыми трудно справиться. Есть надежда, что будут разработаны методы снижения частоты этих осложнений после фильтрационной хирургии с применением антиметаболитов.Новые методы трабекулэктомии, впервые предложенные Peng Khaw, PhD, FRCS, FRCOphth, могут снизить частоту осложнений от процедур фильтрации с дополнительными антиметаболитами. 38 Доктор Хоу использует конъюнктивальный лоскут на основе свода и широкое применение антифибротических средств. Этот метод расширяет задний пузырь и сводит к минимуму образование тонкостенных кистозных пузырьков, которые связаны с повышенным риском инфекции, связанной с пузырями. 38 Кроме того, методы тщательного закрытия роговицы и конъюнктивы лоскутами на основе свода могут привести к уменьшению утечек в области лимба. 38 Описан метод закрытия конъюнктивы на основе свода с использованием нейлонового вертикального матрацного шва 9–0, проходящего по всей длине края конъюнктивы и прикрепленного к интактному лимбу на каждом конце. Этот метод может обеспечить герметичное закрытие конъюнктивальных лоскутов на основе свода при фильтрационных операциях с использованием митомицина С. утечки и инфекции, связанные с пузырями.Однако офтальмологи должны сохранять бдительность, чтобы своевременно обнаруживать инфекции, связанные с пузырями, и тем самым минимизировать последствия для зрения своих пациентов.

Франсиско Э. Фантес, доктор медицинских наук, адъюнкт-профессор клинической офтальмологии Института глаз Баскома Палмера Медицинской школы Миллера Университета Майами. Он признал отсутствие финансовой заинтересованности в продукте или компании, упомянутых здесь. С доктором Фэнтесом можно связаться по телефону (305) 326-6000; [email protected]

Джеффри М.Зинк, доктор медицинских наук, является членом Службы глаукомы в Глазном институте Цинциннати и волонтером-доцентом офтальмологии в Медицинском колледже Университета Цинциннати. Он признал отсутствие финансовой заинтересованности в продукте или компании, упомянутых здесь. С доктором Зинком можно связаться по телефону (513) 984-5133; [email protected]

1. Чен П.П., Гедде С.Дж., Буденц Д.Л., Пэрриш, Р.К. Амбулаторное лечение пузырьковой инфекции. Арка Офтальмол. 1997; 115:1124-1128.
2. Гринфилд Д.С., Либманн Дж.М., Джи Дж., Ритч Р.Подтекание пузырей с поздним началом после фильтрующей операции по поводу глаукомы. Арка Офтальмол. 1998; 116:443-447.
3. Исследовательская группа по хирургии фильтрации фторурацила. Пятилетнее наблюдение за исследованием хирургии фильтрации фторурацила. Am J Офтальмол. 1996; 121:349-366.
4. Скута Г.Л., Бисон К.С., Хиггинботэм Э.Дж. Интраоперационный митомицин по сравнению с послеоперационным 5-фторурацилом в хирургии фильтрации глаукомы с высоким риском. Офтальмология. 1992;99:438-444.
5. Браун Р. Х., Ян Л. Х., Уокер С. Д. и соавт. Лечение пузырьковой инфекции после операции по поводу глаукомы.Арка Офтальмол. 1994;112:57-61.
6. Залта А.Х., Видер Р.Х. Закрытие протекающих фильтровальных пузырьков цианоакрилатным тканевым клеем. Бр Дж Офтальмол. 1991;75:170-173.
7. Пальмберг П. Хирургия осложнений. В: Альберт Д.М., изд. Офтальмохирургия: принципы и методы. Том 1. Лондон: Blackwell Science; 1999: 476-491.
8. Блок М.Д., Кок Дж.Х., Ван Мил С. и соавт. Использование бандажной линзы мегасофт для лечения осложнений после трабекулэктомии. Am J Офтальмол. 1990;110:264-268.
9.Zacchei AC, Palmberg PF, Mendosa A, Robinson JC. Компрессионные швы: новый метод лечения подтекающих или болезненных фильтровальных пузырьков. Invest Ophthalmol Vis Sci. 1996; 37 (прил.): 444.
10. Смит М.Ф., Магауран Р., Дойл Дж.В. Лечение постфильтрационной пузырной утечки путем введения аутологичной крови в пузырек. Офтальмологический хирург. 1994; 25:636-637.
11. Бернстайн А., Вудунн Д., Исии Ю. и соавт. Инъекция аутологичной крови при поздней утечке фильтрующих пузырьков. Am J Офтальмол. 2001;132:36-40.
12. Маэда Х., Ино А., Накамура М., Неги А.Безопасное лечение поздних подтеканий пузырьков с помощью иглы. Глаз. 2000; 14:802-804.
13. Финк А.Дж., Бойс-Смит Дж.В., Бреар Р. Управление большими фильтрующими пузырьками с помощью аргонового лазера. Am J Офтальмол. 1986; 101:695-699.
14. Гейер О. Управление большими, просачивающимися и непреднамеренно фильтрующими пузырьками с помощью неодимового: YAG-лазера. Офтальмология. 1998; 105:983-987.
15. Кроустон Дж.Г., Вайнреб Р.Н., Гринфилд Д.С. Блеб ревизия. Глаукома сегодня. 2005 май/июнь; 3:3:19-21.
16. Коэн Дж.С., Шаффер Р.Н., Хетерингтон Дж., Хоскинс Д.Ревизия фильтрационной хирургии. Арка Офтальмол. 1977; 95:1612-1615.
17. Буденц Д.Л., Чен П.П., Уивер Ю.К. Продвижение конъюнктивы при поздних утечках через фильтрующие пузырьки. Арка Офтальмол. 1999;117:1014-1019.
18. Wilson RW, Kotas-Neumann R. Свободная конъюнктивальная заплата для восстановления стойкой поздней утечки пузырьков. Am J Офтальмол. 1994; 117:569-574.
19. Халкиадакис И., Лим П., Морой С.Э. Хирургические результаты ревизии пузыря со склеральной заплатой при поздних осложнениях пузыря. Офтальмологические хирургические лазеры.2005;36:14-23.
20. Космин А.С., Вишарт П.К. Полнослойный склеральный трансплантат для хирургического лечения поздней утечки фильтрационного пузыря. Офтальмологические хирургические лазеры. 1997; 28:461-468.
21. Budenz DL, Barton K, Tseng S. Трансплантация амниотической мембраны для восстановления протекающих фильтрующих пузырьков глаукомы. Am J Офтальмол. 2000;130:580-588.
22. Fantes F, Palmberg P. Поздние осложнения хирургического лечения глаукомы. В: Rhee DJ, изд. Цветовой атлас и синопсис клинической офтальмологии. Нью-Йорк: Макгроу-Хилл; 2003: 347-360.
23. Jampel HD, Quigley HA, Kerrigan-Baumrind LA, et al. Факторы риска позднего начала инфекции после фильтрационной хирургии глаукомы. Арка Офтальмол. 2001; 119:1001-1008.
24. Soltau JB, Rothman RF, Budenz DL, et al. Факторы риска глаукомы, фильтрующие пузырьковые инфекции. Арка Офтальмол. 2000;118:338-342.
25. Айяла Р.С., Беллоуз Р.А., Томас Дж.В., Хатчинсон Т.Б. Блебоинфекции: клинически разные течения «блебита» и эндофтальмита. Офтальмологические хирургические лазеры. 1997; 28:452-460.
26.Вахид С., Риттербанд Д.С., Гринфилд Д.С. и др. Рецидивирующие пузырьковые инфекции. Бр Дж Офтальмол. 1998; 82:926-929.
27. Song A, Scott IU, Flynn HW, Budenz D. Пузырьковый эндофтальмит с отсроченным началом. Офтальмология. 2002;109:985-991.
28. Ciulla TA, Beck AD, Topping TM, Baker AS. Блебит, ранний эндофтальмит и поздний эндофтальмит после глаукомофильтрирующей хирургии. Офтальмология. 1997; 104:986-995.
29. Waheed S, Ritterband DC, Greenfield DS, et al. Новые закономерности инфицирования организмов при позднем эндофтальмите, связанном с пузырьками: десятилетний обзор.Глаз. 1998; 12 (часть 6): 910–915.
30. Мандельбаум С., Форстер Р.К., Геленде Х., Калбертсон В. Эндофтальмит с поздним началом, связанный с фильтрующими пузырьками. Офтальмология. 1985;92:964-972.
31. Phillips WB, Wong TP, Berger RL, et al. Поздний эндофтальмит, связанный с фильтрующими пузырьками. Офтальмологический хирург. 1994; 25:88-91.
32. Гринфилд Д.С., Сунер И.Дж., Миллер М. и соавт. Эндофтальмит после фильтрующей операции с митомицином C. Arch Ophthalmol. 1996; 114:943-949.
33. Kangas TA, Greenfield DS, Flynn HW Jr, et al.Отсроченный эндофтальмит, связанный с конъюнктивальными фильтрующими пузырьками. Офтальмология. 1997; 104:746-752.
34. Waheed S, Ritterband DC, Greenfield DS, et al. Пузырьковая глазная инфекция у детей после трабекулэктомии с митомицином C. Офтальмология. 1997;104:2117-2120.
35. Reynolds AC, Skuta GL, Monlux R, Johnson J. Лечение блебита членами Американского общества глаукомы: обзор. J Глаукома. 2001; 10:340-347.
36. Исследовательская группа эндофтальмита по витрэктомии. Результаты исследования витрэктомии эндофтальмита.Рандомизированное исследование немедленной витрэктомии и внутривенного введения антибиотиков для лечения послеоперационного бактериального эндофтальмита. Арка Офтальмол. 1995;1479-1496.
37. Matsuo H, Tomita G, Araie M, et al. Гистопатологическая находка в фильтрационных пузырьках при рецидивирующем блебите. Бр Дж Офтальмол. 2002;86:827.
38. Джонс Э., Кларк Дж., Хоу, П.Т. Последние достижения в технике трабекулэктомии. Курр Опин Офтальмол. 2005; 16:107-113.
39. Wise J. Митомицин-совместимая техника наложения швов для конъюнктивальных лоскутов на основе свода в фильтрационной хирургии глаукомы.Арка Офтальмол. 1993; 111:992-997.

Возможная связанная с оказанием медицинской помощи передача как причина вторичной инфекции и структура популяции изолятов Staphylococcus aureus из двух центров лечения ран в Гане

New Microbes New Infect. 2016 сен; 13: 92–101.

, 1, 2, 2, 3 , 1 , 3, 6 , 4 , 4, 5 , 4 , 4, 5 , 4 , 1 , 1 , 1 , 1 , 2, 3 , 4 и 1, *

G.Kpeli

1) Мемориальный институт медицинских исследований Ногучи, Аккра, Гана

2) Швейцарский институт тропиков и общественного здравоохранения, Базель, Швейцария

3) Университет Базеля, Базель, Швейцария 45 I. Darko Otchere

1) Мемориальный институт медицинских исследований Ногучи, Аккра, Гана

A. Lamelas

3) Базельский университет, Базель, Швейцария

4) 9020 Mobiol de Adolesstudioza Red, 9020 Экология, А.C, Carretera antigua a Coatepec 351, El Haya Xalapa, Veracruz, Mexico

AL Buultjens

4) Doherty Applied Microbial Genomics, Отделение микробиологии и иммунологии, Институт инфекций и иммунитета Доэрти, Мельбурнский университет, Мельбурн, Виктория , Australia

D. Bulach

4) Doherty Applied Microbial Genomics, Департамент микробиологии и иммунологии, Институт инфекций и иммунитета Доэрти, Мельбурнский университет, Мельбурн, Виктория, Австралия

5) Victorian Life Sciences Инициатива, Университет Мельбурна, Парквилль, Виктория, Австралия

S.L. Baines

4) Doherty Applied Microbial Genomics, Отделение микробиологии и иммунологии, Институт инфекций и иммунитета Доэрти, Мельбурнский университет, Мельбурн, Виктория, Австралия

T. Seemann

4) Doherty Applied Microbialty Applied Геномика, кафедра микробиологии и иммунологии, Институт инфекций и иммунитета Доэрти, Мельбурнский университет, Мельбурн, Виктория, Австралия

5) Victorian Life Sciences Computation Initiative, Мельбурнский университет, Парквилл, Виктория, Австралия

S.Giulieri

4) Doherty Applied Microbial Genomics, Департамент микробиологии и иммунологии, Институт инфекций и иммунитета Доэрти, Мельбурнский университет, Мельбурн, Виктория, Австралия

Z. Nakobu

1) Noguchi Memorial Research, Аккра, Гана

SY Aboagye

1) Мемориальный институт медицинских исследований Ногучи, Аккра, Гана

E. Owusu-Mireku

1) Мемориальный институт медицинских исследований Ногучи, Аккра, Гана

G.Pluschke

2) Швейцарский институт тропиков и общественного здравоохранения, Базель, Швейцария

3) Базельский университет, Базель, Швейцария

T.P. Stinear

4) Doherty Applied Microbial Genomics, Отделение микробиологии и иммунологии, Институт инфекций и иммунитета Доэрти, Мельбурнский университет, Мельбурн, Виктория, Австралия

D. Yeboah-Manu

1) Noguchi Memorial Institute for Medical Research, Accra, Ghana

1) Мемориальный институт медицинских исследований Noguchi, Accra, Ghana

2) Swiss Tropical and Public Health Institute, Basel, Switzerland

3) University of Basel, Basel , Швейцария

4) Doherty Applied Microbial Genomics, Департамент микробиологии и иммунологии, Институт инфекций и иммунитета Доэрти, Мельбурнский университет, Мельбурн, Виктория, Австралия

5) Victorian Life Sciences Computation Initiative, Мельбурнский университет , Parkville, VIC, Australia

6) Red de Estudios Moleculares Avanzados, Instituto de Ec ология, А.C, Carretera antigua a Coatepec 351, El Haya Xalapa, Veracruz, Mexico

Автор, ответственный за переписку: D. ​​Yeboah-Manu, Мемориальный институт медицинских исследований Ногучи, P.O. Box 581, Legon, Accra, GhanaAccraGhana [email protected]

Поступила в редакцию 30 апреля 2016 г.; Пересмотрено 24 июня 2016 г .; Принято 1 июля 2016 г.

Это статья в открытом доступе по лицензии CC BY (http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/).

Эта статья была процитирована другими статьями в PMC.
Дополнительные материалы

Данные S1 . Идентифицированы гены устойчивости к антибиотикам

GUID: 08322F5D-A350-4CE1-8D99-B0061F40F9D5

Данные S2 . Основные расстояния SNP

GUID: AEAF3A85-8338-49D3-A8B0-4FDA911AFAB5

Рис. S1 . Блок-схема исследования Дизайн

GUID: B2A996BB-733B-4F58-B902-79EA3B5555C

GUID: B9C2AF1B-643A-4D14-8073-3847911D15AB

Аннотация

Мы ранее показали, что вторичные инфекции бурулейных язвенных ран были часто вызывается золотистым стафилококком . Чтобы понять возможные пути вторичной инфекции, мы охарактеризовали изолята S. aureus из поражений пациентов и окружающей среды в двух медицинских центрах Ганы. Сто один изолят S. aureus был выделен из ран ( n  = 93, 92,1%) и больничной среды ( n  = 8, 7,9%) и охарактеризован геном spa , mecA и токсин лейкоцидина Пантона-Валентайна с последующим секвенированием spa и секвенированием всего генома подгруппы из 49 изолятов.Типирование Spa и секвенирование гена spa из 91 изолята выявило 29 различных типов spa с преобладанием t355 (ST152), t186 (ST88) и t346. Несмотря на то, что в обоих медицинских центрах было выделено много различных штаммов, кластеризация генотипов была выявлена ​​внутри центров. Кроме того, мы определили кластер, состоящий из изолятов от медицинского работника, пациентов, перевязанных в тот же день, и щипцов, использованных для перевязки, что указывает на возможную передачу инфекции, связанную с оказанием медицинской помощи.Эти кластеры были подтверждены филогеномным анализом. Двадцать четыре (22,8%) изолята были идентифицированы как метициллин-резистентные. гена S. aureus и lukFS , кодирующие лейкоцидин Пантона-Валентайна, были идентифицированы в 67 (63,8%) изолятах. Скрининг фенотипа показал широко распространенную устойчивость к тетрациклину, эритромицину, рифампицину, амикацину и стрептомицину. Геномика подтвердила широко распространенное присутствие генов устойчивости к антибиотикам к бета-лактамам, хлорамфениколу, триметоприму, хинолонам, стрептомицину и тетрациклину.Наши результаты показывают, что среда здравоохранения, вероятно, способствует суперинфекции ран язвы Бурули, и требует улучшения обучения методам лечения ран и инфекционного контроля.

Ключевые слова: Язва Бурули, ассоциированная с оказанием медицинской помощи, инфекция, санаторно-курортное типирование, Staphylococcus aureus , полногеномное секвенирование

Введение

предложено в качестве предварительного условия формирования грануляционной ткани и стимуляции заживления раны [1].Раны могут быть инфицированы через три основных источника; окружающая кожа, эндогенные источники, такие как слизистая оболочка носа, желудочно-кишечный тракт и мочеполовой тракт, и более широкая окружающая среда. В медицинском учреждении источниками контаминации и последующего инфицирования раны могут быть работники здравоохранения (МР), пациенты и неживая среда. Непосредственный контакт больного с инфицированным медработником во время общего ухода или лечения может привести к передаче микроорганизмов.Косвенно инфицированный пациент или медработник может прикоснуться к объекту, инструменту или поверхности и загрязнить их, а последующий контакт между этим предметом и вторым пациентом может привести к заражению этого пациента, что приведет к заражению. Раневая микрофлора обычно полимикробная [2], включающая такие микроорганизмы, как стафилококки, энтерококки, стрептококки, факультативные грамотрицательные бактерии и анаэробные бактерии [3].

Staphylococcus aureus — печально известный условно-патогенный внутрибольничный патоген и один из основных микроорганизмов, вовлеченных в инфицирование хронических ран [4].Он может бессимптомно переноситься носителем и передаваться от пациента к пациенту. Подсчитано, что около 25% нормальной популяции могут быть носителями, с более высокой частотой носительства около 50% у пациентов с инсулинозависимым диабетом, внутривенных наркоманов и пациентов на диализе [5].

В предыдущем исследовании мы определили инфицирование язвы Бурули (ЯБ) бактериальными патогенами как возможную причину задержки заживления ран у участников исследования [6]. Несколько видов бактерий были выделены с помощью S.aureus и Pseudomonas aeruginosa доминируют. Несмотря на то, что большинство идентифицированных организмов были внутрибольничными патогенами, в этом исследовании не изучались возможные пути инфицирования поражений. Стремясь лучше понять возможные пути заражения поражений, мы инициировали текущее исследование, чтобы охарактеризовать S. aureus , выделенных из разных источников в двух медицинских учреждениях в Гане, занимающихся лечением ЯБ.

Материалы и методы

Исследовательские центры, участники и сбор образцов

Исследование проводилось в двух основных лечебных центрах ЯБ в округах Ga West и Ga South региона Большая Аккра в Гане, назначенных учреждении A и учреждении B , соответственно.Исследование включало анализ изолятов S. aureus из ран пациентов с микробиологически подтвержденной ЯБ (ЯБ) и без ЯБ (НБУ) (изначально предполагаемые случаи ЯБ, которые не были подтверждены ни одним из трех методов подтверждения — микроскопия Циля-Нельсона). , IS2404 ПЦР и посев), которые получали лечение либо стационарно при поступлении, либо амбулаторно в одном из двух медицинских центров с октября 2010 г. по февраль 2014 г. Образцы поражений пациентов были взяты мазками, а образцы были проанализированы в бактериологическом отделении Мемориального института Ногучи. Медицинское исследование.Всего было собрано 173 образца у 162 пациентов, и 90 593 S. aureus было выделено из 88 образцов, взятых у 76 пациентов, 61 из которых был пациентом с ЯБ и 15 — с НЯБ. Из 61 пациента с ЯБ 56 находились на амбулаторном и 5 стационарном лечении на момент отбора проб, в то время как все пациенты НБУ находились на амбулаторном лечении. Пять пациентов находились на стационарном лечении в течение 4 недель или более, поэтому изоляты от этих пациентов можно классифицировать как потенциально внутрибольничные. Для выяснения источников инфекции в период с августа 2013 г. по февраль 2014 г. были взяты пробы рук медработников, перевязочных и палат здравпунктов, поверхностей туалетных столиков, дверных ручек, инструментов и оборудования, а также перевязочных растворов и материалов на микробиологический анализ. .Образцы мазков также брали с ладоней медсестер и их рук в перчатках между перевязками пациентов и поражений пациентов, которых они перевязывали до и после перевязки. Образцы мазков транспортировали в фосфатно-солевом буфере при 4°C в Мемориальный институт медицинских исследований Ногучи. Было собрано и проанализировано 86 образцов, и из 13 из них было выделено 90 593 S. aureus (см. Дополнительный материал, рис. S1).

Микробиологические методы

Образцы обрабатывали и высевали на кровяной и маннитно-солевой агары и инкубировали в течение 18–24 ч при 37°С, после чего исследовали.Идентификация видов Staphylococcus была проведена с помощью колоний и микроскопической морфологии, каталазной реакции и биохимического теста на коагулазу (BD, Franklin Lakes, NJ, USA). Набор Staphylase Kit, BD BBL™ Staphyloslide Latex Test (BD, Franklin Lakes, NJ, USA) использовали для дифференциации каталазоположительных грамположительных бактерий S. aureus от других видов Staphylococcus .

Антибиограмма выделенных бактерий

Тест на чувствительность к антибиотикам определяли диско-диффузионным методом Кирби-Бауэра в соответствии с рекомендациями CLSI [7].Чувствительность определяли к антибиотикам; амикацин (30 мкг), сульфаметоксазол-триметоприм (23,75 мкг/1,25 мкг), ампициллин (10 мкг), тетрациклин (30 мкг), гентамицин (10 мкг), эритромицин (15 мкг), цефуроксим (30 мкг), цефтриаксон (30 мкг). мкг), хлорамфеникол (30 мкг), цефокситин (30 мкг), рифампицин (5 мкг), стрептомицин (10 мкг), ванкомицин (30 мкг), клиндамицин (2 мкг) и цефотаксим (30 мкг). Картриджи с антибиотиками были получены от Oxoid (Wade Road, Basingstoke, Hampshire, United Kingdom) и BD.Штамм сравнения Staphylococcus aureus ATCC 25923 использовали в качестве эталонного штамма.

Генотипирование – традиционное молекулярное типирование

Экстракты сырой ДНК готовили кипячением и использовали в качестве матрицы в ПЦР. Генетическое родство изолятов определяли путем амплификации полиморфной Х-области гена белка А ( spa ) с использованием пар праймеров spa-1113F и spa-1514R (см. Дополнительный материал, Таблица S1) [8] и ДНК из S. aureus ATCC ® 25923 в качестве положительного контроля.Всего с использованием этих праймеров было типировано 95 изолятов из 101. Ряд подозреваемых штаммов S. aureus не могли быть типированы этими праймерами и были дополнительно типированы с использованием другого набора праймеров, spaT3-F и spa-1517R (см. Дополнительный материал, Таблица S1). Эти праймеры были ранее описаны для обнаружения штаммов S. aureus , которые могут иметь перестройки в IgG-связывающей области гена, где расположен прямой праймер, что делает их нетипируемыми исходными праймерами spa [9].Секвенирование гена spa из положительных изолятов было поручено Macrogen Europe (Амстердам, Нидерланды), а последовательности были проанализированы и отнесены к типам spa с использованием DNAGear [10]. Отношения между штаммами исследовали с помощью пакета Staden [11] и филогенетического дерева максимального правдоподобия, созданного в Mega 5.05 (www.megasoft.net) и визуализированного в FigTree v1.4.2. (http://tree.bio.ed.ac.uk/software/figtree/).

Гены для mecA и лейкоцидина Пантона-Валентина (PVL) искали с использованием праймеров mecA P4, mecA P7 и pvl-F, pvl-R (см. Дополнительный материал, Таблица S1) [12], [13].MecA и PVL-положительный изолят S. aureus 282-101 из Statens Serum Institute (Копенгаген, Дания), любезно предоставленный доктором Беверли Эгир, использовался в качестве положительного контроля. Типы Agr определяли с использованием праймеров pan agr F, agr 1-R, agr 2-R, agr 3-R и agr 4-R (см. Дополнительный материал, Таблица S1) [14]. ПЦР содержала 12,5 мкл HotStar Taq Mastermix (Qiagen, Hilden, Germany), 5 мкл воды без нуклеаз, 2 мкл каждого праймера и 3,5 мкл ДНК. Результаты типирования mecA , agr и PVL анализировали с использованием Microsoft Excel.

Полногеномное секвенирование и анализ

Из 101 изолята была отобрана подгруппа из 70 изолятов для полногеномного секвенирования (WGS), состоящая из 31 метициллин-резистентного изолята S. aureus (MRSA) и 39 других метициллин-чувствительных изолятов S. aureus (MSSA), охватывающих кластеры, наблюдаемые на филогенетическом дереве, полученном в результате секвенирования гена spa . Геномную ДНК экстрагировали с помощью набора для крови и тканей Qiagen DNeasy (Qiagen) в соответствии с инструкциями производителя и секвенировали с использованием платформы Illumina MiSeq (секвенирование 2 × 250 п. , США).Полученные считывания последовательностей были обработаны с использованием пользовательского конвейера биоинформатического анализа Nullarbor (nullarbor.pl 0.6; https://github.com/tseemann/nullabor) для сборки de novo , а также сопоставления данных считывания с эталонным геномом Sa_aus0325 (S. Giulieri). и др. , неопубликованные). Nullarbor использует основанный на BLAST метод для скрининга контигов из сборок de novo на наличие генов устойчивости к антибиотикам. Попарное выравнивание однонуклеотидных полиморфизмов (SNP) основного генома использовалось с помощью FastTree. [15], чтобы вывести филогенетические деревья максимального правдоподобия, используя общую обратимую во времени модель замены нуклеотидов.Результирующие деревья были визуализированы в FigTree v1.4.2. Топологии корневых филогенетических деревьев, полученных как при типировании spa , так и при WGS с использованием Staphylococcus simiae CCM7213 в качестве внешней группы, сравнивали с помощью танглограммы в Dendroscope (v3.4.4) [16].

Результаты

Бактериальные изоляты

Всего из отобранных источников было идентифицировано 101 изолята S. aureus . 88 изолятов были выделены у 76 пациентов во время рутинного отбора проб; 72 (81.6%) были от 61 больного ЯБ и 15 — от ран НБУ. По одному изоляту был идентифицирован у 66 пациентов и несколько изолятов у остальных десяти пациентов. У пяти пациентов было взято два изолята из одного поражения в один момент времени, у одного пациента было два изолята из двух поражений, три изолята были идентифицированы у пациента с тремя поражениями (пациент А, по одному от каждого), у двух пациентов было взято два изолята в два разных момента времени в течение курса лечения и у одного пациента с тремя изолятами, отобранными трижды в разные моменты времени в ходе курса лечения.

Чтобы понять возможный путь заражения, дополнительные пробы медработников, рабочей среды и пациентов, за которыми они ухаживают, привели к выделению 13 (15,1%) S. aureus . Изоляты включали пять из поражений пациентов, шесть из оборудования (щипцы) и по одному из рук медработника и стола, используемого для перевязки ран. Все эти изоляты были из учреждения B. Всего 53 изолята были из учреждения A и 48 изолятов из учреждения B.

Структура популяции

S.aureus и эпидемиологической ассоциации

Spa типирование выявило 29 различных spa типов, в том числе 15 (14,9%) одиночных. Три доминирующих типа spa (t355, t186 и t346) были обнаружены в семи (6,93%) изолятах каждый (см. Дополнительный материал, Таблица S2). Тридцать пять изолятов не могли быть отнесены к типу spa . Филогенетический анализ выявил десять различных кластеров, где кластер определялся как группа из двух или более изолятов, обнаруженных на одной и той же ветви дерева (кластеры A–J; ), которые состояли из кластеров, специфичных для медицинских центров, и общих кластеров.Кластеры A, C, D, H и J были составлены из штаммов из обоих медицинских центров () с коэффициентами 2:1, 1:1, 1:1, 1:1 и 1:2 для учреждений A и B соответственно. . Кластеры B и I были составлены из штаммов только из учреждения A, тогда как семь из десяти изолятов в кластере G также были из учреждения A. Кластеры E и F были составлены в основном из штаммов из учреждения B с соотношением 1:3 и 2:12 для объектов A и B соответственно (). В кластере F были изоляты, выделенные из образцов, взятых в один и тот же день с рук медработника и пациентов, последовательно одетых этим работником, изоляты из образцов, взятых в разные дни с одного оборудования (щипцов) после того, как оно использовалось на четырех пациентах последовательно и два изолята, выделенные от пациента в два разных момента времени (2-я и 8-я недели) во время лечения ().Это открытие привело нас к выводу, что в этом медицинском центре происходили случаи передачи инфекции. Кластер G состоял в основном из изолятов MRSA (), тогда как кластер I состоял из изолятов из трех разных поражений одного пациента, у которых был один и тот же тип spa (t2500) (), что позволяет предположить, что три очага были инфицированы из одного общий источник, возможно, из микробиоты пациентов.

Спа филогения, показывающая кластеры и отношения между изолятами. Филогения максимального правдоподобия гена spa .Дерево было укоренено посередине. Числа в узлах указывают значения поддержки в виде долей псевдорепликатов начальной загрузки. Ветки со значениями поддержки >55% свернуты. A–J = выявленные кластеры. Штаммы зеленого цвета получены из Медицинского центра А, а синие — из Медицинского центра В. Желтые кружки представляют устойчивый к метициллину Staphylococcus aureus , а фиолетовые кружки показывают изоляты от медицинского работника, пациентов и оборудования в Health центр Б.

Обнаружение

генов mecA и PVL и Agr типа

ПЦР-скрининг гена mecA идентифицировал 31 изолят как MRSA. Генотипы 24 из этих изолятов коррелировали с результатами их антибиограммы; однако mecA также был обнаружен в семи изолятах, демонстрирующих чувствительные фенотипы. Двадцать один из них был от пациентов с ЯБ, восемь — от пациентов с НБУ и два — из окружающей среды. Четыре MRSA были изолированы от стационарных пациентов. Ген PVL обнаружен у 66 изолятов; 51 от больных ЯБ, 12 от больных НБУ и трое из окружающей среды.Гены mecA и PVL были обнаружены в 20 изолятах, состоящих из 14 изолятов от пациентов с ЯБ, пяти от пациентов с НЯБ и одного из окружающей среды. Девятнадцать (18,8 %) изолятов относились к агр-типу 1, 23 (22,8 %) изолята — к агр-типу 2, 30 (29,7 %) изолята — к агр-типу 3, три (2,9 %) изолята — к агр-типу 4 и четыре (3,9 %) изолятам. ) показали полосы как для agr типов 2, так и для 3. Двадцать два (21,8%) изолята были нетипируемыми и, возможно, agr-дефектными мутантами.

Антибиограмма изолятов

Более 70% изолятов были чувствительны к амикацину (89; 88%) и гентамицину (89; 88%).Уровень резистентности >50% был зарегистрирован к антибиотикам ампициллину (91; 90%), тетрациклину (57; 56,4%) и хлорамфениколу (67; 66%). Более низкие показатели резистентности 37,6%, 39,6% и 48,5% были также зарегистрированы против цефалоспоринов; цефтриаксон, цефотаксим и цефуроксим, соответственно, тогда как 26% ​​изолятов показали снижение чувствительности к ванкомицину (). Сравнивая антибиотикограммы изолятов MRSA и MSSA, значительная часть изолятов MRSA была устойчива к тетрациклину (p <0.05) (). Устойчивость к хлорамфениколу была одинаково высокой среди MRSA и MSSA.

Таблица 1

Таблица 1

9 (%) N (%) (39.6) 2 8 (8) 2 TetracyCline 2 39 (38.6) 2 67 (66) 2 Ceftriaxone 2 53 (52.5) ​​2 10 (10) 2 Cefuroxime 2 (51.5) 2 (48.5) 2 Ampicillin 20 2 18 (18) 2 31 (30.6) 2 30 (30) 2 30 (30) 2 Streptomycin 2 66 (65.3) 9002 26 (26)
антибиотики антибиограмма
3 N 9 (%) N (%) (%) N (%)
Амикацин 89 (88) 7 (7) 5 (5)
Цефотаксим 50 (49,5) 1908) 40 (39,6)
Gentamicin 89 (88) 4 (4) 8 (8)
5 (5) 57 (56.4)
Chloramphenicol 26 (26) 8 (8) 8 (8)
38 (37.6)
Котримоксазол 65 (64,3) 4 (4) 32 (31.6)
52 (51.5)
(41.5)
6 (6) 4 (4) 91 (90)
Клиндамицин 52 (51,4)
Ceefoxitin 66 (65) 5 (5)
er ererythromycin 41 ( 41) 37 (36) 23 (23)
Рифампицин 46 (45.5) 9 (9) 46 (45.5)
9 (9) 9 (9) 26 (25.7)
Vancomycin 75 (74) 26 (26)
4 Таблица 2

Сравнение антибиотического сопротивления между метициллин-устойчивым и метициллином-восприимчивым Staphylococcus aureus

64 Устойчивость
99999009 2 0.167 2 2 24 (77.4) 2 Chloramphenicol 2 24 (77.4) 2 43 (61,4) 2 0.170 2 Cotrimoxazole 2 0.335 2 0.335 2 25 (35.7) 2 0.110 2 Rifampicin 2 35 (50.0) 2 0.200 2 Streptomycin 2 0.217
Антибиотики
MRSA, N = 31, N (%) N (%) MSSA, N = 70593 N = 70, N (%)

Amikacin 3 (9.6) 2 (2.8)
Gentamicin 3 (9.6) 5 (7.1) 5 (7.1) 5 (7.1) 0.698
Tetracycline
33 (47.1) 0.005
10 (32.4) 22 (31.4) 22 (31.4) 1.000
29 ( 93.5) 60 (85.7)
Clindamycin 6 (19.4) 6 (19.4) 25 (35.7)
ererythromycin 8 (25.8) 15 (21.4) 0.617
11 (35.5)
5 (16.1) 21 (30.0) 21 (30.0)
Vancomycin 11 ( 35.5) 15 (21,4) 0,147

Анализ WGS

В ходе этого проекта у нас была возможность дополнительно исследовать некоторые изоляты с помощью WGS. Из первоначальных 70 изолятов, подвергнутых WGS, 21 имел низкий охват прочтений и был исключен из анализа. Сначала мы вывели данные о многолокусном типировании последовательностей из данных WGS. 49 изолятов принадлежали к 12 различным типам последовательностей (ST) с преобладанием ST15 (13 изолятов) и ST88 (11 изолятов).Остальные принадлежали к ST1 (один изолят), ST5 (шесть изолятов), ST6 (один изолят), ST72 (два изолята), ST121 (два изолята), ST152 (три изолята), ST395 (один изолят), ST707 (один изолят). ), ST2434 (один изолят) и ST3248 (три изолята) (см. дополнительный материал, данные S1). Четыре изолята представляли собой новые ST. Все 11 изолятов ST88 были MRSA и будут описаны в другом месте (Kpeli et ​​al. , рукопись готовится).

Чтение картирования 49 геномов относительно эталонной последовательности Sa_aus0325 дало 2.Основной геном размером 2 Мб с 100 361 SNP. Филогения максимального правдоподобия была выведена из попарных сравнений этих SNP (1). Среди 13 изолятов ST15 десять были выделены в одном медицинском центре, в том числе из рук медработников, пациентов и оборудования, что соответствует результатам типирования spa и подтверждает вывод о том, что в этом медицинском центре происходили случаи передачи инфекции. Три изолята от пациента А были одного и того же типа ST (ST3248), и между ними были различия SNP в 29 п.н., 51 п.н. и 34 п.н. (см. Дополнительный материал, данные S2), что также соответствовало результатам типирования spa , обсуждавшимся выше.Это небольшое количество различий SNP указывает на распространение изолятов из общего источника.

Полногеномная филогения секвенированных изолятов. Филогения максимального правдоподобия полногеномных изолятов. Дерево было укоренено посередине. Числа в узлах указывают значения поддержки в виде долей псевдорепликатов начальной загрузки. Ветки со значениями поддержки >55% свернуты. Штаммы зеленого цвета получены из Медицинского центра А, а синие — из Медицинского центра В. Красные кружки представляют собой изоляты от пациента А, желтые кружки представляют собой штаммы, устойчивые к метициллину Staphylococcus aureus , а фиолетовые кружки показывают изоляты из медицинский работник, пациенты и оборудование в поликлинике B.

Затем мы определили резистом каждого изолята по данным WGS (см. Материалы и методы). Гены устойчивости к антибиотикам, кодирующие устойчивость к β-лактамам ( blaZ ), хлорамфениколу ( cat и catpC221 ), триметоприму ( dfrG ), метициллину ( mecA ), нортомии (), хинолону str ) и тетрациклин ( tetK , tetL и tetM ), были идентифицированы у 48 (98%), 1 (2%), 22 (45%), 13 (25.5%), 13 (25,5%), 49 (100%), 12 (24,5%), восемь (16,3%), 12 (24,5%) и 12 (24,5%) из 49 изолятов соответственно (см. Дополнительный материал, Данные S1). Далее мы исследовали ген rpoB штаммов, устойчивых к рифампицину, и выявили две известные аминокислотные замены h581N и I527M, связанные с устойчивостью к рифампицину, в семи и одном изоляте соответственно (см. Дополнительный материал, Данные S1). Другие мутации также были обнаружены в определяющей устойчивость к рифампицину области (Rif) устойчивых к рифампицину изолятов, но необходимы дальнейшие исследования, чтобы установить, способствуют ли эти мутации устойчивости к рифампицину.

Анализ топологий филогений, полученных с помощью типирования spa и WGS, показывает много совпадений, но также и некоторые различия (). Эти два метода прогнозировали кластеризацию изолятов MRSA от пациента А и изолятов из учреждения В от медработника, пациентов, одетых этим работником, и оборудования. Однако, хотя типирование spa предсказало кластеризацию изолята SA_NOG-W15, который является MRSA, с другими изолятами MRSA, этот кластер не был подтвержден WGS, который предсказал его кластеризацию с изолятом SA_NOG-W28, MSSA.

Танглограмма spa и полногеномные филогении. Танглограмма филогении spa (а) и полногеномного секвенирования (б), полученная в дендроскопе. Топологии показывают некоторое соответствие между филогениями, но полное отсутствие соответствия.

Обсуждение

Это исследование подтвердило, что инфекция, связанная с оказанием медицинской помощи (HAI), является источником раневой инфекции в наших медицинских центрах исследования. Наш анализ показывает, что типирование spa полезно для прогнозирования моделей передачи в условиях ограниченных ресурсов, но также существует потребность в доступе к недорогой микробной геномике в развивающихся странах.Анализ генома быстро выявил широко распространенную устойчивость к антибиотикам среди изолятов и четко определил вероятные кластеры передачи.

В предыдущей работе [6] мы обнаружили, что раневая инфекция может быть причиной задержки заживления. Результаты нашего текущего исследования указывают на то, что среда здравоохранения (включая медицинский персонал) является возможным источником инфекции S. aureus . Из нашего кластерного анализа с использованием типирования spa мы сделали вывод о трех режимах раневой инфекции; два источника, связанные с медицинским учреждением, через медработников и неживую среду (), и третий источник через самозаражение ().Этот результат соответствует результатам предыдущих исследований, в которых медработники, пациенты и неживая среда участвовали в передаче и последующем приобретении S. aureus в медицинских учреждениях [17]. Известно, что ВБИ негативно влияют на оказание медицинской помощи во всем мире. Эффективная практика профилактики инфекций и борьбы с ними, особенно соблюдение рекомендаций по гигиене рук, приведет к значительному снижению частоты ИСМП. В Гане есть программный документ, помогающий обучению медработников профилактике инфекций и борьбе с ними (www.ghanahealthservice.org/division-scat.php?ghsdid=6&ghsscid=96). Тем не менее, мониторинговое обследование в отдельных медицинских учреждениях в районе Большой Аккры показало, что уровень соответствия медицинских работников этим рекомендациям является низким (Служба здравоохранения Ганы, 2011 г., . Профилактика и контроль инфекций. 70%, рекомендованные ВОЗ. Соблюдение строгих правил, подкрепленное периодическим обучением и мониторингом медработников, необходимо для обеспечения соблюдения существующих рекомендаций по профилактике и контролю инфекций и для снижения частоты ИСМП.

Что касается кластеров для конкретных пациентов, Yeboah-Manu et al. [6] сообщили, что некоторые пациенты перерабатывают повязки, использованные для перевязки ран, из-за неадекватной финансовой поддержки в период их лечения, и это может привести к переносу возбудителей из одного очага в другой. Кроме того, лечение ран в Гане в значительной степени зависит от местных традиционных верований и обычаев. Убеждения, вращающиеся вокруг категории людей, которые считаются квалифицированными для лечения ран, влияют на поведение пациентов.Недавнее исследование, проведенное нашей группой (рукопись Koka et al. в процессе подготовки), сообщает, что во многих сообществах беременные женщины и кормящие матери считаются неквалифицированными для лечения ран, и в случаях, когда медработники попадают в эту категорию, пациенты прибегают к — перевязка их ран после того, как их перевязал медработник. Это также может привести к переносу патогенных организмов в очаги поражения, так как пациенты не соблюдают надлежащие асептические процедуры при перевязке раны. Следовательно, необходимо консультировать пациентов, чтобы они придерживались биомедицинских методов ухода за раной и лечения, чтобы уменьшить или избежать самоинфицирования их поражений.

Это исследование было ограничено отсутствием тщательного исследования других участков тела пациентов, где известно, что S. aureus присутствует в качестве нормальной флоры. Исчерпывающее исследование должно было включать посев образцов из других участков тела пациентов, таких как кожа, руки и носовые ходы, для сравнения штаммов из этих участков и из ран. На исследование также мог повлиять эффект Хоторна на объекте А, и это могло объяснить отсутствие S.aureus изолируется при отборе проб окружающей среды и медработников в этом учреждении.

Два метода были использованы, чтобы прийти к нашему заключению HAIs; типирование маркера spa на основе последовательности ДНК локуса одного гена и WGS. Как показал наш анализ, филогении обоих методов предсказывали сходные кластеры. В то время как WGS выявляет изменчивость во всем геноме и способен различать различия вплоть до отдельных нуклеотидов, типирование spa рассматривает генетическую изменчивость в одном локусе длиной от 200 до 600 п.н.Набор текста Spa менее затратен и требователен с точки зрения инфраструктуры и опыта, а также требует более короткого времени выполнения работ по сравнению с WGS. Наши результаты показывают, что уровень различения типирования spa достаточен для руководства инфекционным контролем, а также поддерживает его использование в эпидемиологических исследованиях. Однако несоответствие между этими двумя методами, вероятно, указывает на то, что спа-типирование не позволяет дифференцировать высокогенетически родственные изоляты.Этот метод частичного секвенирования также не может выявить более тонкие генетические детали, которые накапливаются в ходе эволюции бактериальных популяций. Поэтому, хотя типирование spa полезно для прогнозирования событий передачи в условиях ограниченных ресурсов, где доступ к более новым, более дорогим и более совершенным технологиям WGS ограничен, мы должны искать способы реализации недорогой микробной геномики. в этих странах, потому что обширные данные, полученные из геномов патогенов, могут быть использованы для принятия хорошо обоснованных решений по борьбе с распространением болезни.

Другим важным результатом этого исследования является высокое генетическое разнообразие и PVL-позитивность изолятов. Это согласуется с существующими знаниями о генетическом разнообразии и распространенности PVL среди африканских изолятов S. aureus [18], [19], [20]. Это также подтверждает утверждение о том, что Африка является эндемичным по PVL континентом с высокой распространенностью PVL, которая является отличительной чертой африканских изолятов S. aureus [19] по сравнению с Азией, Европой и США [21]. Кроме того, мы определили t355 как один из наиболее распространенных типов spa .Это коррелирует с исследованиями в Гане и других африканских странах, которые идентифицировали этот тип spa как один из наиболее распространенных, что позволяет предположить, что он широко распространен в Африке [18], [22], [23]. Известно, что

Клинические изоляты S. aureus являются agr положительными [24], и об этом также свидетельствуют наши результаты с 79 (78,2%) изолятами, имеющими этот локус. Однако 22 (21,8%) изолята были дефектными по функции agr . Предыдущие исследования показывают, что agr -дефектные мутанты могут взаимодействовать с agr -позитивными вариантами во время клинической инфекции [24].Эти agr -дефектные мутанты играют важную роль в персистирующей инфекции, образуя более толстые биопленки по сравнению с agr -положительными изолятами [25]. Это явление может играть роль в замедленном заживлении ран, которое мы наблюдали у пациентов в наших медицинских центрах исследования [6].

Показатели резистентности к антибиотикам как по результатам фенотипических исследований, так и исследований резистома подтверждают растущую распространенность лекарственной устойчивости в Гане [26]. Тридцать один изолят (30,7%) были подтверждены как MRSA.Эти данные согласуются с общепризнанным фактом, что в Африке распространенность MRSA находится на среднем уровне, обычно от 25% до 50% [27]. Из 31 изолята семь показали чувствительные фенотипы, хотя ген mecA был обнаружен в молекулярном анализе. Фенотипически восприимчивые mecA -положительные клоны были зарегистрированы различными исследовательскими группами [28], [29]. Фенотип MRSA регулируется двумя генами mecI-mecR1. Однако индукция экспрессии MRSA с помощью этой системы происходит очень медленно и может сделать некоторые изоляты с геном mecA фенотипически восприимчивыми.Существование таких штаммов представляет собой скрытый резервуар для передачи гена устойчивости к метициллину в любой среде. Во многих странах с ограниченными ресурсами клиницисты в основном полагаются на результаты посевов и тестов на чувствительность к лекарственным средствам, чтобы направлять лечение пациентов, и большинство лабораторий также не оборудованы для молекулярного тестирования организмов. Поскольку эти клоны могут быть обнаружены только с помощью молекулярного анализа, о них будет сообщено как о восприимчивых организмах, что приведет к неэффективности лечения.

Не меньшее беспокойство вызывает наблюдаемая высокая устойчивость к ванкомицину, составляющая 26%, что сравнимо с показателями устойчивости к ванкомицину от 57,7% [30] до 89% [31], о которых сообщалось в других исследованиях, проведенных в Западной Африке.

Заключение

Наши результаты показывают, что внутрибольничная передача инфекции способствует инфицированию раны, и требуют периодического обучения методам профилактики и борьбы с инфекциями для предотвращения возникновения эпидемий внутрибольничного MRSA.

Благодарности

Мы благодарны следующим сотрудникам и медицинским центрам за их участие в исследовании: д-р Альберт Пейнцил, Учебная больница Корле-Бу; Г-н Лэмпти, Медицинский центр Обом, Обом и медсестры отделения Бурули, Муниципальная больница Га-Вест, Амасаман.

Декларация о прозрачности

У авторов нет конфликтов интересов, о которых следует заявить.

Работа выполнена при поддержке инициативы Stop Buruli фонда UBS Optimus и фонда Volkswagen. Спонсоры не участвовали в разработке исследования, сборе и интерпретации данных или в принятии решения о представлении работы для публикации. Часть этой работы была представлена ​​на Европейском конгрессе по тропическому и медицинскому здоровью (ECTMIH) 2015 г. в Базеле, Швейцария, с 6 по 10 сентября 2015 г., а тезисы впоследствии были опубликованы в журнале Tropical Medicine and International Health 20:68, сентябрь 2015 г.; Ганская биомедицинская конвенция (GBC) 2015 г. Университет Ганы, Легон с 29 по 31 июля 2015 г. и 26-й Европейский конгресс по клинической микробиологии и инфекционным заболеваниям (ECCMID), ежегодный ежегодный конгресс Европейского общества клинической микробиологии и инфекционных заболеваний ( ESCMID) в Амстердаме с 9 по 12 апреля 2016 года.

Приложение A. Вспомогательная информация

К этой статье доступны следующие дополнительные материалы:

Данные S1 . Идентифицированы гены устойчивости к антибиотикам

Данные S2 . Основные расстояния SNP

Рис. S1 . Блок-схема дизайна исследования

Таблица S1 . Последовательности праймеров

Таблица S2 . Spa виды выделенных Staphylococcus aureus штаммы

Литература

1.Робсон М.К. Заражение раны. Нарушение заживления ран, вызванное дисбалансом бактерий. Surg Clin North Am. 1997; 77: 637–650. [PubMed] [Google Scholar]2. Боулер П. Г., Дэвис Б. Дж. Микробиология острых и хронических ран. Раны. 1999; 11:72–79. [Google Академия]3. Боулер П.Г., Дюрден Б.И., Армстронг Д.Г. Микробиология ран и связанные с ней подходы к лечению ран. Clin Microbiol Rev. 2001; 14:244–269. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]4. Брук И., Рэндольф Дж.Г. Аэробная и анаэробная бактериальная флора ожогов у детей.Дж. Травма. 1981; 21: 313–318. [PubMed] [Google Scholar]5. Клютманс Дж., Ван Белкум А., Вербру Х. Назальное носительство Staphylococcus aureus : эпидемиология, основные механизмы и связанные риски. Clin Microbiol Rev. 1997; 10:505–520. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]6. Yeboah-Manu D., Kpeli G.S., Ruf MT., Asan-Ampah K., Quenin-Fosu K., Owusu-Mireku E. Вторичные бактериальные инфекции поражений язвы бурули до и после химиотерапии стрептомицином и рифампицином. PLoS Negl Trop Dis.2013;7:e2191. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]7. Клинические, Лабораторные, Стандарты, Институт. КЛСИ; Уэйн, Пенсильвания, США: 2014 г. Стандарты эффективности тестирования чувствительности к противомикробным препаратам: Двадцать четвертое информационное приложение M100–S24. [Google Академия]8. Ruppitsch W., Indra A., Stoger A., ​​Mayer B., Stadlbauer S., Wewalka G. Классификация спа-типов в комплексах улучшает интерпретацию результатов типирования метициллин-резистентного Staphylococcus aureus . J Clin Microbiol. 2006; 44: 2442–2448.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]9. Вотинцева А.А., Фунг Р., Миллер Р.Р., Нокс К., Годвин Х., Уилли Д.Х. Распространенность мутантов белка A Staphylococcus aureus ( spa ) в обществе и больницах Оксфордшира. БМС микробиол. 2014;14:63. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]10. AL-T F., Brunel A.S., Bouzinbi N., Corne P., Banuls A.L., Shahbazkia HR. DNAGear — бесплатное программное обеспечение для определения типа курорта в Staphylococcus aureus . Примечания BMC Res.2012;5:642. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]11. Стаден Р., Бил К.Ф., Бонфилд Дж.К. Пакет Staden, 1998. Methods Mol Biol. 2000; 132:115–130. [PubMed] [Google Scholar] 12. Оливейра Д.К., де Ленкастр Х. Стратегия мультиплексной ПЦР для быстрой идентификации структурных типов и вариантов элемента mec в метициллин-резистентном Staphylococcus aureus . Противомикробные агенты Chemother. 2002;46:2155–2161. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]13. Деуренберг Р.Х., Винк С., Дриссен С., Бес М., Лондон Н., Этьен Дж. Быстрое обнаружение лейкоцидина Пантона-Валентина из клинических изолятов штаммов Staphylococcus aureus с помощью ПЦР в реальном времени. FEMS Microbiol Lett. 2004; 240:225–228. [PubMed] [Google Scholar] 14. Шопин Б., Матема Б., Алкабес П., Саид-Салим Б., Лина Г., Мацука А. Преобладание групп специфичности agr среди штаммов Staphylococcus aureus , колонизирующих детей и их опекунов. J Clin Microbiol. 2003; 41: 456–459. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]15.Прайс М.Н., Дехал П.С., Аркин А.П. FastTree 2 – деревья приближенного максимального правдоподобия для больших выравниваний. ПЛОС Один. 2010;5:e9490. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]16. Хьюсон Д.Х., Скорнавакка С. Дендроскоп 3: интерактивный инструмент для укорененных филогенетических деревьев и сетей. Сист биол. 2012;61:1061–1067. [PubMed] [Google Scholar] 17. Гастмайер П., Зор Д., Гефферс К., Бенке М., Дашнер Ф., Руден Х. Факторы риска смертности при внутрибольничных инфекциях Staphylococcus aureus в отделениях интенсивной терапии: результаты Немецкой системы наблюдения за внутрибольничными инфекциями (KISS) .2005; 33: 50–55. [PubMed] [Google Scholar] 18. Эгир Б., Гуардабаси Л., Сорум М., Нильсен С.С., Колеканг ​​А., Фримпонг Э. Молекулярная эпидемиология и чувствительность к противомикробным препаратам клинического Staphylococcus aureus из медицинских учреждений Ганы. ПЛОС Один. 2014;9:e89716. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]19. Бреурек С., Фолл К., Пуйо Р., Буазье П., Брис С., Диен-Сарр Ф. Эпидемиология чувствительных к метициллину линий Staphylococcus aureus в пяти крупных африканских городах: высокая распространенность генов лейкоцидина Пантона-Валентина.Клин Микробиол Инфект. 2011; 17: 633–639. [PubMed] [Google Scholar] 20. Шаумбург Ф., Кок Р., Фридрих А.В., Сулануджингар С., Нгоа Ю.А., фон Эйфф К. Структура популяции Staphylococcus aureus из отдаленных африканских пигмеев бабонго. PLoS Negl Trop Dis. 2011;5:e1150. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]21. фон Эйфф К., Фридрих А.В., Петерс Г., Беккер К. Распространенность генов, кодирующих членов семейства стафилококковых лейкотоксинов, среди клинических изолятов Staphylococcus aureus .Диагностика Microbiol Infect Dis. 2004; 49: 157–162. [PubMed] [Google Scholar] 22. Эгир Б., Гуардабаси Л., Эссон Дж., Нильсен С.С., Ньюман М.Дж., Аддо К.К. Информация о назальном носительстве Staphylococcus aureus в городском и сельском сообществе в Гане. ПЛОС Один. 2014;9:e96119. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]23. Шаумбург Ф., Нгоа У.А., Костерс К., Кок Р., Адегника А.А., Кремснер П.Г. Факторы вирулентности и генотипы Staphylococcus aureus от инфекции и носительства в Габоне.Клин Микробиол Инфект. 2011;17:1507–1513. [PubMed] [Google Scholar] 24. Traber K.E., Lee E., Benson S., Corrigan R., Cantera M., Shopsin B. Функция agr в клинических изолятах Staphylococcus aureus . Микробиология. 2008; 154: 2265–2274. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]25. Kong K.F., Vuong C., Otto M. Определение кворума Staphylococcus при формировании биопленки и инфицировании. Int J Med Microbiol. 2006; 296: 133–139. [PubMed] [Google Scholar] 26. Ньюман М.Дж., Фримпонг Э., Донкор Э.С., Опинтан Дж.А., Асамоа-Аду А. Резистентность к противомикробным препаратам в Гане. Заразить устойчивостью к наркотикам. 2011;4:215–220. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]27. Стефани С., Чанг Д.Р., Линдси Дж.А., Фридрих А.В., Кернс А.М., Вест Х. Метициллин-резистентный Staphylococcus aureus (MRSA): глобальная эпидемиология и гармонизация методов типирования. Противомикробные агенты Int J. 2012; 39: 273–282. [PubMed] [Google Scholar] 28. Петинаки Э., Контос Ф., Маниатис А.Н. Появление двух оксациллин-чувствительных mecA-положительных клонов Staphylococcus aureus в греческой больнице.J Антимикробная химиотерапия. 2002; 50:1090–1091. [PubMed] [Google Scholar] 29. Cuirolo A., Canigia L.F., Gardella N., Fernandez S., Gutkind G., Rosato A. Оксациллин- и цефокситин-чувствительный метициллин-резистентный Staphylococcus aureus (MRSA) Int J Antimicrob Agents. 2011; 37: 178–179. [PubMed] [Google Scholar] 30. Олаинка Б.О., Олаинка А.Т., Онаолапо Ж.А., Олуринола П.Ф. Характер резистентности к ванкомицину и другим противомикробным препаратам у стафилококковых изолятов в университетской клинической больнице.Afr Clin Exp Microbiol. 2005; 6: 46–52. [Google Академия] 31. Онануга А., Ойи А.Р., Оноалапо Дж.А. Характер распространенности и восприимчивости устойчивых к метициллину штаммов Staphylococcus aureus среди здоровых женщин в Зарии, Нигерия. Afr J Биотехнология. 2005;4:1321–1324. [Google Scholar]

Возможная связанная с оказанием медицинской помощи передача как причина вторичной инфекции и структура популяции изолятов Staphylococcus aureus из двух центров лечения ран в Гане

https://doi.org/10.1016/j.nmni.2016.07.001Получить права и содержание

Abstract

Ранее мы показали, что вторичное инфицирование язвы Бурули часто вызывается Staphylococcus aureus. Чтобы понять возможные пути вторичной инфекции, мы охарактеризовали изолята S. aureus из поражений пациентов и окружающей среды в двух медицинских центрах Ганы. Сто один изолята S. aureus был выделен из ран ( n  = 93, 92.1%) и больничной среде ( n  = 8, 7,9%) и характеризуется геном spa , mecA и лейкоцидиновым токсином Пантона-Валентина с последующим секвенированием spa и полногеномным секвенированием подмножества 49 изолятов. Типирование Spa и секвенирование гена spa из 91 изолята выявило 29 различных типов spa с преобладанием t355 (ST152), t186 (ST88) и t346. Несмотря на то, что в обоих медицинских центрах было выделено много различных штаммов, кластеризация генотипов была выявлена ​​внутри центров.Кроме того, мы определили кластер, состоящий из изолятов от медицинского работника, пациентов, перевязанных в тот же день, и щипцов, использованных для перевязки, что указывает на возможную передачу инфекции, связанную с оказанием медицинской помощи. Эти кластеры были подтверждены филогеномным анализом. Двадцать четыре (22,8%) изолята были идентифицированы как метициллин-резистентные. гена S. aureus и lukFS , кодирующие лейкоцидин Пантона-Валентайна, были идентифицированы в 67 (63,8%) изолятах. Скрининг фенотипа показал широко распространенную устойчивость к тетрациклину, эритромицину, рифампицину, амикацину и стрептомицину.Геномика подтвердила широко распространенное присутствие генов устойчивости к антибиотикам к бета-лактамам, хлорамфениколу, триметоприму, хинолонам, стрептомицину и тетрациклину. Наши результаты показывают, что среда здравоохранения, вероятно, способствует суперинфекции ран язвы Бурули, и требует улучшения обучения методам лечения ран и инфекционного контроля.

Ключевые слова

Buruli Zeracter

Buruli Ascrement

Инфекция здравоохранения

инфекция

SPA, набрав

SPA SPA

Staphylococcus Aureus

целый генома секвенирование

Рекомендуемое соревнование Статьи (0)

© 2016 Автор (ы).Опубликовано Elsevier Ltd от имени Европейского общества клинической микробиологии и инфекционных заболеваний.

Рекомендуемые статьи

Ссылки на статьи

Потенциальный источник противомикробных веществ против устойчивых к антибиотикам бактерий

680 Mem Inst Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, Vol. 104(5), август 2009 г.

Имипенем (10 мкг), меропенем (10 мкг), пиперациллин/тазо-

бактам (110 мкг), триметоприм/сульфаметоксазол (1,25-

23.75 мкг) и тетрациклин (30 мкг). Диаметры

зон ингибирования интерпретировали в соответствии с рекомендациями CLSI

(2003 г.) после роста при комнатной температуре в течение времени инкубации, специфичного для каждого штамма.

Штамм Mm3 был идентифицирован с использованием системы Vitek au-

с картой GNI (bioMérieux Vitek

Inc — Hazelwood, Mo, USA), API 20NE (bioMéuriex)

и обычных биохимических тестов (Blondel-Hill et др.

2007): производство пигмента, окисление глюкозы, активность аргинина

дигидролазы и лизиндекарбоксилазы, рост

при 42ºC, подвижность, тест на продукцию желатиназы, восстановление нитрата и образование кислоты из ксилозы. Продуцирование бета-лактамазы металло-

также исследовали для этого штамма

с помощью теста аппроксимации диска с использованием 2-меркапто-

пропионовой кислоты в качестве ингибитора, как описано ранее (Ara-

kawa et al.2000).

Штаммы, проявляющие противомикробную активность, были отобраны для молекулярной идентификации с помощью частичного секвенирования 16S рРНК

. Тотальную ДНК экстрагировали из стационарных

фазовых культур с использованием стандартных процедур фенол-хлороформной экстракции (Sambrook et al. 2001). ПЦР-амплификацию

проводили с универсальными праймерами (f:

5’-GATTAGATACCCTGGTAGTCCAC-3’ и r: 5’-

CCCGGGAACGTATTCACCG-3’), специфичными для гена рРНК 16S

(Siqueira et al.2002). Реакцию проводили в общем объеме 50 мкл, содержащем 100 нг ДНК

, 4 мМ MgCl2, 1 x буфер для ПЦР (ДНК-полимераза Ultratools

, Biotools — Мадрид, Испания), 2,5 мМ

.

каждого дезоксирибонуклеотидтрифосфата, 1,5 ЕД полимеразы Taq

(ДНК-полимераза Ultratools, Biotools) и

40 пмоль каждого праймера. Условия цикла: начальная денатурация

(2 мин при 95°С), затем 36 циклов денатурации

(30 с при 95°С), отжиг праймера (1 мин при

60°С) и удлинение праймера (1 мин при 72°С). ) и заключительный этап удлинения праймера

(2 мин при 72ºC).Амплификацию

проводили на программируемом термоконтроллере

(PTC-100TM, MJ Research, США).

Ампликоны анализировали в 1% (масса/объем) агарозных гелях.

Гели окрашивали в водном растворе, содержащем

бромид этидия (0,5 мг/мл), и визуализировали на трансиллюминаторе

УФ. Ампликоны очищали с использованием набора для очистки

QIAquick (QIAGEN, Inc. — Валенсия, Калифорния,

США) и секвенировали.Секвенирование проводили на генетическом анализаторе ABI PRISM 310 Genetic Analyzer

(Perkin-Elmer Applied Biosystems

, Фостер-Сити, США) с использованием универсальных праймеров

(описанных для ПЦР-амплификации) и Big

Dye Terminator Cycle Sequencing. Готовый реакционный набор

(Perkin Elmer Applied Biosystems).

Полученные частичные последовательности гена 16S рРНК были

выровнены с использованием программного обеспечения ABI Prism (Perkin Elmer Ap-

plied Biosystems) и сопоставлены с последовательностями, извлеченными

с помощью запросов, сгенерированных BLAST табазы ​​GenBank Da-

.Филогенетический анализ проводили с помощью программы

MEGA 4.0 (Molecular Evolutionary Genetics

Analysis, Version 4.0) (Tamura et al. 2007). Топологии деревьев

оценивались с помощью бутстреп-анализа, основанного на

на 1000 повторений (Felsenstein 1985), и филогенетические деревья

были выведены с использованием метода соседнего соединения

(Saitou & Nei 1987). Типирование RAPD-PCR проводили

с праймером 272 (Mahenthiralingam et al.1996) для штамма

Mm3 и четырех клинических штаммов Pseudomonas использовали

в качестве группы сравнения. Тотальную ДНК получали из

культур в стационарной фазе путем лизиса кипячением. ПЦР проводили в общем объеме 25 мкл, содержащем 1,5 мМ

MgCl2, 1 х ПЦР-реакционный буфер, 2,5 мМ каждого де-

оксирибонуклеотидтрифосфата, 1 ЕД Taq-полимеразы

и 2,5 пмоль. праймера и 3 мкл ДНК (Pellegrino et

al.2006). ПЦР-отпечатки пальцев анализировали в 1,5% (масса/объем)

агарозном геле, окрашивали бромистым этидием, визуализировали

на УФ трансиллюминаторе и фотографировали. Образцы полос

были интерпретированы путем визуального осмотра и

с использованием программы GelCompar II версии 4.01 (Applied

Maths — Kortrijk, Бельгия) с использованием индекса Дайса

и метода невзвешенных парных групп с арифметическими средними значениями

(UPGMA). ).Плазмидную ДНК Mm3 экстрагировали

с помощью щелочного лизиса (Giambiagi-deMarval et al. 1990) и

анализировали в 1% (мас./об.) агарозных гелях. Размер плазмиды определяли путем сравнения со стандартами плазмид штаммов E.

coli V517 (NCTC 50193) и E. coli 39R861 (NCTC

50192).

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Накапливающиеся данные показали, что бактерии, связанные с губками, представляют собой реальное происхождение многих антимикробных веществ, представляющих интерес (Faulkner et al.2000).

Поэтому мы провели скрининг гомогенизатов губок M.

microsigmatosa, P. citrina и P. janeirensis. Всего было выделено 32 штамма бактерий

: 10 на BHI-агаре, 11 на

Marine-агаре и 11 на Marine/морском агаре. Три

условия культивирования не показали существенных различий

в отношении количества восстановленных штаммов, морфологии или размера колоний. Все 32 штамма были исследованы на антимикробную активность в отношении индикаторных бактерий.Семь штаммов

, выделенных на BHI-агаре, ингибировали как минимум один индикаторный штамм

(таблица). Антимикробной активности не наблюдалось

у изолятов, культивируемых на морском агаре и морском/

морском агаре. Эти данные свидетельствуют о том, что питательная среда может влиять на выработку противомикробных веществ,

, как сообщает Nascimento et al. (2004). Интересно, что

семь штаммов проявляли только антимикробную активность

при выращивании при комнатной температуре, в то время как при 37oC антимикробная активность не обнаруживалась.Это говорит о том, что температура может также

влиять на способность бактерий производить противомикробные вещества. Эти штаммы могут играть роль в динамике микробного сообщества внешней микрофлоры губок M. microsigmatosa, P. citrina и P. janei-

rensis, ограничивая их плотность. Один из этих штаммов

, полученный из губки M. microsigmatosa

и обозначенный как Mm3, проявлял широкий спектр антимикробной активности

по сравнению с эталонными и лекарственно-устойчивыми клиническими штаммами

(таблица).Когда семь морских штаммов были протестированы на перекрестное ингибирование, только Mm3 ингибировал все остальные штаммы

, кроме самого себя (таблица). Этот результат позволяет предположить, что

противомикробное вещество, продуцируемое штаммом Mm3

, может относиться к другому классу, чем противомикробные вещества, синтезируемые другими проанализированными морскими штаммами.

Мы проанализировали влияние протеолитических ферментов и 0,2

N NaOH на противомикробное вещество, продуцируемое штаммом

Mm3.Эти результаты показали, что анти-

(PDF) Сравнение уровней выделения и характеристик сальмонелл, выделенных из образцов куриного мяса, не содержащих антибиотиков, и из обычных образцов куриного мяса

ХАРАКТЕРИСТИКА САЛЬМОНЕЛЛ ИЗ КУРИНОГО МЯСА с ослабленным иммунитетом

взрослых. Дж. Заразить. 56:413–422.

Гордон, М. А., Х. Т. Банда, М. Гондве, С. Б. Гордон, М. Дж.

Бори, А. Л. Уолш, Дж. Э.Corkill, C.A. Hart, CF Gilks ​​и

ME Molyneux. 2002. Небрюшнотифозная бактериемия Salmonella

среди ВИЧ-инфицированных взрослых малавийцев: высокая смертность и частые рецидивы. СПИД. 16: 1633–1641.

Greene, CR 2001. Органическое сельское хозяйство в США появляется в 1990-х годах:

Принятие сертифицированных систем. Министерство сельского хозяйства США,

Вашингтон, округ Колумбия

Hawkey, PM 2008. Распространенность и клональность

β-лактамаз расширенного спектра в Азии.клин. микробиол. Заразить. 14:159–165.

Heyndrickx, M. et al. 2002. Пути заражения сальмонеллой мяса птицы

: эпидемиологическое исследование от инкубатория до бойни-

птичника. Эпидемиол. Заразить. 129: 253–265.

Хьюгас М. и П. А. Белойл. 2014. Борьба с сальмонеллой по

пищевой цепи в Европейском союзе – прогресс за последние

десять лет. Евронаблюдение. 19.

Хён, Дж.-Ю., Дж.-В. Чон, И.-Г. Хван, Х.-С.Квак, М.-С. Ким С.-

К. Ким И.-С. Чой, К.-С. Сонг, К. Парк и К.-Х. Со. 2011.

Распространенность, устойчивость к антибиотикам и молекулярная характеристика

сероваров сальмонелл в розничных мясных продуктах. Дж. Пищевая защита.

74:161–166.

Кан М.-С., Ю.-К. Квон, Дж.-Ю. О, М.-Ж. Ким, Д. Р. Колл, Б.-

К. Ан, Э.-Г. Шин, Э.-А. Сонг и Ж.-Х. Квон. 2013. Доказательства

недавнего приобретения и успешной передачи blaCTX-M -15

в Salmonella enterica в Южной Корее.Антимикроб. Агенты

Чемотер. 57:2383–2387.

Ким, Х. С., Дж. В. Чон, Ю. Дж. Ким, Д. Х. Ким, М. С. Ким и

К. Х. Сео. 2015. Распространенность и характеристика Escherichia coli и Klebsiella

pneumoniae, продуцирующих расширенный спектр β-лактамаз

, в готовых к употреблению овощах. Междунар. Дж. Пищевая микробиология.

207:83–86.

Ким, Дж. С., Ю.-С. Юн, С.Дж. Ким, С.-Э. Чон, Д.-Ю. Ли, Г. Т. Чанг,

К.-К. Ю и Дж. Ким.2016. Быстрое появление и клональное распространение

посева продуцирующей CTX-M-15 Salmonella enterica серотипа

Вирхов, Южная Корея. Эмердж. Заразить. Дис. 22:68–70.

Кола, А., К. Колер, Ю. Пфайфер, Ф. Шваб, К. Кун, К. Шульц,

В. Балау, К. Брайтбах, А. Баст, В. Витте, П. Гастмайер , и

И. Штейнмец. 2012. Высокая распространенность

продуцирующих лактамазу энтеробактерий в органическом и обычном розничном курином мясе, Германия.Дж. Антимикроб. Чемотер.

67:2631–2634.

Ли, К., Д. Йонг, Дж. Х. Юм, Х. Х. Ким и Ю. Чонг. 2003.

Разнообразие TEM-52, продуцирующих бета-лактамазы расширенного спектра

небрюшнотифозных изолятов Salmonella в Корее. Дж. Антимикроб.

Химия. 52:493–496.

Лестари С.И., Ф. Хан, Ф. Ван и Б. Ге. 2009. Распространенность и устойчивость к противомикробным препаратам

сероваров сальмонелл у обычных

и органических цыплят из розничных магазинов Луизианы.Дж. Пищевая защита.

72:1165–1172.

Li, Y., X.Xie, X.Xu, X.Wang, H.Chang, C.Wang,

A.Wang, Y.He, H.Yu, X.Wang и M.Zeng.2014 .

Нетифоидная сальмонеллезная инфекция у детей с острым

гастроэнтеритом: распространенность, серотипы и устойчивость к противомикробным препаратам

в Шанхае, Китай. Патог пищевого происхождения. Дис. 11:

200–206.

Лим, Дж.-С., Д.-С. Чой, Ю.-Ж. Ким, Дж.-В. Чон, Х.-С. Ким, Х.-Дж. Парк,

Ж.-С. Мун, С.-Х. Ви и К.-ЧАС. Со. 2015. Характеристика

Escherichia coli, продуцирующей β-лактамазу расширенного спектра

(БЛРС), выделенную на бойнях кур в Южной Корее.

Патоген пищевого происхождения. Дис. 12: 741–748.

Liu, W.B., B. Liu, X.N. Zhu, S.J. Yu и X.M. Shi. 2011. Разнообразие

изолятов Salmonella с использованием серотипирования и мультилокусного типирования последовательности

. Пищевой микробиол. 28:1182–1189.

Махруки С., О. Белхадж, Х. Чихи, Б. М. Мохамед, Г.Celenza,

Г. Амикосанте и М. Перилли. 2012. Хромосомный blaCTX-M -15

, связанный с ISEcp1 у Proteus mirabilis и Morganella mor-

ganii, выделенных в военном госпитале Туниса, Тунис. Дж. Мед.

Микробиолог. 61:1286–1289.

Mollenkopf, D. F., J. K. Cenera, E. M. Bryant, C. A. King, I.

Kashoma, A. Kumar, J. A. Funk, G. Rajashekara, and T. E.

Wittum. 2014. Маркировка органических продуктов или продуктов, не содержащих антибиотиков,

не влияет на выделение кишечных патогенов и устойчивых к противомикробным препаратам Es-

cherichia coli из свежей розничной курятины.Патог пищевого происхождения. Дис.

11:920–929.

Национальная служба управления качеством сельскохозяйственной продукции.

2016. Статистика экологической сертификации. http://www.enviagro.go.

kr/portal/info/Info statistic cond.do (по состоянию на 4 августа 2016 г.).

O’Farrell, B., J.K. Haase, V. Velayudhan, R.A. Murphy и M.

Achtman. 2012. Преобразование микробного генотипирования: роботизированный конвейер

для генотипирования бактериальных штаммов. ПЛОС Один. 7:e48022.

Олсен, Дж.Э., Д.Дж.Браун, М.Мадсен и М.Бисгаард. 2003. Перекрестное заражение сальмонеллой

на бойне бройлеров линии

продемонстрировано с помощью эпидемиологических маркеров. Дж. Заявл. Микро-

биол. 94:826–835.

Overdevest, I., I. Willemsen, M. Rijnsburger, A. Eustace, L. Xu,

P. Hawkey, M. Heck, P. Savelkoul, C. Vandenbroucke-Grauls,

K. Van der Zwaluw , X. Huijsdens и J. Kluytmans. 2011.

Гены β-лактамаз расширенного спектра Escherichia coli в

курином мясе и людях, Нидерланды.Эмердж. Заразить. Дис.

17:1216–1222.

Парк, Х.М. и Д.Ю. Ли. 2011. Распространенность и характеристики

Salmonella spp. в Корее. Корейский национальный институт здравоохранения,

Чхунчхонбук-до, Республика Корея.

Патерсон Д. Л. и Р. А. Бономо. 2005. β-

лактамазы расширенного спектра действия: клиническое обновление. клин. микробиол. Откр. 18:657–686.

Pegues, D.A., M.E. Ohl, and S.I. Miller. 2006. Нетифозный

сальмонеллез.Троп. Заразить. Дис. 1: 241–254.

Пэн, М., С. Салахин, Дж. А. Альмарио, Б. Тесфайе, Р. Бьюкенен и

Д. Бисвас. 2016. Распространенность и устойчивость к антибиотикам сероваров

Salmonella в интегрированных растениеводческих и животноводческих хозяйствах и их

продуктов, продаваемых на местных рынках. Окружающая среда. микробиол. 18: 1654–1665.

Питу, Дж. Д. и К. Б. Лаупланд. 2008. Расширенный спектр β;-

Энтеробактерии, продуцирующие лактамазу:

Новые проблемы общественного здравоохранения.Ланцет Инфекция. Дис. 8: 159–166.

Пуарель Л., Дж. Декуссер и П. Нордманн. 2005. ISECp1B-опосредованная транспозиция

blaCTX-M-15 в Escherichia coli. Антимикроб.

Агенты Чемотер. 49:447–450.

Pouta,E., J.Heikkil¨a, S. Forsman-Hugg, M. Isoniemi, and J.Makel¨a

2010. Выбор потребителем мяса бройлеров: влияние страны происхождения

и методы производства. Качество еды. Предпочитать. 21: 539–546.

Прайс, Л. Б., Э. Джонсон, Р.Вейлес и Э. Силбергелд. 2005.

Резистентные к фторхинолонам

изоляты Campylobacter из обычных и не содержащих антибиотиков куриных продуктов. Окружающая среда. Здоровье Пер-

вид. 113: 557–560.

Pui, C.F., WC Wong, LC Chai, R. Tunung, P. Jeyaletchumi,

M.N.NoorHidayah, A.Ubong, M.G.Farinazleen, YKCcheah,

и R. Son. 2011. Сальмонелла: патоген пищевого происхождения. Междунар. Продукты питания

Рез. Дж. 18:465–473.

Расшарт, Г., К.Хоуф и Л. Де Зуттер. 2007. Влияние загрязнения линии убоя

на наличие сальмонелл на

тушках бройлеров. Дж. Заявл. микробиол. 103:333–341.

Rayamajhi, N. et al. 2008. Характеристика TEM-, SHV-

и AmpC-типа β-лактамаз из цефалоспоринрезистентных штаммов En-

terobacteriaceae, выделенных из свиней. Междунар. Дж. Пищевая микробиология.

124:183–187.

Солсбери, А. М., К. Броновски и П. Вигли. 2011. Salmonella Vir-

изоляты чау-чау от человека и птиц в Англии – Молекулярная характеристика и инфекция эпителиальных клеток и домашней птицы.

Дж. Заявл. микробиол. 111: 1505–1514.

Шейнберг Дж., С. Дорес и К. Н. Каттер. 2013. Микробиологическое сравнение

продуктов птицеводства, полученных на фермерских рынках

и в супермаркетах Пенсильвании. Дж. Пищевая безопасность. 33:259–264.

Смит, Д. Л., А. Д. Харрис, Дж. А. Джонсон, Э. К. Силбергелд и

Дж. Г. Моррис. 2002. Использование антибиотиков у животных оказывает раннее, но важное влияние на появление устойчивости к антибиотикам у человеческих

комменсальных бактерий.проц. Натл. акад. науч. США 99:

6434–6439.

Smith-Spangler, C., M.L. Brandeau, GE Hunter, JC Bavinger,

M. Pearson, P.J. Eschbach, V. Sundaram, H. Liu, P. Schirmer,

и C.

Написать ответ

Ваш адрес email не будет опубликован.