Рана виды: Ошибка выполнения

Содержание

виды ран, общие правила, алгоритм действий, осложнения

Какие существуют виды ранений

Ранением называют повреждение кожи, слизистых, иногда — глубоких тканей. Травма сопровождается кровотечением и болью разной силы. Боль обусловлена повреждением нервных окончаний и рецепторов. Интенсивность боли зависит от нескольких факторов:

  • числа пострадавших нервных окончаний;
  • чувствительности пострадавшего;
  • характера оружия.

Интенсивность кровотечения определяется количеством поврежденных сосудов. Наиболее сильно идет кровь при повреждении крупной артерии. Зияние определяет глубину, масштаб и уровень нарушения эластичных волокон, а также характер повреждения.

Грамотное оказание первой медицинской помощи при ранениях предотвратит опасные последствия, а в некоторых ситуациях — спасет жизнь. Чтобы не навредить раненому, следует немного разбираться в типах повреждений и способах оказания помощи до приезда медиков. В некоторых случаях от грамотного поведения окружающих зависит человеческая жизнь.

Классификация ранений учитывает характер повреждений. Различают следующие виды ранений:

Огнестрельное

В результате осколочного либо пулевого воздействия. Бывает сквозным (есть вход и выход в теле), слепым (пуля застряла в мягкой или костной ткани), касательным (лишь слегка задеты кожа и мягкие ткани).

Резаное

Повреждение острыми режущими предметами, такими как стекло или нож. Края у раны ровные, а зона поражения обычно небольшая. Кровотечение при открытом ранении сильное. Опасны резаные раны на шее и конечностях на участках пролегания крупных вен и артерий.

Колотое

Как результат проникновения в тело острого предмета (шила, иглы, штыка и пр.). Кожные покровы и слизистые повреждаются мало, но глубина поражения значительная. Опасность таких травм заключается в поражении внутренних органов и риске внутреннего кровотечения.

Рубленое

Следствие воздействия острого предмета с параллельным ушибом тканей. Опасная травма, поскольку глубокое проникновение ранящего предмета вызывает сильные разрушения.

Ушибленное

Возникает от удара тупым предметом. Основные характеристики ушибленных ран — широкий участок размозжения, кровоподтеки, неровные края.

Укушенное

Последствия контакта с животными. Раны характеризуются неправильной формой, заражаются слюной, поэтому сложно заживают.

Политравмы

Они же множественные, сочетанные. Предполагают наличие ряда повреждений, которые опасны для жизни.

Определив вид травмы, первую помощь при ранении оказывают в соответствии со специфическими правилами.

Правила оказания первой помощи пострадавшему при ранениях

Несмотря на то, что действия при ранениях разного типа отличаются, общая последовательность оказания первой помощи при ранении подразумевает следующий алгоритм действий:

  1. Осмотреть пострадавшего, визуально оценить его состояние.
  2. Вызвать бригаду неотложной помощи.
  3. Пока медики в пути, попытаться остановить кровотечение.
  4. По необходимости наложить повязку и придать телу пострадавшего безопасное положение с учетом характера травмы.
  5. Контролировать состояние раненого, пока не приедут врачи.

Пытаясь спасти кому-то жизнь, главное — не навредить еще больше. Поэтому нужно руководствоваться основными правилами оказания первой помощи при ранениях. Речь о том, что любые манипуляции следует проводить чистыми руками. Если нет мыла с водой, продезинфицировать их спиртосодержащими средствами или крепкими алкогольными напитками. Нельзя промывать рану ни лекарственными средствами, ни водой. Запрещено пользоваться спиртом и йодом, самостоятельно удалять инородное тело из раны, вдавливать выпавшие органы и ткани.

Первая помощь при ранениях головы

Любые ранения головы выглядят особенно устрашающе, поскольку сопровождаются обильным кровотечением из-за того, что в области головы кровеносные сосуды расположены очень близко к поверхности кожи.

Первая помощь при ранении головы состоит в наложении давящей повязки. Делается это в следующем порядке:

  1. Наложить на рану стерильную марлевую повязку, плотно зафиксировав ее.
  2. Края раны при необходимости максимально совместить руками, чтобы обеспечить необходимый давящий эффект.
  3. Пострадавшего уложить на спину таким образом, чтобы голова и плечи находились в приподнятом положении относительно туловища.

Первая помощь при проникающих ранениях грудной клетки

Проникающие ранения грудной клетки очень опасны из-за высокой вероятности повреждения плевральной полости. При подобных ранениях возможно попадание туда воздуха, вследствие чего легкое сжимается и перестает выполнять свои функции. У пострадавшего наблюдается частое затрудненное дыхание, пульс слабеет, возможна потеря сознания.

Для оказания первой помощи при ранении грудной клетки нужно первым делом усадить пострадавшего, наклонив корпус в сторону ранения, чтобы обеспечить нормальное функционирование неповрежденного легкого.

Затем нужно закрыть рану ладонью, если пострадавший в сознании, то он может сделать это сам. На рану следует наложить повязку, прикрыв ее воздухонепроницаемым материалом. Повязку нужно зафиксировать бинтом или пластырем и ждать прибытия бригады медиков.

Важно постоянно контролировать состояние пострадавшего, чтобы в случае необходимости своевременно провести реанимационные мероприятия.

Первая помощь при ранениях в область живота

Ранения в области живота чрезвычайно опасны, поскольку повреждения органов брюшной полости нередко сопровождаются внутренним кровотечением и перитонитом, которые могут привести к летальному исходу. Ни в коем случае нельзя давать пострадавшему какое-либо питье, ограничьтесь смачиванием губ водой. Также следует воздержаться от введения обезболивающих препаратов.

При ранениях в область живота в ране могут находиться посторонние предметы. В некоторых случаях подобные травмы могут сопровождаться выпадением внутренних органов. Инородный предмет ни в коем случае нельзя извлекать из раны. Наоборот, нужно его надежно зафиксировать, чтобы не спровоцировать лишние повреждения. После этого пострадавшего необходимо разместить в полусидячем положении, хорошенько укрыть одеялом и ждать прибытия медицинской помощи.

Выпавшие внутренние органы нужно собрать максимально близко и накрыть влажной марлей. Важно исключить риск их высыхания во избежание некроза и отмирания. К ране следует приложить холод.

Оказание первой медицинской помощи при ранениях области живота состоит в максимально быстрой остановке кровотечения:

  1. Рану очищают от крови и грязи.
  2. Кожу вокруг нее обрабатывают антисептическими средствами.
  3. Поверхность раны прикрывают стерильной повязкой, зафиксировав ее и приложив холод.

Первая помощь при ранениях глаза

Ранение глаза может быть тупым или проникающим. От вида повреждения зависит то, каким образом оказать первую помощь при ранении глаз. При тупой травме их нужно промыть чистой, желательно кипяченой водой и закапать 2–3 капли глазного противомикробного средства. Поврежденный глаз ни в коем случае нельзя тереть: это может привести к инфицированию.

Проникающие ранения глаз плохо поддаются лечению и могут привести к  серьезным осложнениям. Из глаза нельзя извлекать инородный предмет. Напротив, чтобы предотвратить дополнительные повреждения, нужно надежно зафиксировать его.

Затем на глаз следует наложить стерильную повязку, полностью покрывающую травмированную область. Таким образом, кровотечение уменьшится, а место повреждения будет защищено от инфицирования.

Кровотечения при ранении: первая помощь

Ранения чаще всего сопровождаются кровотечением. В зависимости от вида поврежденного сосуда различают венозное, артериальное, капиллярное кровотечение, а также кровотечение внутренних органов (паренхиматозное).

Венозное кровотечение сопровождается истечением крови темного цвета. При повреждении капилляров кровоточит вся поверхность раны. Такая травма выглядит весьма пугающе, особенно в случае обширной раны.

Первая медицинская помощь при ранениях и травмах, вызвавших обширное кровотечение, состоит в наложении стерильной салфетки и давящей повязки.

Наиболее серьезным считается кровотечение из артерии, поскольку за короткое время может произойти большая кровопотеря. Для него характерно истечение крови ярко-алого цвета. Кровь вытекает толчкообразно, с каждым ударом сердца.

Первая помощь при ранении артерии

Артериальное кровотечение очень опасно, поскольку может стать причиной летального исхода даже при условии оказания своевременной квалифицированной медицинской помощи.

Для оказания первой помощи при ранах, сопровождающихся повреждением артерии, кровотечение необходимо остановить в течение первых двух–трех минут, а если задеты крупные артерии, то этот интервал сокращается до одной–двух минут. С каждой секундой давление в системе снижается, сердце испытывает дефицит кислорода, сознание пострадавшего угасает и увеличивается вероятность летального исхода.

В первую очередь место кровотечения необходимо пережать рукой. Затем следует незамедлительно  наложить жгут выше места повреждения. Он может быть как специальным медицинским, так и изготовленным из подручных средств — шарфа или ремня. Жгут следует накладывать плотно и туго, но не передавливая артерию полностью.

Если поврежденная артерия расположена на конечности, но перелома при этом нет, можно согнуть конечность и зафиксировать ее бинтом в этом положении. Жгут можно оставлять на теле не более чем на полтора часа, чтобы предотвратить омертвение тканей и паралич из-за сдавливания нервных волокон.

Опасные осложнения и последствия ранений

В процессе оказания первой помощи при ранениях нужно учитывать, к каким последствиям может привести травма. Главным осложнением становится большая кровопотеря как угроза жизни. Другие риски связаны с повреждением важных внутренних органов, развитием шока от травмы. Сразу после ранения пострадавший находится в состоянии шока и крайнего возбуждения, жалуется на боль. Возможно проявление агрессии, панической атаки. Второй этап сопровождается учащением пульса, снижением АД и температуры, отсутствием реакции на звуковые и световые раздражители. Эта стадия наступает, если вовремя не оказать правильную первую помощь при ранении. В таком состоянии возникает реальная угроза жизни человека.

Основные виды повязок

В зависимости от цели, с которой накладывают медицинскую повязку, и характера первой доврачебной помощи при ранениях, выбирают следующие типы:

  • защитные, предупреждающие механическое повреждение и высыхание;
  • давящие, останавливающие кровотечение;
  • иммобилизирующие, ограничивающие подвижность поврежденного участка;
  • с вытяжением;
  • корригирующие, чтобы изменить положение части тела.

В зависимости от используемых материалов, повязки делятся на мягкие и жесткие. Первые накладывают с помощью марли, бинта, х/б ткани. Вторые предполагают использование дерева, металла, гипса, пластика и других твердых материалов.

Правила бинтования разных частей тела

Способы наложения повязок выбирают с учетом характера повреждений. Одни варианты подходят в качестве первой помощи при ранах, растяжениях и ушибах, а другие — при артериальном кровотечении и переломе.

Правила бинтования разных частей тела:

  1. Голеностоп, локоть, пятка, бедро, плечо, предплечье, грудь — спиральная повязка.
  2. Шея, грудь, гортань, руки и кисти, затылок — крестообразная повязка.
  3. Череп — «чепец», напоминающий шлем.
  4. Выпадение органов — слабая повязка без вправления внутренностей.

Человек, решивший оказать первую медицинскую помощь при ранениях, должен по возможности продезинфицировать повреждение и применять стерильные материалы для перевязки. Если нет возможности, кровотечение останавливают подручными материалами и дожидаются приезда неотложной помощи. 

Хирургическая обработка ран | MAJOR CLINIC

Когда нужна хирургическая обработка ран?

Обработка раны хирургом нужна в следующих случаях:

  • поверхностное ранение с повреждением мягких тканей и кожи, с расхождением краёв раны;
  • глубокая резаная или колотая рана;
  • рана, возникшая в результате размозжения тканей;
  • ранение с повреждением нервов, сухожилий и костей;
  • рана вследствие ожога или отморожения;
  • загрязнение раны.

Правильная хирургическая обработка раны обеспечивает её быстрое заживление и полноценное восстановление тканей, предотвращает развитие осложнений.

Первичная хирургическая обработка ран

В первую очередь хирург осматривает рану. При необходимости, проводится УЗИ и зондирование раны для определения её границ, затёков, карманов, гематом. После этого выбирается тактика проведения обработки.
Устраняются все нежизнеспособные участки тканей.
Если необходимо, иссекаются края и дно раны.
Рана ушивается послойно.

Если первичная обработка раны не привела к её заживлению или присоединилась инфекция, проводится вторичная обработка. Она заключается в более радикальном иссечении краёв и дна раны. Рана не ушивается полностью, накладывается дренаж для оттока гноя.

Поэтому лучше сразу после ранения получить квалифицированную помощь хирурга, не дожидаясь развития осложнений.

Удаление инородных предметов из мягких тканей

Иногда в мягких тканях обнаруживается инородный предмет — щепка, гвоздь, осколок стекла и другие. Врач определяет его во время осмотра раны и уточняет локализацию с помощью УЗИ или зондирования. Инородное тело извлекается, рана очищается и ушивается.

Обращайтесь к хирургу своевременно!

Наша клиника имеет все необходимое для качественной хирургической обработки раны. Помощь оказывают квалифицированные хирурги с большим опытом работы. Врачи быстро и безболезненно проводят все необходимые манипуляции: обрабатывают рану, ушивают её. Дают рекомендации по наблюдению, количеству и сроках перевязок, физической активности. Полностью рана заживает за 7-15 дней.

Записаться к хирургу можно онлайн или по телефону. Любая рана требует внимательного отношения и квалифицированной медицинской помощи.

Страница не найдена |

Страница не найдена |

404. Страница не найдена

Архив за месяц

ПнВтСрЧтПтСбВс

15161718192021

22232425262728

293031    

       

       

       

     12

       

     12

       

      1

3031     

     12

       

15161718192021

       

25262728293031

       

    123

45678910

       

     12

17181920212223

31      

2728293031  

       

      1

       

   1234

567891011

       

     12

       

891011121314

       

11121314151617

       

28293031   

       

   1234

       

     12

       

  12345

6789101112

       

567891011

12131415161718

19202122232425

       

3456789

17181920212223

24252627282930

       

  12345

13141516171819

20212223242526

2728293031  

       

15161718192021

22232425262728

2930     

       

Архивы

Апр

Май

Июн

Июл

Авг

Сен

Окт

Ноя

Дек

Метки

Настройки
для слабовидящих

Укушенные раны, раны от укусов

Укушенная рана (рана от укуса) возникает при укусах диких или домашних животных (кошек, собак и других, например грызунов), а такжечеловека.

Данный вид раны характеризуется высокой степенью первичной инфицированности благодаря огромному количеству содержащимся в слюне и ротовой полости животных и человека патогенных микробов.

Раны, нанесённые человеческими зубами, не ушивают, а лечат повязками. Проводят профилактику столбняка и обязательно назначают антибиотики.

Укусы животных, особенно диких, часто сопровождаются потерей мягких тканей, а нередко и переломами.

  

Местное лечение при укусах животных заключается в хирургической обработке раны, обильном промывании антисептическим раствором. Производятся ежедневные перевязки, системная антибактериальная терапия.

При сочетании наличия дефектов мягких тканей с костной патологией производится иммобилизация перелома – совместное лечение с врачами-травматологами.

Для восстановления дефектов при потере мягких тканей после купирования гнойного процесса прибегают к трансплантации кожи или пластике местными кожными или кожно-мышечными лоскутами.

Профилактика бешенства — один из главных аспектов лечения ран, нанесённых дикими и домашними животными. Вирус бешенства из слюны больного животного попадает в организм человека через укусы, царапины, ссадины и слизистые оболочки. Поэтому при попадании слюны на кожу и слизистые оболочки также назначают курс прививок. Если укус нанесён животным, больным бешенством или подозрительным на бешенство, одновременно проводят активную и пассивную иммунизацию.

При наличии поверхностных повреждений (ссадины, царапины) любой  локализации, кроме области головы, шеи, кистей рук, пальцев ног и гениталий,  нанесённых домашними животными, культуральную очищенную концентрированную антирабическую вакцину (КОКАВ) вводят внутримышечно по 1 мл как можно скорее после укуса, а также на 3-й, 7-й, 14-й, 30-й и 90-й дни.

При попадании слюны животных на слизистые оболочки, а также при глубоких и множественных укусах и любых укусах диких животных одновременно с первой дозой вакцины назначают однократное введение антирабического  иммуноглобулина.

В условиях отделения гнойной хирургии ГКБ 29 производятся все виды хирургической обработки ран, выполняется антирабическая и противостолбнячная профилактика в круглосуточном режиме. Решение вопроса о пластическом закрытии ран производится в индивидуальном порядке в зависимости от тяжести первичной травмы. Специалисты отделения гнойной хирургии ГКБ29 владеют всеми видами пластического закрытия ран, что позволит выбрать необходимый метод именно в Вашем конкретном случае.

Раны


«Не лечи бесплатно, ибо тот, кто лечиться бесплатно не ценит свое здоровье, а тот, кто лечит бесплатно, не ценит свой труд» Гиппократ

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Рана — нарушение целостности кожи или слизистых оболочек.

КЛАССИФИКАЦИЯ РАН

Характер повреждения
 • Резаные, колотые, ушибленные, размозженные, рваные, рубленные, укушенные, огнестрельные.

Глубина
 • Поверхностные (кожа, подкожная клетчатка), глубокие (подфасциальные пространства и мышцы), проникающие (в полости и органы).

Инфицированность
 • Асептические, контаминированные, инфицированные (гнойные).


ФАЗЫ РАНЕВОГО ПРОЦЕССА

Воспаление 4–5 сут, регенерация 2–4 нед, эпителизации и реорганизации рубца недели-месяцы.


ВИДЫ ЗАЖИВЛЕНИЯ

Первичное натяжением
 • Резаные, колотые, ушибленные, размозженные, рваные, рубленные, укушенные, огнестрельные.

Вторичное натяжением
 • Заживление через нагноение и гранулирование с развитием грубого рубца и образованием видимой межуточной ткани.

Инфицированность
 • Асептические, контаминированные, инфицированные (гнойные).

Под струпом
 • При поверхностных ранах без повреждения росткового слоя кожи, без рубца.


ФОРМУЛИРОВКА ДИАГНОЗА

 □ Закрытая черепно-мозговая травма, сотрясение головного мозга, ушибленная рана затылочной области. [S06.0]
 □ Резаная рана тыльной поверхности правой кисти. [S61.8]
 □ Множественные раны и ссадины левой кисти. [S61.7]
 □  Инфицированная рана нижней трети левого бедра. [S71.1]
 □ Ушиб голеностопного сустава. [S90.0]
 □ Ушиб грудной клетки слева. [S20.2]

ПЕРВИЧНАЯ ОБРАБОТКА РАНЫ

 • Обезболивание.
 • Промывание и очищение раны: физиологический р-р (антисептики цитотоксичны для грануляционной ткани, фибробластов).
 • Рассечение раны и хирургическое удаление размозженных и нежизнеспособных тканей.
 • Извлечение инородных тел.
 • Остановка кровотечения.
 • Наложение асептической повязки.

ВЫБОР ПОВЯЗОК

Гнойная рана
 • Воспаление: очистить и убрать избыточный экссудат без травмы раны и пересушивания.
 • Повязка: TenderWet plus (24 ч), Sorbalgon (2–5 сут), Zetuvit (>> экссудат).

 • Регенерация: удалить излишний экссудат, увлажнить рану.
 • Повязка: HydroTac, Telle.

 • Эпителизация: защитить, увлажнить рану.
 • Hydrosorb, Hydrocoll, Биоклюзив, (до 7 сут), Promogran (коллаген, до 1–3 сут). Гидрогель можно закрыть пленкой (Hydrofilm).

Асептическая рана
 • Профилактика инфекции, защита от механических повреждений, покой пораженного участка.
 • Стерильные марлевые повязки (Cosmopor).

Хроническая рана
 • Увлажнение, смягчение краев раны, профилактика рубцов.
 • Мазевые сетчатые повязки Branolind, Atrauman Ag (инфекция), Grassolind.

Ожоги I–II степени
 • Профилактика инфекции, увлажнение.
 • Пленочная повязка (Hydrofilm, Биоклюзив), мазевые сетчатые повязки (Branolind, Atrauman Ag (инфекция), Grassolind), гидрогели (Hydrosorb).


ИСПОЛЬЗОВАНИЕ РАЗНЫХ ПОВЯЗОК


ОСОБЕННОСТИ ЛЕЧЕНИЯ ОЖОГОВ

 • Охлаждение: ~20 мин, 12–18 ºС (не лед).
 • Липнущая поливинилхлоридная (пищевая) пленка.
 • Очистить (вода с мылом), удалить некротизированную ткань.
 • Устранить пузыри >1 см² (асептика).
 • Ожоги I–II степени со слабым экссудатом: пленочная повязка (Hydrofilm, до 24 ч), неприлипающая мазевая повязка (Hydrotul, Atrauman, Grassolind, до недели).
 • Выраженный экссудат (первые 72 ч): полиуретановая пена (PermaFoam), гидроколлоид (Hydrocoll), алгинат.
 • Струп: увлажнение, аутолиз (гидрогель).
 • Инфекция: повязки с серебром, левомиколь.
 • Смена повязки через 48 ч и далее через 3–5 сут.
 • Обезболивание: парацетамол, НПВП, трамадол.

Раны мягких тканей: Причины и лечение

Что относят к ранам мягких тканей?

К ранениям мягких тканей относятся ранения кожи, слизистой оболочки, глубоколежащих тканей (подкожной клетчатки, мышц и др.), а также сухожилий, сосудов и нервов. В результате нарушения целостности кожи происходит микробное загрязнение раневой поверхности, что может привести к развитию инфекции.

По повреждающему фактору раны делят на механические, термические (ожоговые) и химические; по орудию травмы — на раны от тупых, острых предметов, орудий и оружия, огнестрельных орудий и оружия; по характе­ру повреждений раны классифицируют на ушибленные, рваные, сочетанные, укушенные, колотые, резаные, колото-резаные, рубленые, пиленые, сочетанные пулевые, дробовые, осколочные.

По глубине повреждения различают поверхностные раны, располагаю­щиеся в различных слоях кожи, и глубокие, проходящие в глубжележащих тканях. Раны внутренних органов и суставов, сообщающиеся с внешней средой раневым каналом, называют открытыми, а раны, раневые каналы которых проходят через полости или оканчивающиеся в них, — проникаю­щими ранениями. Раны внутренних органов, не сообщающиеся с внешней средой, относятся к закрытым.

Причины

Резаные раны возникают в результате непосредственного воздействия острого оружия на поверхность кожи.

Рубленые раны образуются при опускании острого оружия на кожу под углом.

Колотые раны – результат глубокого проникновения острого тонкого инструмента. Возможно ранение полостей или суставов.

Ушибленные раны возникают в том случае, если какая-нибудь часть тела вступает в контакт с жестким препятствием и имеется твердая опора в виде костей черепа или другой кости.

Раздавленные, размозженные раны образуются вследствие воздействия тупого орудия с широкой поверхностью при противопоставлении твердой опоры.

Укушенные раны. Вследствие укуса животным или человеком в рану могут поступать высоковирулентные возбудители раневой инфекции.

Симптомы

Заподозрить закрытое повреждение можно, зная механизм травмы, (например, удар тупым предметом) и при наличии одного или нескольких признаков: синяк, отек, боль.
По некоторым признакам можно предположить характер травмы. К примеру, отек и деформация могут означать закрытый перелом. Синяк на голове, кровянистые выделения из носа, ушей и рта – возможна травма шейного отдела позвоночника или головного мозга. Синяки на грудной клетке, деформация, нарушение симметрии – возможна травма грудной клетки с повреждением ребер и грудины. Нарушение дыхания могут говорить о травме легкого. Синяки большого размера на животе – возможна травма внутреннего органа.

Признаки раны варьируют в зависимости от типа и глубины повреждения ткани. Как правило, любое повреждение сопровождает боль, возможно нарушение целостности кожного покрова, а также кровотечение.

Диагностика

При небольших поверхностных ранах, не сопровождающихся общими симптомами, диагноз выставляется на основании клинической картины. Детальное исследование осуществляется в процессе первичной обработки раны. При обширных и глубоких ранах с нарушением общего состояния необходимы дополнительные исследования, перечень которых определяется с учетом локализации повреждения. При повреждениях в области груди назначают рентгенографию грудной клетки, при повреждениях области живота – рентгенографию брюшной полости, УЗИ или лапароскопию и т. д. При подозрении на нарушение целостности сосудов и нервов требуется консультация нейрохирурга и сосудистого хирурга.

Лечение

Первая медицинская помощь заключается в первичной хирургической обработке раны, во время которой удаляются инородные тела из раны, останавливается кровотечение, рана промывается антисептиками, иссекаются нежизнеспособные ткани. Так же решается вопрос о профилактике столбняка и бешенства (если рана укушенная). Раны с выраженным воспалительным процессом не ушиваются, проводится их дренирование. Инфицированная рана заживает вторичным натяжением. Ежедневно проводятся перевязки и смена дренажей. Общее лечение заключается в противовоспалительной терапии, введении кровеостанавливающих средств, обезболивающих.

При обильной кровопотере решается вопрос о возмещении объема циркулирующей крови (ОЦК), вводятся кровезаменители, компоненты крови. В последующем при сильных рубцовых контрактурах и деформациях может повторно проводиться восстанавливающая операция.

Чаще всего поверхностные раны кровоточат не сильно. Поэтому помощь состоит в перевязке раны. Перед этой процедурой края смазывают антисептиком, следя за тем, чтобы он не попал в рану.

Рану закрывают стерильной салфеткой и бинтуют. Если края раны сильно разошлись, перед наложением повязок их надо сблизить (но не до смыкания) и в таком положении фиксировать 2–3 полосками лейкопластыря.

Рану нельзя промывать водой (опасность заражения), а также спиртом или йодной настойкой. Дезинфицирующий раствор, попадая в рану, обусловливает гибель поврежденных клеток, а также вызывает значительную боль. На рану нельзя накладывать никакую мазь, а также класть вату непосредственно в рану.

Не следует забывать о витаминотерапии. Дефицит витаминов резко замедляет репаративные (восстановительные) процессы.

Для ускорения заживления ран имеет значение правильное питание больных, особенно тех, кто перенес травматический шок, тяжелую инфекцию или большую операцию. Им необходима полноценная диета с повышенным количеством белка и витаминов. Лечебная физкультура показана в первую очередь при гнойных ранах верхних конечностей. Большую роль играют физиотерапевтические процедуры: УФО, УВЧ и др.

виды, стадии, сроки, этапы, лече

Заболевания, влияющие на скорость заживления царапин и ссадин

Если первая помощь при ссадинах оказана грамотно, заживление обычно протекает без осложнений. Но бывают ситуации, когда царапина на руке, лице или теле долго не затягивается — выглядит воспаленной на протяжении более 3-5 дней, является болезненной на ощупь, кровоточит, из нее выделяется сукровица, гной. Приводить к таким осложнениям могут некоторые заболевания:

  • экзема;
  • псориаз;
  • сахарный диабет;
  • онкология.

Также замечено, что современные средства, например, крема, заживляющие раны и ссадины, не всегда оказывают ожидаемый эффект, если у пациента низкий уровень гемоглобина в крови, сильно ослаблена иммунная система после ранее перенесенного заболевания, нехватка витаминов и микроэлементов, истощение.

Лечение и обработка ссадин и царапин

Чем быстрее будет оказана первая помощь, тем ниже риск проникновения микробов в рану. Необходимо:

  • Промыть поврежденную кожу холодной кипяченой водой с детским или антибактериальным мылом.
  • Промокнуть ссадину стерильной марлевой салфеткой.
  • Нанести ранозаживляющий крем.
  • Наложить стерильный тампон, зафиксировать его бинтом. Также можно заклеить царапину бактерицидным пластырем.

Если рана или царапина долгое время не затягивается, болит, нужно проконсультироваться с врачом по поводу приема антибиотиков. В некоторых ситуациях пациенту назначают сдачу лабораторных анализов, чтобы установить истинную причину медленного заживления ссадины на лице, конечности, туловище.

Чтобы ускорить заживление царапин и ссадин, важно выполнять все врачебные рекомендации, своевременно менять стерильную повязку, снизить физическую активность. Также имеет смысл применять специальные ранозаживляющие кремы, оказывающие регенерирующее действие, например, «Бепантен Плюс».

Входящий в состав средства провитамин В5 доказал свою эффективность при заживлении ссадин, раздражениях кожи, трещинах, легких ожогах, хронических язвах. Антисептик хлоргексидин в креме «Бепантен Плюс» отвечает за уничтожение бактерий, обычно имеющихся на коже или попадающих на нее в результате загрязнения раны.

Особенности заживления ссадин на лице

Не зная, как быстро вылечить царапины на лице, некоторые начинают маскировать дефект кожи с помощью косметических средств — пудры, тонального крема, всевозможных корректоров. Поступать так врачи не рекомендуют, особенно в первые дни после получения травмы. Компоненты, входящие в состав косметики, могут замедлять процесс регенерации кожи, не дают применяемым ранозаживляющим кремам действовать в полную силу.

Необходимо дождаться, пока ссадина на лице покроется тонким струпом, и только после этого прибегать к тональным основам.

достижений в лечении ран | Мэри Энн Либерт, Inc., издательство

Достижения в области ухода за ранами быстро делится результатами исследований от кабинета до постели больного, с приложениями для ухода за ранами при ожогах, серьезных травмах, взрывных травмах, хирургических вмешательствах и диабетических язвах. Журнал представляет собой критический, рецензируемый форум в области повреждения и восстановления тканей с упором на острые и хронические раны.

Достижения в области ухода за ранами сообщает о достижениях в области ухода за ранами, переводческих науках и развитии технологий.Незаживающие острые и хронические раны, а также ожоги и травмы составляют основное внимание журнала.

Как публикация национального Общества заживления ран (WHS), Advances in Wound Care является ведущим (по импакт-фактору) журналом в области ухода за ранами. Сообщая о научных инновациях, имеющих отношение к улучшению оказания медицинской помощи, журнал объединяет биомедицинских исследователей, поставщиков медицинских услуг и соответствующих лидеров отрасли на одной платформе.В то время как категории Discovery Express и Technology Advances представляют собой оригинальные исследовательские отчеты, критических обзоров и всесторонние специальные обзоры нацелены на ведущих экспертов посредством критической оценки междисциплинарных тем, имеющих отношение к лечению ран. В статьях News & Views освещаются новые события в сообществе и представлены мнения экспертов.

Advances in Wound Care Покрытие включает:
  • Биоинженерия кожи
  • Регенерация кожи и тканей
  • Острые, хронические и сложные раны
  • Повязки
  • Стратегии борьбы с рубцами
  • Воспаление
  • Ожоги и заживление
  • Биопленка
  • Кислород и ангиогенез
  • Критическая ишемия конечностей
  • Военное лечение ран
  • Новые приборы и технологии

Достижения в лечении ран находится под редакционным руководством главного редактора Чандана К.Сен, доктор философии, Медицинский факультет Университета Индианы , и другие ведущие исследователи. Посмотреть всю редакцию.

Аудитория: Лечащие врачи, исследователи и медсестры; Персонал интенсивной терапии и отделения интенсивной терапии; исследователи в области биомедицинской инженерии; исследователи тканевой инженерии; исследователи регенеративной медицины; и реконструктивные хирурги.

Принципы подготовки раневого ложа и ВРЕМЯ

Мартин Д. Вера, LVN, CWS

Подготовка ложа раны стала золотым стандартом для правильной оценки раны.Это позволяет нам, клиницистам, выявлять и устранять местные препятствия на пути заживления ран. На протяжении всей нашей медицинской карьеры мы видели это снова и снова: коллективный акцент на стандартах ухода, научно обоснованной практике и экономической эффективности для достижения положительных результатов для наших пациентов. Модель подготовки раневого ложа поддерживает все эти аспекты оказания помощи.

Подготовка раневого ложа — это не только основа для успешного лечения клиницистами, но, что еще более важно, для достижения более быстрых и лучших результатов для наших пациентов, страдающих ранами.Достижение лучших результатов заживления ран для наших пациентов — это причина номер один, по которой мы должны продолжать обучать себя и членов нашей раневой бригады, чтобы добиться успеха в этой области. Поверьте, когда я говорю, нужна деревня, чтобы залечить рану.

Что такое подготовка ложа раны?
По определению, подготовка раневого ложа — это «обработка раны с целью ускорения эндогенного заживления или повышения эффективности других терапевтических мер». 1, 2 Она позволяет клиницистам обеспечить лечение раны, выявляя барьеры, влияющие на пациента. с раной, а не только с самой раной.

Принципы ВРЕМЕНИ

Чтобы облегчить подготовку ложа раны, группа экспертов по уходу за ранами разработала мнемонику TIME. Эта концепция была создана в 2002 году и с тех пор предоставляет врачам-терапевтам инструменты, необходимые для упрощения подготовки раневого ложа. Ниже приводится объяснение структуры TIME:


Т — (ткань)
Является ли ткань в ране нежизнеспособной или поврежденной? Если есть нежизнеспособная ткань, некроз, шелушение или струп, то следующим шагом будет определение наилучшего типа хирургической обработки раны, которая будет наиболее подходящей для этого пациента (ферментативная, аутолитическая, острая, хирургическая, механическая и т. Д. .). Если вся ткань жизнеспособна, выберите повязку, которая поддерживает оптимальную влажность, способствующую заживлению раны, и устраните мертвое пространство, подрыв и туннелирование раны, поскольку эти области должны быть неплотно упакованы или заполнены, чтобы предотвратить дальнейшие осложнения или развитие. новых преград.


I — (инфекция / воспаление)
Есть ли видимые признаки или симптомы инфекции? Рана выглядит «сердитой»? Наличие инфекции, локальной или системной, создает препятствие для заживления.Наличие отека на ложе раны и / или около раны также создает барьер. При заражении хозяин был поражен микроорганизмами, которые превысили срок своего пребывания. Инфекция должна пройти несколько стадий, чтобы обеспечить полный контроль над хозяином и вызвать системную инфекцию. Микроорганизмы имеют тенденцию взаимодействовать с хроническими ранами на разных уровнях. Происходит заражение раны, колонизация, критическая колонизация и, в конечном итоге, инфекция. На этом этапе системные антибиотики окажут большую помощь после того, как организм будет идентифицирован, а использование местных противомикробных препаратов также поможет на местном уровне.Как справиться с отеком вокруг раны? Достаточно ли сжатие? Достаточно ли у пациента кровообращения? Венозный или артериальный? Ответы на эти вопросы помогут определить правильную степень сжатия и тип повязки, необходимой для увлажнения среды раны.


M — (баланс влажности)
Рана кажется слишком сухой или слишком влажной? Исследование доктора Джорджа Винтерса в начале 1960-х годов пришло к выводу, что баланс влажности необходим для положительных результатов при заживлении ран, что привело к практике того, что мы сейчас называем влажным заживлением ран.Итак, если рана слишком сухая или пересохшая, добавьте влаги. Если рана слишком влажная или мацерированная, о чем свидетельствует мацерация краев раны и области вокруг раны, выбирайте повязки, рассчитанные на средний или сильный дренаж.


E — (край раны)
Края раны не выдвинуты или подорваны? Поскольку мы оцениваем все аспекты локальных и системных барьеров, определение прогресса или его отсутствия краев раны является еще одним важным моментом в лечении ран.В здоровом состоянии края раны кажутся прикрепленными, открытыми, мигрирующими или сокращающимися. Когда раны перевязаны неправильно, как правило, в случаях туннелирования и подрыва, возникают другие препятствия, такие как эпибол, подорванные или скрученные края. При правильном заполнении этих мертвых пространств с использованием наполнителей для ран, упаковочных полосок или любого другого подходящего продукта по выбору края раны будут перемещаться и сокращаться без осложнений.

Основные конечные точки подготовки ложа раны

Существует популярная поговорка, что «практика приводит к совершенству.«Инструктор боевых искусств однажды сказал мне, что это неверно, но на самом деле« правильная практика делает совершенство ». Я согласен с последним.

Подготовка раневого ложа — это «надлежащая практика», которую мы, клиницисты, должны выполнять при каждой смене повязки, потому что это позволит нам улучшить наши навыки оценки ран. Кроме того, прогрессирование раны следует отмечать в течение двух недель после последовательного использования начальных улучшенных средств ухода за ранами, рекомендованных SWAT (группа оценки кожи, ран, термин, введенный доктором.Джойс Блэк, Университет Небраски). SWAT (если не один, то в сочетании с подготовкой раневого ложа) должен быть в состоянии изменить лечение и удовлетворить текущие потребности раны.

Итак, в конце концов, мы должны убедиться, что принципы ВРЕМЕНИ соблюдаются при подготовке раневого ложа, пациент и учреждение соблюдают правила, и мы предоставляем правильные инструменты для наших пациентов и их семей, чтобы добиться успеха. . Наконец, когда мы практикуем лечение ран; Следует оценить и устранить сопутствующие заболевания, а также местные и системные факторы.

Продолжайте исцелять, друзья мои!

Список литературы
1. Фаланга В. Классификации подготовки раневого ложа и стимуляции хронических ран. Regen Repair Regen , 2000; 8 (5): 347-52.
2. Шульц, Г.С., Сиббальд, Р.Г., Фаланга, В., Айелло, Э.А., Доусет, К., Хардинг, К., Романелли, М., Стейси, М.К., Теот, Л. и Ваншайдт, В. (2003 г. ), Подготовка раневого ложа: систематический подход к лечению ран. Регенерация для восстановления ран , 11: S1 – S28.DOI: 10.1046 / j.1524-475X.11.s2.1.x

Об авторе
Мартин Вера — сертифицированный специалист по ранам с более чем 19-летним опытом медсестры, страстным энтузиазмом относящимся к лечению ран и уходу, ориентированному на пациента.

Взгляды и мнения, выраженные в этом блоге, принадлежат исключительно автору и не отражают точку зрения WoundSource, Kestrel Health Information, Inc., ее аффилированных лиц или дочерних компаний.

Типы раневых тканей в лечении хронических ран

Редакторы WoundSource

Наблюдать за нормальным процессом заживления ран — это невероятно.Однако систематический процесс исцеления не всегда идеален. Хронические раны сложны и представляют собой огромное бремя для здравоохранения. Выявление этиологии раны важно, но не менее важна и точная оценка раны. Цвет, консистенция и текстура раневой ткани позволят вам составить наиболее подходящий план лечения раны.

Типы тканей раны

Эпителиальный
Процесс регенерации эпидермиса на поверхности раны с частичной толщиной или в рубцовой ткани, образующейся на ране с полной толщиной, называется эпителизацией.Эпителий имеет светло-розовый цвет с перламутровым оттенком. Эпителиальные клетки перемещаются от внешних краев раны и ползут по ложе раны к закрытию раны. Созданный эпителий со временем укрепляется.

Грануляция
Грануляция образования ткани происходит в пролиферативной фазе. Здоровые гранулы розового или красного цвета с неровной бугристой текстурой. Эти холмы представляют собой петли капилляров или бутоны грануляции. Темные темные гранулы являются признаком ишемии, плохой перфузии и / или инфекции.Фаза пролиферации завершится, когда миофибробласты помогают сокращать рану, и эпителиальные клетки начинают восстанавливаться через ложе раны.

Здоровая грануляционная ткань розового или красного цвета является хорошим показателем заживления. Нездоровая грануляция имеет темный, темно-красный цвет, легко кровоточит и может указывать на наличие раневой инфекции.
Избыточная грануляция или «гордая плоть» называется гипергрануляцией. Ткань раны будет выступать выше нормальной поверхности раневого ложа.

Что вы знаете о хирургической обработке и хронических ранах? Пройдите нашу викторину из 10 вопросов, чтобы узнать! Кликните сюда.

Slough
Slough — нежизнеспособная или омертвевшая ткань, которая может быть фибринозной, прилипшей, вязкой или утолщенной. Цвет может варьироваться от желтого, серого, зеленого, коричневого или коричневого. Слау является местом обитания патогенных организмов, увеличивает риск инфицирования и препятствует заживлению, так как рана остается в воспалительной фазе или состоянии; Следовательно, необходимы методы санации раны. Открытие жизнеспособной ткани ускорит процесс заживления.

Струп против струпа
Термин «струп» НЕ взаимозаменяем с «струпом».«Эшар — это мертвая ткань, обнаруженная в ране на всю толщину. Вы можете увидеть струп после ожоговой травмы, гангренозной язвы, грибковой инфекции, некротического фасциита, пятнистой лихорадки и контакта с кожной сибирской язвой. Текущие стандарты ухода рекомендуют стабильные, неповрежденные (сухой, прилипший, неповрежденный, без эритемы и флюктуации) струп на пятках не следует удалять. Кровоток в ткани под струпом слабый, и рана восприимчива к инфекции. Струп действует как естественный барьер для инфекции, сохраняя попадание бактерий в рану.Если струп становится нестабильным (влажный, дренирующий, рыхлый, болотный, отечный, красный), его следует удалить в соответствии с протоколом клиники или учреждения. 1

Термин «струп» используется, когда корка образовалась в результате коагуляции крови или экссудата. На поверхностных или частичных ранах обнаруживаются струпья. Струп — это ржаво-коричневая сухая корка, которая образуется на любой поврежденной поверхности в течение 24 часов после травмы. Всякий раз, когда наша кожа травмируется в результате любого пореза или ссадины, она начинает кровоточить, вторично по отношению к крови, текущей из разорванных сосудов.Эта кровь, содержащая тромбоциты, фибрин и клетки крови, вскоре сворачивается, чтобы предотвратить дальнейшую потерю крови. Внешняя поверхность этого сгустка крови высыхает (обезвоживается), образуя ржавую коричневую корку, называемую струпом, которая покрывает подлежащие заживляющие ткани, как колпачок. Назначение струпа — предотвратить дальнейшее обезвоживание заживающей кожи под ней, защитить ее от инфекций и предотвратить попадание загрязняющих веществ из внешней среды. Корки обычно остаются на месте до тех пор, пока кожа под ними не будет восстановлена ​​и не появятся новые клетки кожи, после чего они естественным образом не отпадут. 1

Ссылки
1. Карвер К. Знание разницы между паршой и Эшаром. WoundSource.com. 2016 г. Доступно по адресу: http://www.woundsource.com/blog/knowing-difference-between-scabs-and-eschar. По состоянию на 15 апреля 2018 г..
2. Лю В.Л., Цзян Ю.Л., Ван YQ, Ли YX, Лю YX. Комбинированная санация хронических ран: обзор литературы. Chin Nurs Res. 2017; 4 (1): 5–8. Доступно по адресу: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S2095771817300063. По состоянию на 15 апреля 2018 г.
3. Грей Дж. Э., Енох С., Хардинг К. Г.. Азбука оценки раны. BMJ. 2006. 332 (7536): 285–8. Доступно по адресу: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1360405/. По состоянию на 15 апреля 2018 г.

Взгляды и мнения, выраженные в этом блоге, принадлежат исключительно автору и не отражают точку зрения WoundSource, Kestrel Health Information, Inc., ее аффилированных лиц или дочерних компаний.

Определение раны по Merriam-Webster

\ ˈWünd , архаичный или диалектный ˈwau̇nd \

: травма тела (например, в результате насилия, несчастного случая или хирургического вмешательства), которая обычно включает разрыв или разрыв мембраны (например, кожи) и обычно повреждение подлежащих тканей.

б : порез или разрыв в растении, обычно вызванный внешним воздействием.

2 : душевная или эмоциональная травма или удар

3 : нечто похожее на рану по внешнему виду или действию особенно : раскол или удар по политическому органу или социальной группе

\ ˈWünd , архаичный или диалектный ˈwau̇nd \

раненый; ранение; раны

\ ˈWau̇nd \

прошедшее время и причастие прошедшего времени ветер

Клеточный и генетический анализ заживления ран у личинок дрозофилы

Образец цитирования: Галко М.Дж., Краснов М.А. (2004) Клеточный и генетический анализ заживления ран у личинок дрозофилы .PLoS Biol 2 (8): e239. https://doi.org/10.1371/journal.pbio.0020239

Академический редактор: Альфонсо Мартинес Ариас, Кембриджский университет

Поступила: 20 февраля 2004 г .; Принята к печати: 26 мая 2004 г .; Опубликован: 20 июля 2004 г.

Авторские права: © 2004 Галко и Краснов. Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии правильного цитирования оригинальной работы.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили об отсутствии конфликта интересов.

Сокращения: до н.э. , Черные клетки ; бск , корзина ; DN, доминирующий негатив; GFP, зеленый флуоресцентный белок; JNK, Jun N-терминальная киназа; L [номер], возраст личинки [число]; lz , пастилки ; MSN , деформированный ; PBS, фосфатно-солевой буфер; puc , сморщенные ; ТЕМ, просвечивающая электронная микроскопия; БАС, последовательность активации выше; Вт , белый

Введение

Способность заживлять раны очень важна для организмов, чтобы выжить и выжить, несмотря на временами враждебную окружающую среду.Организмы всего животного мира могут лечить раны, но заживление ран у млекопитающих изучается наиболее интенсивно из-за его медицинской значимости. Заживление ран должно происходить для восстановления здоровья после травмы или операции, а также при таких состояниях, как рак или пептические язвы, при которых внутренние процессы вызывают повреждение тканей. Эпителиальные ткани млекопитающих демонстрируют характерный набор реакций на повреждение ткани, включая быстрое образование тромба в месте повреждения с последующим распространением поврежденного эпителия через раневую щель для восстановления целостности ткани (Martin 1997; Singer and Clark 1999). ).Однако существуют значительные различия в реакции заживления ран в зависимости от конкретной пораженной ткани, стадии ее развития и характера повреждения. Например, поврежденный эпидермис плода заживает, не оставляя рубцов (Colwell et al. 2003), а некоторые ткани взрослого человека, включая печень человека, могут регенерировать большие части поврежденной ткани (Diehl 2002). Некоторые раны, такие как обычные язвы стоп у диабетиков, заживают медленно или совсем не заживают (Greenhalgh, 2003), тогда как другие демонстрируют преувеличенную реакцию, которая приводит к обезображиванию келоидных рубцов (Alster and Tanzi 2003).Одна из важных целей исследования заживления ран — найти способы ускорить или изменить процесс заживления. Другой — понять фундаментальные клеточные и молекулярные механизмы, с помощью которых клетки ощущают повреждение ткани и подают сигнал соседним здоровым клеткам, чтобы они сдерживали и восстанавливали его.

Клеточные исследования заживления ран у млекопитающих показали, что это сложный процесс, на завершение которого уходит несколько недель, и в него вовлечены не только поврежденные эпителиальные клетки и их соседи, но также фибробласты и кровеносные сосуды в подлежащей строме, а также воспалительные клетки, которые задействованы для место раны (Мартин 1997; Сингер и Кларк 1999).Только первый шаг в заживлении ран у млекопитающих, протеолитический каскад, который завершается отложением фибрина и образованием сгустка, хорошо изучен на молекулярном уровне (Furie and Furie 1992). По мере образования сгустка тромбоциты, связанные с ним и поврежденной тканью, высвобождают дополнительные прокоагулянтные белки, а также факторы роста и хемокины, которые могут привлекать нейтрофилы и моноциты, которые опосредуют ранний воспалительный ответ. Кератиноциты на краю раны активируются, разрушают свои клеточные соединения и принимают морфологию ламеллиподиального ползания по мере того, как они распространяются по участку раны, чтобы восстановить целостность эпителия (Odland and Ross 1968; Clark et al.1982). Ранние воспалительные клетки испускают дополнительные сигналы, которые могут привлекать и активировать фибробласты, макрофаги и эндотелиальные клетки кровеносных сосудов. Эти клетки инфильтрируют место раны и образуют специализированную строму, называемую грануляционной тканью, которая облегчает реэпителизацию, помогает сокращать рану, а затем реконструируется с образованием рубца.

Хотя в месте раны присутствует много разных типов клеток и известно, что в процессе заживления экспрессируются десятки сигнальных молекул, рецепторов, матричных белков и протеаз (Martin 1997; Singer and Clark 1999), их роль в этом процессе было сложно установить.Эта трудность связана с клеточной и молекулярной сложностью заживления ран и проблемами, связанными с манипулированием экспрессией и функцией раневых генов in vivo. Следовательно, модели функции генов при заживлении ран основываются в первую очередь на результатах исследований экспрессии генов на участках ран, применении экзогенных генных продуктов к ранам и исследованиях на простых моделях клеточных культур, таких как монослои кератиноцитов. Анализ дефектов заживления ран при нокауте генов-кандидатов у мышей также начал давать представление о роли генов в этом процессе (Werner et al.1994; Romer et al. 1996). Однако некоторые генетические результаты ставят под сомнение фундаментальные аспекты преобладающих моделей (Эшкрофт и др., 1999; Дрю и др., 2001; Мартин и др., 2003).

Создание более простых и податливых генетических систем для изучения заживления ран могло бы позволить систематическое генетическое вскрытие процесса in vivo и дополнить исследования на позвоночных и клинических условиях. Более полувека назад Вигглсворт продемонстрировал, что у крупного полукрылого насекомого Rhodnius prolixus есть сильная реакция на заживление ран (Wigglesworth 1937).Он охарактеризовал реакцию с помощью световой микроскопии и описал пролиферацию и распространение эпидермальных клеток и накопление клеток крови (гемоцитов) в месте раны. Со времени этой новаторской работы появилось лишь несколько последующих исследований (Lai-Fook 1966, 1968). По другим насекомым было проведено мало исследований, за исключением ряда исследований заживления ран во время регенерации имагинального диска и ног (Reinhardt et al. 1977; Truby 1985; Bryant and Fraser 1988) и недавних открытий, что эмбрионов Drosophila претерпевают безрубцовое образование. процесс заживления ран, включающий образование актинового кабеля и расширение филоподий (Kiehart et al.2000; Wood et al. 2002) и что поврежденные взрослые клетки активируют сигнальный путь Jun N-terminal kinase (JNK) (Ramet et al. 2002; см. Ниже). Некоторое внимание также было сосредоточено на меланизации, образовании гетерополимера ортохинонов, образующемся в результате катализируемого фенолоксидазой окисления моно- и дифенолов (Wright, 1987), который сопровождает определенные инфекции, опухоли и заживление ран (De Gregorio et al.2002; Ligoxygakis et al. al.2002).

Мы решили исследовать заживление ран у Drosophila melanogaster из-за мощных генетических и геномных подходов, доступных в этом организме.Эти подходы прояснили молекулярные пути, которые контролируют многие процессы развития и физиологические процессы. Напр., Генетические исследования выявили выдающуюся роль пути передачи сигналов JNK в дорсальном закрытии Drosophila , запрограммированном в процессе развития распространении эмбрионального эпидермиса (Noselli and Agnes 1999). Этот процесс напоминает распространение эпителия во время заживления ран у позвоночных, и действительно это сходство и паттерны экспрессии факторов транскрипции пути JNK вблизи ран (Verrier et al.1986; Martin and Nobes 1992) послужили толчком к двум недавним генетическим исследованиям активности пути JNK при заживлении ран у взрослых (Ramet et al. 2002; Li et al. 2003).

В этой статье мы описываем клеточные события и генетические требования для заживления эпидермальных ран у личинок Drosophila . Был разработан простой анализ колотой раны, и мы используем его, чтобы показать, что на участке раны быстро образуется пробка, а затем меланизируется, образуя струп. Мы описываем, как эпидермальные клетки, окружающие пробку, ориентируются на нее и сливаются, образуя синцитий, и как клетки распространяются вдоль и через пробку, чтобы восстановить непрерывность эпителия.Затем мы используем репортеры пути JNK и генетический анализ, чтобы продемонстрировать индукцию и функцию пути JNK в этом процессе, и мы используем мутанты, которые блокируют образование струпа, и процедуру ранения без чешуек, чтобы выяснить функцию струпа. Результаты демонстрируют, что клеточные реакции заживления ран находятся под отдельным генетическим контролем и что они координируются множественными сигналами, исходящими из участка раны, включая сигнал отрицательной обратной связи между образованием струпа и путем JNK.Это создает управляемую генетическую систему для изучения постэмбрионального заживления ран, а клеточные и молекулярные параллели с заживлением ран у позвоночных позволяют предположить, что некоторые из фундаментальных шагов в этом процессе эволюционно сохраняются.

Результаты

Анализ заживления эпидермальных ран у личинок

Была разработана процедура колотого ранения, при которой личинки дрозофилы ранней третьей стадии (L3) были слегка анестезированы, а затем заколоты 0.Стальная игла диаметром 1 мм, размером с шесть эпидермальных клеток (рис. 1; см. Также рис. 3А). Для обеспечения воспроизводимости личинок всегда наносили удар ножом по средней линии спины на полпути между полосами волос на брюшных сегментах A3 или A4. Ранение не вызывало остановки развития, потому что раненые личинки продолжали расти и окукливаться через 48 часов после ранения, подобно контрольной группе с имитацией ранений (рис. 1B – 1G), и 90% или более раненых личинок выжили после процедуры (см. Ниже) ). Затем мы проанализировали основные морфологические, клеточные и молекулярные процессы заживления (рис. 1N), визуализировав раны на разных стадиях заживления у живых и убитых нагреванием целых личинок, в гистохимически или иммуноокрашенных филе личинок и на участках через раны, которые мы исследовали с помощью просвечивающей электронной микроскопии (ПЭМ) (схематически показано на рисунке 1А).

Рис. 1. Образование струпов и рассасывание во время заживления колотых ран

(A) Анализ колотых ран. Личинки L3 прокалываются по спинной средней линии штифтом диаметром 100 мкм; затем их культивируют и анализируют заживающие раны, как показано.

(B – E) Микрофотографии убитых нагреванием личинок L3 до ранения (B) и в указанные сроки после ранения (C – E). Обратите внимание на рост личинок во время заживления ран. Передняя часть вверх.

(F) Личинка L2, раненная, как указано выше, и проанализированная в L3, через 60 часов после ранения.Ранение в L2 позволяет визуализировать поздние стадии заживления ран без осложнения пупариации, которая начинается примерно через 48 часов после ранения в стандартном анализе L3.

(G) Личинка L2 с ложным ранением, визуализированная через 60 часов после ранения. Обратите внимание, что он и раненая личинка (F) росли примерно одинаково.

(H – M) Крупные изображения (B – G), показывающие неповрежденную кутикулу (H и M) или участки ран (I – L, области в рамке на C – F), чтобы показать детали корки. Микрофотографии живых личинок сделаны незадолго до соответствующих изображений целых личинок, убитых жарой, приведенных выше.Пруток, 500 мкм (для B – G), 50 мкм (для H – M).

(N) Время реакции на рану. Сплошные линии, наиболее часто наблюдалась временная характеристика; пунктирные продолжения влево, время от времени наблюдалось; пунктирные продолжения вправо, время отклика уменьшалось; BL, базальная пластинка.

https://doi.org/10.1371/journal.pbio.0020239.g001

Рис. 3. Ориентация и слияние эпидермальных клеток вокруг колотых ран

(A – E) w; UAS-GFP.nls / +; Личинки A58-Gal4 / + , которые экспрессируют GFP (зеленый) в ядрах эпидермальных клеток, были искусственно ранены (A) или пунктированы (B – E), культивированы в течение указанного времени, открыты, зафиксированы и иммуноокрашены на Fasciclin III ( красный) для обозначения базолатеральной поверхности клеток.

(A) Предварительное ранение. Пунктирный кружок — размер штифта 100 мкм, использованного для ранения.

(B) 2 часа после ранения. Некоторые клетки на краю раны удлинены и ориентированы по направлению к ране (стрелки).

(C) через 8 часов после ранения. Клетки на краю раны начали сливаться, образуя синцитий. Обратите внимание на синцитий с четырьмя ядрами, которые содержат частично разрушенный, радиально ориентированный мембранный домен (стрелка) и разбросанные точки окрашивания фасциклином III в цитоплазме (наконечник стрелки), которые могут быть промежуточными продуктами разрушения мембраны.

(D) 48 ч после ранения. Центральный синцитий содержит десять или более ядер, некоторые из которых расположены в расширениях (наконечники стрелок), которые могут представлять недавние слияния периферических клеток с центральным синцитием. Другие периферические клетки ориентировались на синцитий, но не слились с ним.

(E) 60 часов после ранения. Большой синцитий с более чем 30 ядрами.

(F) через 8 часов после ранения. Личинки обрабатывали, как указано выше, но иммуноокрашивали на Coracle (красный), компонент перегородки.Центральный синцитий содержит девять ядер.

Пруток, 50 мкм.

https://doi.org/10.1371/journal.pbio.0020239.g003

Кровотечение и образование корки в месте раны

Нераненные личинки имеют полупрозрачную белую кутикулярную поверхность с редкими дефектами или без них (см. Рис. 1B, 1G, 1H и 1M). Под кутикулой находится эпидермис (рис. 2), эпителиальный монослой, который секретирует кутикулу на своей апикальной (внешней) поверхности и выстлан базальной пластинкой вдоль его базальной поверхности (рис. 2A, 2C – 2F).Сразу после колотого ранения различное количество крови (гемолимфа) выходит из места раны (данные не показаны). В течение 10–15 минут участок раны начинает темнеть (см. Рис. 1C и 1I), и в промежутке образуется пробка (рис. 2B и 2G). Пробка состоит из обломков, предположительно остатков некротических клеток, поврежденных ранением, которые дезорганизованы и сильно везикулированы и не связаны клеточной мембраной или базальной пластинкой (рис. 2H и 2K). Пробка также может содержать продукты свертывания крови (см. Обсуждение).

Рис. 2. Ультраструктурный анализ заживления колотых ран

(A) Схема неповрежденного эпидермиса, показывающая клеточный монослой, его апикальную выстилку кутикулы и базальную пластинку. Белые овалы обозначают ядра.

(B) Схема недавно поврежденного эпидермиса, показывающая пробку клеточного дебриса в раневой щели. Показаны клетки и разорванная кутикула по краю раны.

(C – S) ПЭМ-срезы неповрежденных (C – F) и раненых (G – S) личинок в указанные сроки после ранения.Показаны поперечные сечения каждого участка раны (C, G, J, N и Q) вместе с крупными планами областей, выделенных рамкой справа. в — кутикула; г, мусор; д, эпидермис; ec, эпикутикула; м, мышца; n — эпидермальное ядро; п, заглушка; пк, прокутикула; с, парша; т, трахея

(C) Предварительное ранение. Эпидермис и кутикула целы.

(D) Апикальная поверхность эпидермальной клетки с ворсинками (наконечник стрелки), секретирующими кутикулу.

(E) Базальная поверхность. Наконечник стрелы, базальная пластинка.

(F) Эпидермальная кутикула.Эпикутикула (три верхних слоя) перекрывает полосатый слой прокутикулы.

(G) через 1 час после ранения. Эпидермис и кутикула прерывистые, но промежуток заполнен пробкой (обозначенной пунктирной линией) клеточного мусора. Эпидермис частично отделился от кутикулы за краем раны (звездочки).

(H) Пробка содержит сильно пузырчатые обломки клеток.

(I) Эпидермис, отделяющийся (звездочка) от вышележащей кутикулы, кажется пузырчатым и предположительно некротическим.

(J) 2 часа после ранения. Наружная часть пробки меланизируется, образуя электронно-плотный струп (обведен белой пунктирной линией). Эпидермис и кутикула по-прежнему прерываются.

(K) Обломки, включая некротическую трахею, в пробке. Пробка не ограничена мембраной или базальной пластинкой.

(L) Часть струпа, показывающая меланизированный мусор и трахею.

(М) Крупный план ламеллиподиума (брекета), переходящего в пробку на внешнем крае другой двухчасовой раны.Обратите внимание на базальную пластинку (наконечник стрелки) вдоль ламеллиподии.

(N) через 8 часов после ранения. Эпидермис переместился через разрыв, чтобы восстановить непрерывность, и секретировал новую кутикулу под коркой.

(O) Область цитоплазмы эпидермальных клеток рядом с остатками раневой пробки содержит везикулированный материал (обведен пунктирной линией), который, вероятно, является фагоцитированным остатком.

(P) Вновь образовавшийся эпидермис под раной имеет непрерывную базальную пластинку (наконечник стрелки) и апикальные ворсинки (стрелка), секретирующие кутикулу.

(Q) 24 часа после ранения. Новая кутикула, лежащая под коркой, толще, а корка более электронная. Четыре близко расположенных ядра находятся в синцитии, потому что нет разделяющих их мембран.

(R) Часть струпа и старой кутикулы. Учтите, что кутикула, контактирующая с струпом, меланизируется.

(S) Расширение цитоплазмы (наконечник стрелки), охватывающее обломки на базальной поверхности эпидермиса другой 24-часовой раны.

Бар, 10 мкм (C, G, J, N и Q), 0.33 мкм (D и E), 0,83 мкм (F), 1 мкм (H, M и P), 2 мкм (I и O), 1,67 мкм (K и L), 4 мкм (R), 1,25 мкм ( S).

https://doi.org/10.1371/journal.pbio.0020239.g002

В течение следующих 24 часов внешняя часть пробки превращается в струп. Эта часть пробки становится электронно-плотной (рис. 2J и 2L) по мере того, как струп увеличивается и темнеет (см. Рис. 1D, 1E, 1J и 1K), предположительно из-за реакции меланизации. Меланизация затрагивает все внешние структуры в месте раны, включая обломки, края поврежденной кутикулы (рис. 2N, 2Q и 2R) и даже захваченные ткани, такие как трахеи (рис. 2L).

Через 2 или 3 дня после ранения обломки очищаются, струп рассасывается, и внешний вид животного становится почти нормальным (см. Рис. 1F и 1L). Эпидермальные клетки, которые снова растут через раневую щель (см. Ниже), по-видимому, участвуют в очищении от мусора, потому что они расширяют отростки, которые захватывают мусор (Рисунок 2S) и содержат в своей цитоплазме везикулированный материал, напоминающий мусор (Рисунок 20). Другие компоненты пробки и струпа могут деградировать внеклеточно или пассивно отделяться от места раны.

Эпидермальные клетки ориентируются на рану и сливаются с образованием синцития

Ответ эпидермальных клеток на ранение был исследован на трансгенных личинках, у которых ядра эпидермальных клеток были помечены зеленым флуоресцентным белком (GFP), а клеточные мембраны были иммуноокрашены на маркер базолатеральной мембраны Fasciclin III или белок межпозвоночного соединения Coracle (рис. 3). Эпидермальные клетки в месте раны претерпели два драматических морфологических изменения в течение нескольких часов после ранения.Во-первых, примерно через полчаса после ранения клетки на краю раны начали удлиняться и ориентироваться по направлению к ране, часто сужаясь к месту раны (рис. 3В). Во-вторых, эти клетки слились друг с другом, образуя синцитий. Обычно эпидермальные клетки мононуклеарные (рис. 3А). Однако уже через 1 час после ранения радиально ориентированные домены плазматической мембраны (параллельные длинной оси клетки) начали разрушаться по мере соединения кольцевых доменов, создавая многоядерные клетки вокруг раны.Это можно увидеть в красителях Fasciclin III и Coracle, которые показали неполные (рис. 3C и 3) или отсутствующие (рис. 3C – 3E) радиальные домены окрашивания плазматической мембраны; потеря этих мембранных доменов иногда сопровождалась разбросанными пунктами окрашивания в цитоплазме, которые могут быть промежуточными продуктами разрушения мембраны (см. рис. 3C). ПЭМ-анализ подтвердил отсутствие плазматической мембраны между ядрами эпидермиса под и рядом с местом раны (см. Рис. 2Q). Синцитии почти всегда присутствовали через 4 часа после ранения.

По мере заживления поляризация и слияние эпидермальных клеток распространялось наружу от раны. Когда клетки, граничащие с раной, сливались, более периферические клетки сразу за синцитием начали поляризоваться по направлению к ране (см. Рисунок 3D). Некоторые из этих клеток, по-видимому, продолжают сливаться с центральным синцитием, потому что среднее количество ядер на синцитий увеличивается в течение 2 дней после ранения, создавая большой синцитий с 30 ядрами, окружающими рану (см. Рисунок 3E).Эпидермальные клетки или деление ядра не вносят вклад в рост синцития, потому что они не были обнаружены вокруг места раны или где-либо еще в эпидермисе с помощью иммуноокрашивания на фосфорилированный гистон h4, маркер конденсированных митотических хромосом, через 4-24 часа после ранения (данные не показано). Сильно асимметричный синцитий, подобный показанному на рисунке 3D, вероятно, представляет собой случаи, в которых подмножество поляризованных периферических клеток слилось с центральным синцитием. Периферические клетки могут сливаться друг с другом перед слиянием с центральным синцитием, потому что иногда наблюдались сателлитные синцитии, отдельные от центрального синцития.

Эпидермальные клетки распространяются вдоль и через заглушку для восстановления целостности эпителия

Ключевым этапом заживления ран является закрытие эпидермальной щели и восстановление целостности эпителия. Через 2 часа после ранения эпидермис все еще оставался прерывистым, но разрыв был заполнен пробкой и развивающейся струпом (см. Рис. 2J). Ультраструктурные исследования показали, что в течение следующих 6 часов, по мере того как эпидермальные клетки ориентировались к месту прокола и сливались, образуя синцитий, они также распространялись вдоль и через пробку, ведущуюся пластинчатыми расширениями (см. Рисунок 2M), до тех пор, пока непрерывность эпителия не была восстановлена. (см. рисунок 2N).В распространяющихся клетках не наблюдалось многоклеточного актинового кабеля, указывающего на механизм закрытия «кисетной нитки» при заживлении эмбриональных ран (Wood et al. 2002) (см. Материалы и методы). Тонкая базальная пластинка присутствует по длине ламеллиподий (см. Рис. 2M), указывая на то, что базальная пластинка синтезируется клетками до или во время их миграции. После реэпителизации новая кутикула секретировалась (см. Рис. 2N – 2P). Через 24 часа после ранения появился новый толстый слой кутикулы, который продолжал старую кутикулу по краю раны (см. Рис. 2Q).Большая часть обломков раневой пробки оказалась за пределами нового слоя кутикулы и в конечном итоге меланизировалась с образованием струпа (см. Рис. 2Q и 2R), хотя иногда некоторые оставались под эпидермисом и позже подвергались фагоцитозу или деградации (см. Рис. 2S).

Путь JNK активируется в градиенте и способствует реэпителизации

Чтобы выяснить генетический контроль и взаимозависимость клеточных событий заживления ран, мы исследовали активность и функцию сигнального пути JNK в этом процессе (рис. 4).Распространение эпидермиса в некотором роде напоминает распространение дорсального закрытия в эпидермисе, которое зависит от пути JNK. Во время дорсального закрытия активируется митоген-активированная протеинкиназа-киназа-киназа-киназа Misshapen (Su et al. 1998), запускающая каскад фосфорилирования, который в конечном итоге активирует корзину JNK (Riesgo-Escovar et al. 1996; Sluss et al. 1996) . Basket фосфорилирует факторы транскрипции Drosophila Jun и Drosophila Fos (Riesgo-Escovar and Hafen 1997), таким образом индуцируя экспрессию puckered (puc), , который кодирует фосфатазу, негативно регулирующую Basket, и другие мишени (Martin- Blanco et al.1998). Чтобы проверить активацию пути JNK в анализе личиночной пункционной раны, мы проанализировали экспрессию lacZ репортеров транскрипции puc и деформированных (msn), двух генов, индуцированных активацией пути JNK в других контекстах (Martin-Blanco et al. . 1998; Рамет и др. 2002).

Рис. 4. Индукция и функция пути JNK вокруг колотых ран

(A – C) Личинки, несущие репортер пути JNK puc-lacZ, , который экспрессирует ядерную β-галактозидазу, были имитированы ранением (A) или пункцией раненых (B и C), а затем культивировали в течение указанного времени перед окрашиванием X-gal для визуализации активности репортера (синий).В неповрежденном эпидермисе (A) репортерная активность незначительна, но через 4 часа после ранения репортер экспрессируется в градиенте, исходящем из раны, с максимальной экспрессией в ряду эпидермальных ядер на краю раны и снижением уровней в окружающих ядрах до на расстоянии пяти диаметров ячейки. Через 24 часа (C) экспрессия репортера снизилась.

(D – F) Личинки, несущие репортер пути JNK. msn-lacZ, , обработанные, как указано выше. Вызванная ранением экспрессия репортера наблюдается до семи диаметров клеток.

(G – I) Личинки, несущие трансгены msn-lacZ и A58-Gal4 и UAS-bsk DN (для инактивации пути JNK в эпидермисе личинок), обработанных, как указано выше. Индукция репортера подавлена, но струп образуется нормально.

(J и K) Личинки, несущие msn-lacZ и либо UAS-bsk DN отдельно в качестве контроля (J), либо A58-Gal4 и UAS-bsk DN трансгенов (K), ранены как указано выше, и проанализировали через 24 часа с помощью иммуноокрашивания на Fasciclin III и β-галактозидазу.Индукция репортера ингибируется в (K), но эпидермальные клетки ориентированы в сторону раны, и хотя окрашивание ядерной β-галактозидазы слабое, тщательный осмотр показывает, что клетки, расположенные ближе всего к ране, слились с образованием синцития. Образование синцития подтверждали с использованием маркера A58-Gal4> UAS-GFP.nls .

(L и M) Личинки, несущие msn-lacZ и либо UAS-bsk DN отдельно в качестве контроля (L), либо A58-Gal4 и UAS-bsk DN трансгенов (M), раненые и проанализированы через 24 часа с помощью ТЕМ.Обратите внимание, что эпидермис в M не смог распространиться через раневую щель и все еще является прерывистым (звездочки). Кутикула не образовалась в раневой щели, но кутикула, прилегающая к ране, кажется утолщенной.

Бар в (I), 100 мкм (для [A – I]). Штанга в (K), 50 мкм (для [J и K]). Штанга в (M), 5 мкм (для [L и M]).

https://doi.org/10.1371/journal.pbio.0020239.g004

В неповрежденном эпидермисе личинок обнаруживалась небольшая или не обнаруживаемая экспрессия репортера msn или puc (рис. 4A и 4D).Однако в течение 1 часа после ранения экспрессия обоих репортеров была легко обнаружена в эпидермальных клетках, окружающих рану, и через 4 часа оба репортера показали устойчивую экспрессию (рис. 4B и 4E; неопубликованные данные). Репортеры msn и puc индуцировались в больших, примерно симметричных зонах, простирающихся от трех до семи диаметров клеток от места пункции. Внутри каждой зоны репортеры экспрессировались в градиенте, при этом клетки, ближайшие к месту пункции, демонстрировали самый высокий уровень экспрессии, что позволяет предположить, что репортеры индуцируются сигналом, исходящим от места раны.Зона экспрессии репортера msn обычно шире, чем зона экспрессии puc, возможно, потому, что он более чувствителен к индуцирующему сигналу. Экспрессия обоих репортеров достигла пика между 4 и 8 часами после ранения и после этого снижалась, при этом экспрессия ограничивалась клетками, ближайшими к ране (рис. 4C и 4F).

Чтобы определить функцию индукции пути JNK, мы проанализировали заживление ран у личинок, у которых путь JNK был инактивирован. Поскольку нулевые мутации в генах пути JNK блокируют дорсальное закрытие и являются эмбриональной летальностью, мы избирательно ингибировали этот путь в эпидермисе личинок, экспрессируя доминантно-отрицательную форму корзины JNK (восходящая последовательность активации-корзина , доминантно-отрицательная [UAS-bsk DN ]) под управлением драйвера A58-Gal4 , специфичного для эпидермиса драйвера, который включается на ранних стадиях развития личинок. UAS-bsk DN был использован, потому что он является наиболее мощным доступным ингибитором пути JNK (см. Материалы и методы): он давал тяжелый фенотип дорсального закрытия и летальность при экспрессии в эмбриональном эпидермисе с использованием e22c-Gal4 или 69Б-Гал4 драйверы. Напротив, личинки, экспрессирующие UAS-bsk DN под контролем драйвера A58-Gal4 , были жизнеспособными и активными и не проявляли никаких морфологических аномалий, что позволяет предположить, что путь JNK не играет критической роли в эпидермисе личинок. в нормальных условиях окружающей среды.Однако после ранения индукция репортера msn была почти полностью отменена (рис. 4G – 4I), и процесс заживления ран был значительно нарушен.

Мы проанализировали влияние ингибирования пути JNK на заживление ран, используя анализы, используемые для личинок дикого типа. На ранних этапах заживления ран не было обнаружено никаких дефектов, включая образование струпа, ориентацию эпидермальных клеток по направлению к ране и слияние эпидермальных клеток с образованием синцития (см. Рисунок 4G – 4K).Однако ультраструктурный анализ показал, что реэпителизация была заблокирована или дефектна, без цитоплазматических процессов или только очень тонкие или искаженные отростки и отсутствие нового синтеза кутикулы под струпом через 16 часов после ранения (рис. 4L и 4M; данные не показаны).

Чтобы дополнительно проверить необходимость пути JNK в реэпителизации, мы проанализировали личинок, у которых часть эпидермиса была истерта в результате непроникающей процедуры защемления ран (описанной ниже), которая оставляет гораздо больший промежуток в эпидермисе, чем тонкий прокол. рана и, следовательно, обеспечивает более тщательный тест на реэпителизацию раны (рис. 5).У контрольных личинок, у которых путь JNK не ингибировался, эпидермис распространился, чтобы закрыть разрыв, и полная реэпителизация была очевидна в течение 24 часов после ранения (рис. 5A и 5B). Напротив, у личинок, у которых путь JNK был ингибирован, эпидермис не распространился, и оставался большой разрыв (рис. 5C). Мы пришли к выводу, что индукция пути JNK способствует распространению и реэпителизации эпидермиса личинок, но, по-видимому, необязательна для других этапов заживления ран, включая образование струпа, ориентацию клеток и слияние клеток.

Рисунок 5. Клеточные реакции и генетические требования к заживлению защемленной раны

(A – D) Личинок, несущих репортер msn-lacZ и указанные трансгены или мутации, зажимали щипцами, чтобы стереть область дорсального эпидермиса, но оставить ее. вышележащая кутикула цела. Раненых личинок культивировали в течение указанного времени и иммуноокрашивали на фасциклин III (красный) и β-галактозидазу (зеленый).

(A) через 6 часов после защемления. Обратите внимание на большой эпидермальный зазор (звездочка) в месте раны.Некоторые клетки на краю раны удлинены и ориентированы по направлению к ране (стрелки). Остальные слились в синцитии (стрелка).

(B) через 24 часа после защемления. Эпидермис распространился, чтобы закрыть разрыв. Обратите внимание на дезорганизацию эпидермиса и синцитий (стрелки) на месте зажившей раны.

(C) Личинка A58-Gal4 и UAS-bsk DN через 24 часа после защемления. Распространение эпидермального слоя замедляется, и остается большой промежуток в ране (звездочка). Однако клетки на краю раны по-прежнему ориентируются по направлению к ране (наконечники стрелок) и сливаются, образуя синцитии (стрелки).

(D) Гемизиготная личинка мутанта lz r15 через 24 часа после защемления. lz r15 блокирует развитие кристаллических клеток и образование струпа в колотых ранах (рис. 6), но при заживлении защемленных ран дефектов не наблюдается.

(E и F) Личинки, несущие репортер msn-lacZ , были искусственно ранены (E) или ранены защемлением (F), культивированы в течение 4 часов и окрашены X-gal (синий). Ранение индуцирует экспрессию репортера в градиенте, простирающемся на четыре диаметра клетки.В щели (звездочка) отсутствует корка.

Бар, 100 мкМ.

https://doi.org/10.1371/journal.pbio.0020239.g005

Кристаллические клетки способствуют образованию струпа

Чтобы исследовать роль струпа в заживлении колотых ран, мы искали способы генетически заблокировать образование струпа (рис. 6). Кристаллические клетки — это особый тип клеток крови, которые содержат характерные кристаллоподобные внутриклеточные включения, и долгое время предполагалось, что они играют роль в реакциях меланизации, например, в образовании струпа (Rizki and Rizki 1959, 1984).Ген лепешки (lz) кодирует фактор транскрипции, необходимый для развития линии кристаллических клеток (Lebestky et al. 2000), а кристаллические клетки сильно уменьшены или отсутствуют у lz r15 гомозиготных или гемизиготных личинок (рис. 6A). и 6Б). У мутантных личинок lz r15 не удалось сформировать корку, которую можно обнаружить с помощью световой микроскопии (рис. 6C и 6D), а анализ ПЭМ показал диффузную пробку в месте раны вместо уплотненной, электронно-плотной пробки и струпа, которые обычно присутствует через 24 часа после ранения (рис. 6E и 6F).Этот дефект образования парши, вероятно, связан с воздействием lz r15 на кристаллические клетки, а не с каким-либо другим эффектом мутации, поскольку образование парши также подавлялось у личинок, гомозиготных по черных клеток (Bc) (данные не показано), мутации, которая изменяет морфологию кристаллических клеток и устраняет активность фенолоксидазы сыворотки (Rizki et al. 1980). Мы пришли к выводу, что кристаллические клетки необходимы для консолидации и меланизации пробки, чтобы сформировать струп во время заживления ран.

Рис. 6. Влияние lz на образование струпа и другие случаи заживления колотых ран

(A и B) Задний lz + ( w 1118 ) (A) и lz r15 мутантные (B) личинки L3. Личинки нагревали, поэтому кристаллические ячейки выглядели как крошечные черные точки. У мутанта lz r15 отсутствуют кристаллические клетки. Пруток, 200 мкм.

(C и D) Микрофотографии контрольных lz + ( w 1118 ) (C) и lz r15 мутантных (D) личинок L3 через 4 ч после пункционного ранения.На участке раны lz r15 (обведено) струпа не обнаружено. Пруток, 50 мкм.

(E и F) ПЭМ-срезы через 24-часовые колотые раны контрольной lz r15 / + гетерозиготы (E) и гемизиготной lz r15 мутантной личинки (F), обе несли msn-lacZ трансген. Консолидированный, электронно-плотный струп образовался у контрольной личинки (E), но только диффузная пробка с периферической электронной плотностью присутствует в гемизиготной ране lz r15 (F).Электронная плотность пробки lz r15 может быть связана с остаточной активностью меланизации у мутанта lz r15 . Хотя реэпителизация завершена в мутантной ране lz r15 , эпидермис содержит большие вакуоли и многочисленные апикальные отростки, и он отделен от старой кутикулы промежутком (звездочками) и не секретирует новую кутикулу. Другие проанализированные 24-часовые lz r15 мутантные раны имели некротический или прерывистый эпидермис в месте раны (не показано).Пруток, 10 мкм.

(G и H) Флуоресцентные микрофотографии 20-часовых колотых ран в контроле (G) и lz r15 мутантных (H) личинок, несущих репортер msn-lacZ , которые были обработаны, как указано выше, и иммуноокрашены на Fasciclin III ( красный) и β-галактозидаза (зеленый). Эпидермальные клетки как в контроле, так и в lz r15 мутантных ранах слились с образованием синцитии (стрелки), а клетки в контроле ориентированы к месту раны (стрелки). Ориентационный ответ эпидермальных клеток у мутанта lz r15 трудно оценить, потому что границы клеток на расстоянии шести диаметров от раны кажутся слабыми и волнистыми.Пруток, 50 мкм.

(I – L) X-gal окрашивание 6-часовых колотых ран контрольной группы lz + (I и K) или lz r15 гемизиготных мутантных личинок (J и L), несущих msn -lacZ (I и J) или puc-lacZ (K и L). Обратите внимание на отсутствие корочек и повышение репортерной активности (синий) в lz r15 . Базальный уровень экспрессии репортера в неповрежденном эпидермисе не увеличивался в lz r15 (не показано).

Пруток, 50 мкм.

https://doi.org/10.1371/journal.pbio.0020239.g006

Необработанные lz r15 личинок были жизнеспособными и активными, но немногие выжили после обычной процедуры колотого ранения (Рисунок 7). К 4 часам после ранения только 55% личинок из lz r15 были живы, а через 24 часа выжило только 15%, большинство из которых были вялыми и вялыми. Напротив, 85% или более из lz + контрольных личинок выжили после процедуры ранения.Таким образом, образование корки имеет решающее значение для заживления колотых ран.

Рисунок 7. Влияние lz на выживаемость после колотого ранения

Контроль lz + ( w 1118 ) и lz r15 мутантных личинок были ранены колотыми или имитируемыми и культивированы для 4 или 24 ч. Показан процент обработанных личинок живыми и подвижными в каждый момент времени. Значения представляют собой среднее значение (± стандартная ошибка среднего) от трех до шести независимых экспериментов с десятью или более обработанными личинками на момент времени.

https://doi.org/10.1371/journal.pbio.0020239.g007

Струп стабилизирует место раны и предотвращает супериндукцию пути JNK

Затем мы исследовали клеточные события заживления ран у личинок lz r15 , используя методы, описанные выше для мутантов дикого типа и пути JNK, за исключением того, что для ранения использовали более острые булавки, чтобы увеличить выживаемость и провести анализ последних этапы заживления ран.Большинство клеточных ответов на ранение, по-видимому, инициировалось у мутантов lz r15 , хотя они не развивались нормально. Произошло слияние эпидермальных клеток, но синцитий часто занимал большую площадь, чем у контрольных личинок (см. Рис. 6G и 6H). Окружающие эпидермальные клетки также располагались вокруг раны, но границы их клеток были слабыми и волнистыми, даже на несколько диаметров клеток от раны, что затрудняло оценку того, были ли они ориентированы по направлению к ране (см. Рисунок 6H).Подобный, хотя и менее выраженный фенотип «волнистой границы» наблюдался у мутантных личинок Bc . Анализ ПЭМ показал, что клетки эпидермиса размером до 200 мкм или более за пределами края раны отделяются от вышележащей кутикулы вокруг раны (см. Фигуру 6F). Однако отслоившиеся клетки расширили многочисленные тонкие клеточные отростки в явной попытке закрыть рану. Иногда края проколотого эпидермиса сходились для восстановления целостности эпителия, но в большинстве случаев этого не происходило (см. Рисунок 6F; данные не показаны).

Мутация lz r15 также вызвала супериндукцию репортеров пути JNK. Хотя базальный уровень экспрессии репортеров msn и puc в неповрежденном эпидермисе не изменился, оба они экспрессировались на более высоких уровнях и в расширенной зоне вокруг места раны через 3, 6 и 24 часа после ранения (см. Рисунок 6I. –6L; данные не показаны). Аналогичный эффект наблюдался у мутантов Bc . Таким образом, образование корки ограничивает индукцию пути JNK вокруг колотых ран.

Для дальнейшего изучения роли струпа в заживлении ран была разработана процедура заживления ран без чешуек. Кутикулу личинки осторожно защемляли рассекающими щипцами, оставляя кутикулу неповрежденной, но счищая участок эпидермальных клеток с ее внутренней поверхности (см. Рис. 5А). Хотя эти защемленные раны не кровоточили и не образовывали струпьев, эпидермальные клетки в месте раны испытывали многие из тех же реакций, что и при колотых ранах. Многие клетки на краю раны ориентированы к ране, а некоторые сливаются с соседними клетками, образуя синцитии (см. Рис. 5A и 5B).Кроме того, репортер msn индуцировался градиентом в клетках, окружающих рану (см. Рис. 5A и 5F), и клетки распространились, чтобы закрыть зазор в ране в течение 24 часов (см. Рис. 5B). Таким образом, каждый из основных ответов эпидермальных клеток на ранение может происходить нормально в отсутствие струпа, при условии, что кутикула остается неповрежденной. Действительно, первичная функция струпа может заключаться в восстановлении целостности кутикулы и участка раны, потому что lz r15 мутантных личинок не обнаруживают каких-либо дефектов в заживлении защемленных ран: эпидермальные клетки вокруг раны поляризованы и слиты, как в контроле lz + репортеры пути JNK были индуцированы на своих нормальных уровнях и в своем нормальном домене вокруг участка раны, а эпидермальные клетки распространились по ране и зажили с нормальной кинетикой (см. фиг. 5D).Таким образом, критическая функция струпа, по-видимому, заключается в обеспечении стабильности поврежденной кутикулы и участка раны, а дефекты, наблюдаемые в ответах эпидермальных клеток после прокола мутантов lz r15 , скорее всего, возникают вторично по отношению к стойкой нестабильности. места раны.

Обсуждение

Мы провели анализ заживления эпидермальных ран на личинках дрозофилы и выяснили клеточные события и генетические требования процесса заживления.После колотого ранения поврежденные эпидермальные клетки и их соседи выполняют серию реакций, которые ограничивают кровопотерю и восстанавливают целостность эпидермиса и вышележащей кутикулы (см. Рисунок 1N). Вскоре после ранения в раневой щели образуется пробка. В течение следующих нескольких часов внешняя часть пробки меланизируется, образуя струп, и клетки эпидермиса на краю раны начинают удлиняться и ориентироваться в направлении раны. Затем они сливаются друг с другом, образуя синцитий, окружающий рану.Впоследствии более периферические клетки ориентируются и сливаются с центральным синцитием. На участке раны не было обнаружено пролиферации эпидермальных клеток или образования актинового кабеля. Вместо этого эпидермальные клетки, окружающие рану, мигрируют вдоль или через пробку, чтобы восстановить непрерывность эпителия, его базальной пластинки и выстилки кутикулы.

Каждый из этих ответов — образование струпа, ориентация и слияние эпидермальных клеток, распространение и реэпителизация эпидермиса — происходит в определенные моменты времени и в определенных местах во время заживления ран.Однако наши результаты показывают, что эти ответы находятся под отдельным генетическим контролем и не связаны случайно (рис. 8). Образование струпа зависит от кристаллических клеток и ингибируется мутациями lz r15 и Bc . Эпидермальное распространение и реэпителизация требуют активности пути bsk и JNK, которая быстро индуцируется в эпидермальных клетках, окружающих место раны. Ориентация и слияние эпидермальных клеток может происходить даже в отсутствие образования струпа или активности пути JNK.Хотя разные ответы имеют разные генетические требования и могут инициироваться независимо друг от друга, мы определили одно важное взаимодействие между ними. У мутантов lz r15 и Bc реэпителизация инициировалась, но не всегда завершалась, и путь JNK был гипериндуцированным, что означает, что струп обычно способствует реэпителизации и сдерживает активацию JNK.

Рис. 8. Модель клеточных событий и генетических требований к заживлению ран личинки

Колотое ранение разрушает эпидермис и покрывающую его кутикулу и запускает три параллельные серии показанных событий, каждое из которых имеет свои генетические требования.Образование пробки и струпа стабилизирует участок раны, что способствует распространению эпидермальных клеток и подавляет активацию JNK, возможно, по механизму отрицательной обратной связи (пунктирная линия). Гены lz и Bc способствуют образованию струпа, предположительно, способствуя развитию кристаллических клеток и продукции и секреции факторов меланизации сыворотки этими клетками. Распространяющиеся клетки эпидермиса синтезируют кутикулу и базальную пластинку и очищают раневые остатки путем фагоцитоза. Ранение защемлением разрушает эпидермис, но не покрывающую кутикулу, и запускает только события, показанные черным цветом.Тем не менее, синтез кутикулы и базальной пластинки и фагоцитоз не изучались при защемлении ран, и только предполагалось, что они происходят из исследований колотых ран. Ранение может вызывать дополнительные сигналы (не указаны), которые привлекают клетки крови (плазматоциты) и ветви трахеи.

https://doi.org/10.1371/journal.pbio.0020239.g008

Ниже мы обсуждаем механизмы и функции каждой из этих реакций заживления ран и сигналов, которые их запускают, и предлагаем механистическую основу наблюдаемого взаимодействия. между образованием струпа, реэпителизацией и активацией JNK.Мы также сравниваем заживление ран у Drosophila с родственными процессами у млекопитающих и размышляем об их эволюционной взаимосвязи.

Формирование и функция струпа

Пробка раны, которая образуется вскоре после колотого ранения, содержит обломки клеток, а также может содержать продукты свертывания крови, подобные тем, которые были обнаружены у других членистоногих (Nakamura et al. 1976; Barwig 1985; Geng and Dunn 1988) и недавно у Drosophila ( Scherfer et al.2004 г.). В течение следующих нескольких часов пробка быстро темнеет и становится электронно-плотной, предположительно в результате реакции меланизации. Хотя природа и степень сшивания меланина с тканями не изучались, кажется вероятным, что полимер связывается с компонентами раневой пробки и кутикулой, укрепляя и стабилизируя раневой участок.

Наши результаты определяют два важных требования для созревания пробки и образования корки. Один из них — кристаллические ячейки. Мутации lz r15 и Bc, , которые блокируют развитие или функцию кристаллических клеток, ингибируют образование струпа на участках колотых ран.Эффект был особенно поразительным у мутантов lz r15 : струп не был обнаружен световой микроскопией, а ультраструктурные исследования выявили только дезорганизованный аморфный мусор там, где обычно струп образуется. Поскольку кристаллические клетки обычно не обнаруживаются в местах прокола ран (Г. Фиш, М. Дж. Галко и М. А. Краснов, неопубликованные данные), эти результаты подтверждают модель, в которой кристаллические клетки способствуют образованию струпа, поставляя факторы сыворотки, такие как пропенолоксидаза, которые необходимы для сформировать или закрепить струп.

Другое важное требование для образования струпа — это разрыв, охватывающий как эпидермис, так и кутикулу. И в колотых, и в защемленных ранах нарушается эпидермальный слой, но только колотые раны образуют струпья. Наиболее очевидное различие между двумя типами ран заключается в том, что слой кутикулы остается неповрежденным после защемления. Это заставляет нас предположить, что образование корки инициируется сигналом, генерируемым или высвобождаемым при разрыве кутикулы, или при контакте между сывороткой и разорванной кутикулой или воздухом.Одним из следствий этого может быть местная активация пропенолоксидазы сериновыми протеазами, которые присутствуют в виде неактивных зимогенов в кутикуле насекомых (Ashida and Brey 1995; Jiang et al. 1998).

Струп, по-видимому, выполняет по крайней мере три функции при заживлении ран. Один — предотвратить обескровливание. Drosophila имеет открытую систему кровообращения, поэтому любой разрыв эпидермиса и кутикулы приведет к потере крови. lz r15 мутанты не образуют корки и плохо выживают после колотого ранения; несколько выживших личинок выглядели вялыми, что свидетельствовало о продолжающейся кровопотере из раны.Хотя пробка из раны, вероятно, временно останавливает кровотечение, образование струпа необходимо для формирования стабильного гемостатического барьера. Во-вторых, струп, вероятно, выполняет иммунную функцию, что также может повысить выживаемость при колотом ранении. Предшественники ортохинона меланина цитотоксичны для микроорганизмов (Nappi and Ottaviani 2000) и могут защищать от инфекции даже до созревания парши, создавая физический барьер для проникновения микробов.

Третья функция струпа — обеспечение структурной стабильности раны, что имеет решающее значение для следующей фазы заживления раны — реэпителизации.Это происходит из-за неспособности реэпителизации после ранения пункцией lz мутантов, которые неспособны образовывать нормальный струп. lz потеря функции не вызывает какого-либо внутреннего дефекта реэпителизации, потому что реэпителизация защемленных ран у мутанта протекала нормально. Кроме того, путь JNK был активирован в раненом эпидермисе lz мутантных колотых ран, и клетки на краю раны, по-видимому, инициировали реэпителизацию, распространяя отростки в раневую щель.Однако эпидермис не всегда полностью закрывает и закрывает разрыв. Эти результаты предполагают, что при повреждении и эпидермиса, и кутикулы струп необходим для стабилизации раневой щели, позволяющей эпидермису распространяться по ней и закрывать ее. В отсутствие струпа путь JNK гипериндуцирован, эпидермальные клетки по краям раны отделяются от вышележащей кутикулы и распространяют обильные цитоплазматические процессы, в результате чего возникает хроническая рана.

Ориентация и слияние эпидермальных клеток

Две интригующие клеточные реакции во время заживления ран — это ориентация эпидермальных клеток на место раны и их последующее слияние с образованием синцития.Во время ориентации клетки эпидермиса на краю раны удлиняются вдоль оси, радиальной к месту прокола, и сокращаются вдоль оси, окружной к нему, при этом часть клетки, ближайшая к ране, сокращается больше всего, придавая характерную конусность. Эти клетки затем сливаются, соединяя свои ориентированные по окружности домены плазматической мембраны и устраняя свои радиально ориентированные мембранные домены, которые контактируют с соседними клетками. Это означает, что эпидермальные клетки способны ощущать свое местоположение по отношению к ране и организовывать свои домены цитоскелета и плазматической мембраны по отношению к ней.

По мере заживления раны ориентация и слияние клеток обычно распространяется, включая более периферические клетки, в результате чего образуются большие синцитии с до 30 ядрами в колотых ранах и меньшие рассеянные синцитии в защемленных ранах. Возникновение этих ответов в клетках за пределами раны предполагает, что они не являются прямым результатом повреждения, а скорее вызваны и ориентированы сигналом, произведенным ранением, который может распространяться на несколько диаметров клетки от раны.

Функция ориентации и слияния эпидермальных клеток может заключаться в том, чтобы вместить больше клеток вокруг раны и помочь изолировать место раны за счет устранения межклеточных пространств.Это может быть похоже на слияние макрофагов млекопитающих в многоядерные гигантские клетки, когда они окружают и поглощают большие инородные тела (Chambers 1977). Действительно, как и макрофаги, сливающиеся эпидермальные клетки кажутся фагоцитарно активными, поглощая мусор в месте раны. Хотя тесная временная и пространственная взаимосвязь между ориентацией эпидермальных клеток и слиянием предполагает, что эти ответы, вероятно, будут сопряженными, мутанты, которые специфически блокируют каждый процесс, будут необходимы, чтобы определить, связаны ли они случайно или просто координируются общим восходящим сигналом.

Эпидермальное распространение и реэпителизация

Самым важным клеточным ответом для долгосрочного здоровья животного является восстановление целостности эпителия. Однако распространение эпителия обычно не проявляется в течение нескольких часов после ранения. Это дает время для индукции пути JNK и активации механизма миграции клеток в эпидермальных клетках, а также для сборки зрелой раневой пробки, сквозь которую или вдоль которой движутся клетки.Распространение, по-видимому, является активным процессом миграции эпидермальных клеток, поскольку во время распространения не было обнаружено никаких доказательств механизма закрытия кисетной нити или деления клеток; вместо этого, самым ранним морфологическим проявлением распространения были ламеллиподиальные расширения, признак активной миграции клеток, которые проходят вдоль и через пробку раны. Распространение, вероятно, требует сдвига адгезионных свойств эпидермальных клеток от их нормальной плотной связи с вышележащей кутикулой к сродству к пробке и способности проникать сквозь пробку.

Для распространения также требуется сигнал в месте раны, который индуцирует путь JNK в окружающих клетках и активирует механизм миграции клеток. Это должен быть локальный сигнал, исходящий от места раны, который может влиять на клетки на расстоянии до семи диаметров клеток. Активирующий сигнал может направлять миграции через раневую щель, или клетки могут беспорядочно распространяться по матрице, пока их движение не будет остановлено контактным торможением.

Основная функция реэпителизации — восстановление нормальной барьерной функции эпидермиса.Действительно, распространяющиеся эпидермальные клетки в конечном итоге секретируют толстый слой кутикулы на своей апикальной поверхности, который вытесняет струп, а также они снабжают новую базальную пластинку. Распространяющиеся клетки, по-видимому, также играют важную роль в очистке от остатков раны, поскольку иногда они поглощают обломки и часто содержат материал, напоминающий обломки в фагосомах. Эпидермальные клетки могут разделять эту роль поглощения с плазматоцитами, циркулирующими фагоцитами, рекрутируемыми на участки ран после ранения (G.Фиш, М. Дж. Галко, М. А. Краснов, неопубликованные данные). После того, как реэпителизация завершена, инородные тела очищены, а струп отшелушивается или разрушается, трудно различить старое место раны с помощью световой микроскопии. Однако заживление не обходится без шрамов; синцитий, образующийся во время заживления, сохраняется и отмечает место раны, по крайней мере, до начала метаморфоза. Иногда такие синцитии также наблюдаются у необработанных личинок; это могут быть шрамы от естественных ран, полученных ранее в личиночной жизни.

Рана как сигнальный центр

Результаты показывают, что существует множество сигналов, индуцируемых ранением, которые контролируют и координируют различные события заживления личиночной раны: сигнал, который инициирует образование раневой пробки и струпа, сигнал, который ориентирует окружающие клетки эпидермиса и побуждает их слиться, активирует путь JNK и миграцию эпидермальных клеток, а также один из них, зависящий от образования струпа, который подавляет путь JNK.Также могут быть сигналы, которые привлекают плазматоциты для борьбы с инфекцией и ветви трахеи для увеличения оксигенации раны (М. Дж. Галко, неопубликованные данные).

Эти сигналы имеют разные свойства. Одно очевидное различие — это диапазон их активации вокруг раны. Сигнал, запускающий образование пробки и струпа, действует только в эпидермисе и кутикуле, тогда как активатор пути JNK влияет на клетки на расстоянии до семи диаметров клеток. Некоторые сигналы влияют только на поврежденные клетки и их соседей, тогда как другие, такие как предполагаемые плазматоциты и аттрактанты трахеи, должны достигать циркулирующих клеток и других тканей.

Некоторые из сигналов могут быть диффузными молекулами, выпущенными поврежденными клетками. Это могут быть внутриклеточные компоненты, такие как мочевая кислота, гистоны или белки теплового шока, все из которых, как было показано, высвобождаются некротическими клетками млекопитающих и участвуют в качестве межклеточных сигналов (Ohashi et al. 2000; Li et al. 2001; Scaffidi и др. 2002; Ши и др. 2003). Они также могут быть более традиционными сигнальными молекулами, такими как факторы роста фибробластов, секретируемые при ранении позвоночных (Werner et al.1992).

Не все сигналы должны быть свободно распространяемыми. Связанные с поверхностью сигналы могут последовательно передаваться от одной клетки к другой, и некоторые сигналы могут быть скорее механическими, чем химическими. Ранение, по-видимому, изменяет свойства растяжения эпидермиса вокруг места раны (см. Рисунок 6H), что может служить механическим стимулом для некоторых реакций. Это привлекательная идея для контроля активации пути JNK, поскольку было показано, что изменения механического стресса активируют передачу сигналов JNK в других типах клеток (Ingram et al.2000; Kippenberger et al. 2000; Мартино и Гардинер 2001). После завершения реэпителизации напряжение может быть восстановлено, и передача сигналов уменьшится. В самом деле, такая цепь обратной связи обеспечивает правдоподобную механистическую основу для ингибирующего эффекта образования струпа на путь JNK (см. Рисунок 8). При отсутствии струпа реэпителизация не удается и напряжение не восстанавливается, оставляя путь JNK неограниченным.

Неясно, сколько различных сигналов генерируется ранением, потому что отдельные сигналы могут регулировать множественные ответы.Сейчас первоочередной задачей является молекулярная идентификация сигналов и механизмов, с помощью которых они контролируют и координируют реакции заживления ран.

Сравнение с другими процессами заживления ран

Заживление колотых ран личинок мало похоже на заживление ран у развивающегося эмбриона, которое происходит быстро за счет сборки актинового троса и расширения филоподий клетками на краю раны, и протекает без образования струпа (Kiehart et al.2000; Wood et al. 2002). Несмотря на существенные структурные различия между Drosophila и эпидермисом млекопитающих, заживление эмбриональных ран похоже на заживление ран у эмбрионов млекопитающих, где это также быстрый процесс, включающий образование актинового кабеля, но без явной гемостатической или воспалительной реакции (Martin and Lewis 1992). Точно так же заживление личиночных ран во многом похоже на заживление постэмбриональных ран у млекопитающих. Оба процесса начинаются с образования пробки или сгустка, заполняющего раневую щель.Оба используют пробку в качестве временного субстрата, через который мигрируют окружающие эпидермальные клетки. В обоих процессах окружающие эпидермальные клетки ориентируются к месту раны, активируются для миграции и распространяются через пробку аналогичным образом — путем расширения ламеллиподий, а затем их клеточных тел в пробку, пока непрерывность эпидермиса не будет восстановлена. Затем клетки повторно дифференцируются, чтобы восстановить морфологию эпидермиса. Кроме того, воспалительные клетки рекрутируются в рану в обоих отростках, и пробка реконструируется, образуя струп, который разрушается или отшелушивается после завершения восстановления и повторной дифференцировки.

Несмотря на это общее сходство, существует много специфических различий между каждой параллельной ступенью у Drosophila и млекопитающих. Например, состав пробки Drosophila и сгустка млекопитающих, вероятно, различается, потому что механизмы свертывания у членистоногих включают протеолитические каскады, аналогичные таковым у млекопитающих, но с разными коагулогенами (Nakamura et al. 1976; Barwig 1985; Geng and Dunn 1988; Scherfer и др. 2004). Кроме того, эпидермальные клетки Drosophila около раны не пролиферируют во время реэпителизации, как это делают их аналоги млекопитающих (Martin 1997).Клетки, окружающие рану Drosophila , сливаются с образованием синцития, тогда как эпидермальные клетки млекопитающих остаются отдельными, но динамически перестраивают свои соединения с соседними клетками по мере их распространения. Распространение клеток Drosophila несет с собой базальную пластинку, тогда как мигрирующие эпидермальные клетки млекопитающих отделяются от базальной пластинки (Odland and Ross 1968; Clark et al. 1982). Наиболее важным различием может быть степень рекрутирования клеток в место раны и последующее ремоделирование пробки, которые существенны у млекопитающих, но ограничены у Drosophila .

Эволюция реакции на заживление ран

Сходство между Drosophila и реакциями заживления ран у млекопитающих заставляет задуматься о том, являются ли они гомологичными процессами или результатом конвергентной эволюции. Поскольку на ранней стадии эволюции, вероятно, было бы сильное избирательное давление для реакции заживления ран, мы поддерживаем идею о том, что заживление ран — это древний процесс, который развился до расхождения мух и млекопитающих и впоследствии стал разнообразным.Действительно, параллели в эмбриональном и постэмбриональном процессах предполагают, что различные эмбриональные и постэмбриональные механизмы заживления ран уже существовали во время расхождения.

Если эта эволюционная гипотеза верна, то у Drosophila и млекопитающих все еще должны быть общие молекулярные проявления наследственных процессов. Образование актинового кабеля при заживлении ран эмбриона может быть одним из таких проявлений, а индукция сигнальных путей JNK и их участие в реэпителизации постэмбриональных ран может быть другим (Ramet et al.2002; Ли и др. 2003 г.). Другие могут стать очевидными после генетического анализа процессов заживления ран. Описанный здесь процесс заживления ран с его простой тканевой структурой, оптимизированным ответом и доступной генетикой обеспечивает управляемую систему для идентификации дополнительных генов и фундаментальных механизмов заживления ран.

Перепрограммирование резидентных в ране клеток in vivo приводит к образованию эпителиальной ткани кожи

  • 1.

    Гонсалес, К. А. У. и Фукс, Э. Кожа и ее регенеративные способности: союз между стволовыми клетками и их нишей. Dev. Ячейка 43 , 387–401 (2017).

    CAS Статья Google ученый

  • 2.

    Сан Б. К., Сипрашвили З. и Хавари П. А. Достижения в трансплантации кожи и лечении кожных ран. Наука 346 , 941–945 (2014).

    ADS CAS Статья Google ученый

  • 3.

    Гуртнер, Г. К., Вернер, С., Баррандон, Ю.И Лонгакер, М. Т. Восстановление и регенерация ран. Nature 453 , 314–321 (2008).

    ADS CAS Статья Google ученый

  • 4.

    Такахаши К. и Яманака С. Индукция плюрипотентных стволовых клеток из культур эмбриональных и взрослых фибробластов мыши с помощью определенных факторов. Cell 126 , 663–676 (2006).

    CAS Статья Google ученый

  • 5.

    Шривастава Д. и ДеВитт Н. Перепрограммирование клеток in vivo: следующее поколение. Ячейка 166 , 1386–1396 (2016).

    CAS Статья Google ученый

  • 6.

    Driskell, R.R. et al. Четкие клоны фибробластов определяют архитектуру дермы в развитии и восстановлении кожи. Природа 504 , 277–281 (2013).

    ADS CAS Статья Google ученый

  • 7.

    Молл Р., Диво М. и Лангбейн Л. Человеческие кератины: биология и патология. Histochem. Ячейка Биол . 129 , 705–733 (2008).

    CAS Статья Google ученый

  • 8.

    Boukamp, ​​P., Breitkreutz, D., Stark, H. J. & Fusenig, N. E. Опосредованная мезенхимой и эндогенная регуляция роста и дифференцировки кератиноцитов кожи человека, происходящих из различных участков тела. Дифференциация 44 , 150–161 (1990).

    CAS Статья Google ученый

  • 9.

    Ван Муйен, Г. Н., Варнаар, С. О. и Понек, М. Связанные с дифференцировкой изменения экспрессии цитокератина в культивируемых кератиноцитах и ​​в эпидермисе плода, новорожденного и взрослого человека. Exp. Ячейка Res . 171 , 331–345 (1987).

    Артикул Google ученый

  • 10.

    Окадзаки, М., Йошимура, К., Фудзивара, Х., Сузуки, Ю. и Харии, К. Индукция экспрессии твердого кератина в кератиноцитах, не связанных с ногтевым матриксом, фибробластами ногтевого матрикса через эпителиально-мезенхимальные взаимодействия. Пласт. Реконстр. Surg . 111 , 286–290 (2003).

    Google ученый

  • 11.

    Grimm, D. J. et al. Эволюция вектора генной терапии in vitro и in vivo посредством многовидового скрещивания и перенацеливания аденоассоциированных вирусов. Дж. Вирол . 82 , 5887–5911 (2008).

    CAS Статья Google ученый

  • 12.

    Snippert, H.J. et al. Гомеостаз кишечных крипт является результатом нейтральной конкуренции между симметрично делящимися стволовыми клетками Lgr5. Cell 143 , 134–144 (2010).

    CAS Статья Google ученый

  • 13.

    Hirsch, T. et al. Регенерация всего эпидермиса человека с использованием трансгенных стволовых клеток. Природа 551 , 327–332 (2017).

    ADS CAS Статья Google ученый

  • 14.

    Де Лука М., Пеллегрини Г. и Грин Х. Регенерация плоского эпителия из стволовых клеток культивируемых трансплантатов. Regen. Мед . 1 , 45–57 (2006).

    Артикул Google ученый

  • 15.

    Schmitz, A. et al. Оценка эпидермального барьера in vivo у мышей: анализ проникновения красителя. J. Invest. Дерматол . 135 , 1–4 (2015).

    Артикул Google ученый

  • 16.

    Robson, M.C. et al. Безопасность и влияние местного рекомбинантного основного фактора роста фибробластов на заживление хронических пролежней. Ann. Surg . 216 , 401–408 (1992).

    CAS Статья Google ученый

  • 17.

    Акита, С., Акино, К., Имаидзуми, Т. и Хирано, А. Основной фактор роста фибробластов ускоряет и улучшает заживление ожоговых ран второй степени. Регенерация для восстановления ран . 16 , 635–641 (2008).

    Артикул Google ученый

  • 18.

    Chapman, S., Liu, X., Meyers, C., Schlegel, R. & McBride, A.A. Кератиноциты человека эффективно иммортализуются ингибитором киназы Rho. J. Clin. Инвестировать . 120 , 2619–2626 (2010).

    CAS Статья Google ученый

  • 19.

    Чендлер, Р. Дж., Сэндс, М. С. и Вендитти, К. П. Интеграция рекомбинантных аденоассоциированных вирусов и генотоксичность: выводы на животных моделях. Hum. Джин Тер . 28 , 314–322 (2017).

    CAS Статья Google ученый

  • 20.

    Коттерман М. и Шаффер Д. В. Разработка аденоассоциированных вирусов для клинической генной терапии. Нац. Преподобный Genet . 15 , 445–451 (2014).

    CAS Статья Google ученый

  • 21.

    Мелино, Г., Мемми, Э. М., Пеличчи, П. Г. и Бернассола, Ф. Сохранение устойчивости эпителия с помощью p63. Sci. Сигнал . 8 , re9 (2015).

    Артикул Google ученый

  • 22.

    Луи Жен, В., Йоргенсен, Дж. А., Хаджар, Р.Дж. И Вебер Т. Существующие ранее антитела против аденоассоциированного вируса как проблема в генной терапии AAV. Hum. Gene Ther. Методы 24 , 59–67 (2013).

    CAS Статья Google ученый

  • 23.

    Райнватд, Дж. Г. и Грин, Х. Серийное культивирование штаммов эпидермальных кератиноцитов человека: образование ороговевших колоний из отдельных клеток. Cell 6 , 331–343 (1975).

    Артикул Google ученый

  • 24.

    Harajly, M. et al. Восстановление p53 при индукции и поддержании старения: дифференциальные эффекты в предраковых и злокачественных опухолевых клетках. Мол. Клетка. Биол . 36 , 438–451 (2016).

    CAS Статья Google ученый

  • 25.

    Provost, J. J. et al. Рецептор активатора плазминогена урокиназы индуцировал инвазию и метастазирование немелкоклеточного рака легкого, что требует экспрессии транспортера NHE1 и транспортной активности. Cell Oncol. (Dordr.) 35 , 95–110 (2012).

    CAS Статья Google ученый

  • 26.

    Shimizukawa, R. et al. Создание новой линии эмбриональных стволовых клеток, полученных от мышей C57BL / 6, повсеместно экспрессирующих EGFP. Бытие 42 , 47–52 (2005).

    CAS Статья Google ученый

  • 27.

    Roesch, K. et al.Транскриптом мюллеровских глиальных клеток сетчатки. J. Comp. Neurol . 509 , 225–238 (2008).

    CAS Статья Google ученый

  • 28.

    Дассуле, Х. Р., Льюис, П., Бей, М., Маас, Р. и МакМахон, А. П. Ежик Соник регулирует рост и морфогенез зуба. Разработка 127 , 4775–4785 (2000).

    CAS Google ученый

  • 29.

    Song, K. et al. Восстановление сердца путем перепрограммирования немиоцитов с помощью факторов сердечной транскрипции. Природа 485 , 599–604 (2012).

    ADS CAS Статья Google ученый

  • 30.

    Muzumdar, M. D., Tasic, B., Miyamichi, K., Li, L. & Luo, L. Глобальная мышь-репортер Cre с двойной флуоресценцией. Бытие 45 , 593–605 (2007).

    CAS Статья Google ученый

  • 31.

    Kurashige, C. et al. Роль белка 1, модифицирующего активность рецептора, в ангиогенезе и лимфангиогенезе при заживлении кожных ран у мышей. FASEB J . 28 , 1237–1247 (2014).

    CAS Статья Google ученый

  • 32.

    Хардман, М. Дж., Сиси, П., Банбери, Д. Н. и Бирн, К. Узорчатое приобретение барьерной функции кожи во время развития. Разработка 125 , 1541–1552 (1998).

    CAS Google ученый

  • 33.

    Matsuki, M. et al. Дефектный роговой слой и ранняя неонатальная смерть у мышей, лишенных гена трансглутаминазы 1 (трансглутаминазы кератиноцитов). Proc. Natl Acad. Sci. USA 95 , 1044–1049 (1998).

    ADS CAS Статья Google ученый

  • Огнестрельные ранения — реабилитация Информация | Гора Синай

    Если рана была серьезной, возможно, вам сделали операцию, чтобы:

    • Остановить кровотечение
    • Очистить рану
    • Найти и удалить части пули
    • Найти и удалить части сломанной или раздробленной кости
    • Установить дренажи или трубки для тела жидкости
    • Удаление частей или целых органов

    Огнестрельные ранения, проходящие по телу без поражения основных органов, кровеносных сосудов или костей, обычно вызывают меньшие повреждения.

    Возможно, в вашем теле остались осколки пуль. Часто их невозможно удалить, не причинив еще большего ущерба. Вокруг этих оставшихся частей образуется рубцовая ткань, что может вызвать постоянную боль или другой дискомфорт.

    В зависимости от травмы у вас может быть открытая или закрытая рана. Ваш лечащий врач расскажет вам, как сменить повязку и ухаживать за раной. Помните эти советы:

    • Держите повязку и область вокруг нее чистой и сухой.
    • Принимайте антибиотики или болеутоляющие в соответствии с указаниями. Огнестрельные ранения могут быть инфицированы, потому что в рану могут попасть предметы и осколки с помощью пули.
    • Попытайтесь приподнять рану так, чтобы она находилась над сердцем. Это помогает уменьшить отек. Возможно, вам придется делать это сидя или лежа. Вы можете использовать подушки, чтобы поддержать пространство.
    • Если ваш врач говорит, что все в порядке, вы можете приложить к повязке пакет со льдом, чтобы уменьшить отек. Спросите, как часто нужно прикладывать лед.Обязательно держите повязку сухой.

    Ваш врач может сначала сменить вам повязку. После получения разрешения на самостоятельную смену повязки:

    • Следуйте инструкциям по очистке и сушке раны.
    • Обязательно вымойте руки после снятия старой повязки и перед очисткой раны.
    • Снова вымойте руки после очистки раны и наложения новой повязки.
    • Не используйте очищающие средства для кожи, спирт, перекись, йод или мыло с антибактериальными химическими веществами на ране, если только ваш врач не сказал вам об этом.Это может повредить ткань раны и замедлить заживление.
    • Не наносите лосьон, крем или лечебные травы на рану или вокруг нее, не посоветовавшись предварительно с врачом.

    Если у вас есть нерассасывающиеся швы или скобы, ваш поставщик услуг снимет их в течение 3–21 дня. Не тяните за швы и не пытайтесь снять их самостоятельно.

    .

    Написать ответ

    Ваш адрес email не будет опубликован.